纳米血管生成素-2小干扰RNA质粒制备及功能研究

[目的]制备血管生成素-2小干扰RNA(Ang-2siRNA)质粒纳米微粒,并观察其基因转染能力和基因沉默效果.[方法]应用分子克隆的方法构建Ang-2siRNA质粒,将其与聚乳酸、O羧甲基壳聚糖用水/油/水(W/O/W)双乳化溶剂蒸发法制备纳米微球,扫描电镜观察其形态和粒径.然后转染原代人脐带静脉内皮细胞,观察纳米Ang-2siRNA微粒干扰Ang-2基因表达的效果及其细胞保护功能.[结果]扫描电镜观察到Ang2siRNA纳米微球呈球形和椭球形,粒径150～200 nm,大小分布均匀,包封完整,分散性良好.有较强转基因能力,良好的RNA干扰效果和血管内皮细胞保护功能.[结论]成功制备纳米Ang-2siRNA微粒,并证实其载基因能力和RNA干扰效果,对血管内皮细胞损伤因素有良好保护作用,为进一步研究心肌梗死的血管修复机制奠定了坚实的基础.     

中药复方脑还丹对快速老化鼠SAM-P／8海马CAl区超微结构的影响

目的 探讨中药复方脑还丹对快速老化鼠海马CAl区超微结构的影响。方法3月龄雄性SAM／P18小鼠30只，随机分成对照组、脑还丹低剂量组、脑还丹高剂量组，分别给予生理盐水及不同剂量中药复方脑还丹灌胃治疗4月，取海马制作电镜标本，透射电镜观察海马CAl区神经元超微结构。结果对照组脂褐素增多，溶酶体数目增多且空化，粗面内质网偶有扩张或膜结构断裂，核糖体数目明显减少，线粒体数目减少，线粒体肿胀、核膜增厚，嵴断裂或萎缩成中空状，细胞核核膜模糊，核周池不清，染色质呈凝聚样改变，核周空泡明显。脑还丹组上述变化明显减轻。结论脑还丹能够减轻神经元退行性变化。     

PCI手术介入治疗急性心肌梗死合并心功能不全

目的:分析经皮冠状动脉介入治疗(PCI)对急性心肌梗死合并心功能不全的临床效果。方法:将2017年1月至2018年4月广东省第二人民医院收治的71例急性心肌梗死合并KillipⅡ级患者作为研究对象,随机分为两组,对照组35例,观察组36例,对照组行药物保守治疗,观察组采用PCI手术治疗,比较两组患者的临床效果。结果:对照组患者的病死率为20.0%,高于观察组的5.56%,差异具有统计学意义(P 0.05);观察组患者的心脏指数(CI)、左心室射血分数(LVEF)均高于对照组,差异具有统计学意义(P 0.05);观察组患者的不良心血管事件发生率、再住院率均低于对照组,差异具有统计学意义(P 0.05)。结论:对急性心肌梗死合并KillipⅡ级患者采用PCI治疗可降低病死率,改善心脏功能以及预后。     

多巴酚丁胺负荷试验QTcd对冠心病的诊断价值

目的探讨多巴酚丁胺负荷试验前、后冠心病与非冠心病患者QTc散离度(QTcd)的变化,评估多巴酚丁胺负荷试验QTcd对冠心病的诊断价值。方法测量选择性冠脉造影证实的30例冠心病与20例非冠心病患者试验前、后QTcd值,并比较分析。结果冠心病组多巴酚丁胺负荷试验终点QTcd明显高于试验前QTcd(P<0.01),非冠心病组无明显差异(P>0.05)。多巴酚丁胺负荷试验终点QTcd≥55ms诊断冠心病的敏感性、特异性、准确性分别为83.3%、85%、84%,QTcd≥10ms(86.7%、85%、86%)高于传统试验ST段压低诊断冠心病的价值(56.7%、50%、54%)(P<0.05)。结论多巴酚丁胺负荷试验QTcd、QTcd可提高冠心病的诊断价值,是一种安全、简便、有效的无创检查方法。     

Clinical Observation and Mechanism Study on Treatment of Senile Dementia with Naohuandan(脑还丹)

Seniledementia(SD),namely,Alzhei mer sdisease(AD)isakindofdegenera tioninthenervesystemthatoftenoccursinmid oldagedpersons,beingoneofthecom monestdiseasethatinducesdementia,andmainlycharacterizedbyintegralfunctionaldisorderofcognition,especiallythememorydisorder,changesinbehaviorandpersonali ty,aswellasaffectationofdailylivingca pacity(1).Alongwiththedevelopmentoftheagingpopulationintheworld,anincreasingtrendwasshownintheoccurrenceofAD.Becauseofitsunclearpathogenesis,theWesternmedicalapproa…     

成骨细胞对葡萄糖水平的感知作用

背景：新近研究表明,骨钙素可提高胰岛素分泌水平、胰岛素敏感性,并且可阻止脂肪的积累,参与糖脂代谢,发挥此作用的主要是羧化不全骨钙素。 目的：观察不同浓度葡萄糖对成骨细胞羧化不全骨钙素分泌水平的影响。 方法：切下人肋骨骨小梁剪碎,胰酶消化后以PBS彻底冲洗直至于倒置显微镜下观察骨片表面及清洗液中无粘着及漂浮的细胞,以DMEM完全培养液清洗骨小梁1次,移入培养瓶内培养,每周更换培养液1次,1周后可见成骨细胞自骨片移出,4~6周细胞融合成单层可作传代培养。取生长活跃的传二三代细胞接种于6孔板中分成5组,待细胞融合至80%以含5.6,7.6,9.6,12.6,20.6 mmol/L葡萄糖的培养基刺激成骨细胞,同时加入维生素K2使其在培养液中最终浓度为10-5 mol/L。培养半小时后收集上清液,以放免法检测成骨细胞培养上清液中羧化不全骨钙素水平,并以上清液中总骨钙素进行校正,计算羧化不全骨钙素率。 结果与结论：在不同葡萄糖浓度下成骨细胞羧化不全骨钙素分泌水平不同,7.6,9.6,20.6 mmol/L葡萄糖浓度组羧化不全骨钙素率高于5.6 mmol/L葡萄糖浓度组[(0.27±0.02),(0.29±0.04),(0.12±0.02)%,P < 0.05]。提示成骨细胞可感知葡萄糖浓度变化,在5.6~9.6 mmol/L葡萄糖刺激下成骨细胞可呈剂量依赖性地提高自身羧化不全骨钙素分泌水平,进一步提高葡萄糖浓度时羧化不全骨钙素水平反而降低。     

稳心颗粒对心肌梗死大鼠血管内皮细胞超微结构的影响

目的观察稳心颗粒对心肌梗死大鼠内皮细胞超微结构的影响。方法将30只SD大鼠随机分为对照组,心肌梗死模型组,心肌梗死模型＋稳心颗粒组,每组10只大鼠。测定大鼠血浆NO及ET一1含量变化．观察血管内皮细胞超微结构的改变。结果与对照组比较,心肌梗死模型组大鼠血浆ET-1含量明显增加（P〈0,01）,血浆NO含量明显减少（P〈O．01）,线粒体肿胀,肌浆网扩张,内皮脱落。与心肌梗死模型组比较,心肌梗死模型＋稳心颗粒组大鼠血浆ET一1的含量明显降低（p〈O．01）,血浆NO的含量明显增加（p〈0．01）,内皮细胞出现线粒体肿胀和内质网扩张明显减少,无内皮脱落。结论稳心颗粒对心肌梗死大鼠血管内皮细胞超微结构具有保护作用,这种保护作用与稳心颗粒使NO及ET-1的含量发生变化有关。     

HO-1在AMPK抑制心肌肥大中的作用

目的】 研究AMP激活的蛋白激酶 (AMPK)及血红素氧合酶HO-1激活对心肌肥大的影响,以及HO-1在AMPK抑制心肌肥大中的作用?【方法】 以培养的新生大鼠心肌细胞为研究对象,采用蛋白免疫印迹杂交方法检测5-氨基-4甲酰胺咪唑核糖核苷酸(AICAR)对AMPK的磷酸化程度及对HO-1的影响,并测定心肌细胞 [3H]-亮氨酸掺入率及心肌细胞表面积,观察AMPK及HO-1心肌细胞肥大的影响?【结果】 AICAR对AMPK及HO-1均有激活作用,AICAR能阻断AngⅡ引起的心肌肥大效应;阻断HO-1的激活则能减弱AICAR的抑制作用?【结论】 AMPK具有抑制心肌肥大的作用,AMPK能激活HO-1,HO-1在AMPK抗心肌肥大的机制中起重要作用     

成骨细胞对葡萄糖水平的感知作用

背景:新近研究表明,骨钙素可提高胰岛素分泌水平、胰岛素敏感性,并且可阻止脂肪的积累,参与糖脂代谢,发挥此作用的主要是羧化不全骨钙素.目的:观察不同浓度葡萄糖对成骨细胞羧化不全骨钙素分泌水平的影响.方法:切下人肋骨骨小梁剪碎,胰酶消化后以PBS彻底冲洗直至于倒置显微镜下观察骨片表面及清洗液中无粘着及漂浮的细胞,以DMEM完全培养液清洗骨小梁1次,移入培养瓶内培养,每周更换培养液1次,1周后可见成骨细胞自骨片移出,4～6周细胞融合成单层可作传代培养.取生长活跃的传二三代细胞接种于6孔板中分成5组,待细胞融合至80%以含5.6,7.6,9.6,12.6,20.6 mmol/L葡萄糖的培养基刺激成骨细胞,同时加入维生素K_2使其在培养液中最终浓度为10~(-5)mol/L.培养半小时后收集上清液,以放免法检测成骨细胞培养上清液中羧化不全骨钙素水平,并以上清液中总骨钙素进行校正,计算羧化不全骨钙素率.结果与结论:在不同葡萄糖浓度下成骨细胞羧化不全骨钙素分泌水平不同,7.6,9.6,20.6 mmol/L葡萄糖浓度组羧化不全骨钙素率高于5.6 mmol/L葡萄糖浓度组[(0.27±0.02),(0.29±0.04),(0.12±0.02)%,P<0.05].提示成骨细胞可感知葡萄糖浓度变化,在5.6～9.6mmol/L葡萄糖刺激下成骨细胞可呈剂量依赖性地提高自身羧化不全骨钙素分泌水平,进一步提高葡萄糖浓度时羧化不全骨钙素水平反而降低.     

稳心颗粒对心肌梗死大鼠血管内皮细胞超微结构的影响

目的观察稳心颗粒对心肌梗死大鼠内皮细胞超微结构的影响。方法将30只SD大鼠随机分为对照组,心肌梗死模型组,心肌梗死模型+稳心颗粒组,每组10只大鼠。测定大鼠血浆NO及ET-1含量变化,观察血管内皮细胞超微结构的改变。结果与对照组比较,心肌梗死模型组大鼠血浆ET-1含量明显增加(P<0.01),血浆NO含量明显减少(P<0.01),线粒体肿胀,肌浆网扩张,内皮脱落。与心肌梗死模型组比较,心肌梗死模型+稳心颗粒组大鼠血浆ET-1的含量明显降低(P<0.01),血浆NO的含量明显增加(P<0.01),内皮细胞出现线粒体肿胀和内质网扩张明显减少,无内皮脱落。结论稳心颗粒对心肌梗死大鼠血管内皮细胞超微结构具有保护作用,这种保护作用与稳心颗粒使NO及ET-1的含量发生变化有关。