牡丹皮中丹皮酚提取工艺及包合工艺的研究

目的采用水蒸气蒸馏法提取牡丹皮中的丹皮酚。方法以丹皮酚的提取率为考察指标,以加水量、氯化钠用量、提取时间作为考察的3个主要因素,通过L9(34)正交试验法优化牡丹皮中丹皮酚的最佳提取工艺条件。包合工艺在前人研究基础上进一步考察了β-环糊精与水的比例。结果最佳提取工艺为24倍加水量,5%氯化钠,提取时间2 h;包合工艺中β-环糊精与水的比例确定为1∶6。结论该提取工艺简便、快速,具有一定的可行性,可以作为牡丹皮中丹皮酚的提取工艺。该包合工艺可以提高丹皮酚的包封率。     

分光光度法测定展毛地椒提取物中总黄酮含量的适应性研究

目的建立适应展毛地椒提取物中总黄酮含量的分光光度测定方法。方法以芦丁、芹菜素、木犀草素及槲皮素为对照品,比较直接测定法、盐酸-镁粉、亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠及三氯化铝显色法在200~600 nm扫描图谱,分析不同方法对展毛地椒提取物中总黄酮含量测定的适应性。结果直接测定法、盐酸-镁粉显色法中,四种对照品溶液与样品溶液均无共有吸收波长。亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠法以芦丁为对照品,检测波长为502 nm。三氯化铝法以芹菜素为对照品,检测波长为340 nm。两种方法方法学考察均符合定量测定要求,可用于测定样品溶液中总黄酮。结论硝酸铝显色法测定总黄酮含量是三氯化铝显色法的4倍左右,含量显著偏高。故选用三氯化铝显色法,其干扰小,专属性好,准确性高,且简便快速,更适用于展毛地椒提物中总黄酮的含量测定。     

不同种质金线莲氨基酸和矿物质元素量的比较

目的比较不同种质金线莲中氨基酸和矿物质元素的差异。方法采用全自动氨基酸分析仪和原子吸收光谱仪测定11个不同种质金线莲中氨基酸和矿物质元素的量。结果不同种质金线莲必需氨基酸为2.81%~4.47%,总氨基酸量为11.38%~17.06%,其中天门冬氨酸、谷氨酸和精氨酸的量明显高于其他氨基酸组分。矿物质元素中钾元素的量最高,其顺序为KCaMgFeMnZnCrCuPbCd。主成分分析表明丙氨酸、丝氨酸、谷氨酸、天门冬氨酸、苏氨酸、异亮氨酸、丙氨酸、苯丙氨酸、亮氨酸为金线莲的特征性氨基酸,Fe、Zn、Mn、Ca、Cr、Mg为金线莲的特征性元素。结论金线莲中氨基酸和矿物质元素量存在地域性差异。     

大豆黄卷总黄酮测定方法及水提取动力学模型的建立

目的:建立大豆黄卷总黄酮的测定方法,同时对其水煎煮过程中的提取动力学过程进行模拟,建立动力学方程并验证。方法:采用紫外分光光度法,筛选对照品和测定波长,并对其方法学进行考察;使用该方法,测定不同提取时间和溶剂下大豆黄卷水提浓度,以简化的数学动力学模型为基础,推算出方程参数,将测定结果代入进行方程拟合。结果:染料木苷在0.0009296⁰.01162 g·L-1具有良好的线性关系,回归方程为Y=54.859X-0.0034,r=0.9999,平均回收率为103.6%,RSD=0.83%;拟合的动力学模型结果为CB=(0.1520×t0.5/M-1.7970)0.5807,验证结果良好。结论:所建立的大豆黄卷总黄酮测定方法稳定可行,重现性好。模型适用并能良好的描述大豆黄卷水提取的动力学过程。     

枸杞总黄酮测定方法的简化及水提取动力学模型的建立

目的:建立简单快速的枸杞总黄酮测定方法,同时对其水煎煮的提取动力学过程进行模拟,建立动力学方程并验证。方法:采用紫外分光光度法,对其方法学进行考察;使用该方法测定不同提取时间和溶剂倍量下枸杞水提液中总黄酮浓度,以简化的数学动力学模型为基础,推算出方程参数进行方程拟合。结果:芦丁在0.004 828~0.028 968 g·L-1具有良好的线性关系,回归方程为Y=29.823x+0.015 8,r=0.999 6,平均回收率为99.93%,RSD=0.76%;拟合的动力学模型结果为:CB=(4.874 8×t0.5/M-1.018 3)0.666 256,验证结果良好。结论:所简化的枸杞总黄酮测定方法稳定可行,重现性好。模型适用并能良好的描述枸杞水提取的动力学过程。     

妊娠期糖尿病患者血清淀粉样蛋白A等指标与葡萄糖水平的相关性

目的探讨妊娠期糖尿病(GDM)患者血清淀粉样蛋白A (SAA)及其他生化指标与空腹葡萄糖水平的相关性。方法选取2018年5月-2019年4月在温州市人民医院定期产前检查孕妇80例,进行75 g口服葡萄糖耐量试验(OGTT),测定空腹、1 h、2 h血清的葡萄糖和SAA,空腹血清标本加做三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、脂蛋白a (Lpa)、同型半胱氨酸(Hcy)、超敏C-反应蛋白(hs-CRP),计算血浆致动脉硬化指数(AIP)。根据诊断标准将其分组,利用统计学软件进行相关性分析。结果 GDM孕妇49例OGTT空腹、2 h的SAA水平明显高于糖耐量阴性的健康对照组孕妇,TC、hs-CRP、AIP水平高于对照组孕妇,差异均有统计学意义(均P<0.05)。GDM组孕妇空腹葡萄糖水平与空腹SAA、hs-CRP、TG、TC、LDL-C、AIP呈正相关(P<0.05),散点图显示血清SAA在OGTT空腹、1 h、2 h无明显变化。ROC曲线显示空腹SAA检测GDM的AUC为0.726。结论妊娠期糖尿病孕妇OGTT空腹SAA、2hSAA、空腹hs-CRP、TC、AIP指标明显高于糖耐量正常孕妇。血清SAA水平在OGTT不同时间点无明显差异,空腹SAA检测对GDM的诊断有一定准确度,但诊断价值较空腹葡萄糖低。     

一个复合杂合变异导致的遗传性凝血因子Ⅻ缺陷症家系分析

目的检测1个遗传性凝血因子Ⅻ(coagulation factorⅫ,FⅫ)缺陷症家系的基因变异,探讨其分子致病机制。方法用DNA直接测序法对F12基因进行变异分析;在野生型pIRES2-EGFP/FⅫ表达质粒基础上,构建变异型FⅫ表达质粒,Polyfect转染试剂瞬时转染293T细胞,分别测定上清液中FⅫ活性(FⅫactivity,FⅫ∶C)和FⅫ抗原(FⅫantigen,FⅫ∶Ag),测定细胞裂解液中FⅫ∶Ag,并用Western印迹进行验证。结果先证者F12基因第1外显子启动子区为46TT基因型,在第13和14外显子存在g.8489G>A(p.Glu502Lys)和g.8699G>C(p.Gly542Ser)复合杂合变异。瞬时转染结果显示,FⅫp.Glu502Lys变异体蛋白上清液中FⅫ∶C和FⅫ∶Ag分别为野生型的28%和24%,细胞裂解液中FⅫ∶Ag为野生型的39%;FⅫp.Gly542Ser变异体蛋白上清液中的FⅫ∶C和FⅫ∶Ag分别为野生型的32%和17%,细胞裂解液中FⅫ∶Ag为野生型的59%。结论先证者F12基因型46TT,p.Glu502Lys和p.Gly542Ser复合杂合变异导致其FⅫ水平极度降低;体外表达实验证实变异蛋白p.Glu502Lys和p.Gly542Ser存在合成和分泌障碍。     

酒萸肉、黄连醇提工艺研究

目的:确定酒萸肉、黄连的最佳醇提工艺条件。方法:采用正交试验法,以马钱苷和小檗碱的提取率为指标,优选出最佳提取工艺。结果:最佳提取工艺为:12倍量60%的乙醇,加热回流提取2次,每次2 h。结论:该方法提取的马钱苷和小檗碱的含量高,方法稳定。