脂质纳米粒-mRNA递送系统及其在嵌合抗原受体T细胞治疗中的应用

尽管嵌合抗原受体（CAR）T细胞治疗在血液系统恶性肿瘤患者中取得了显著的临床疗效，但需要进一步优化。脂质纳米粒（LNP）-信使核糖核酸（mRNA）递送系统作为一种非病毒性基因载体运用于CAR-T细胞治疗研究中，一方面通过LNP将密封蛋白-6 mRNA靶向递送至抗原提呈细胞，从而实现抗原提呈细胞辅助性增强密封蛋白-6靶向的CAR-T细胞的功能，以进一步诱导对实体瘤的清除；另一方面，通过LNP将成纤维细胞激活蛋白（FAP）CARmRNA靶向递送至T细胞，实现体内FAP靶向的CAR-T细胞的制备，以通过阻断心脏纤维化过程达到治疗急性心肌损伤的目的。在CAR-T细胞研究和治疗中，LNP-mRNA递送系统具有不与细胞基因组整合、价格便宜、毒副作用小及可修饰等优点，亦存在蛋白瞬时表达导致调控细胞功能的持久性不足及制备等方面的技术局限性。本文综述了LNP-mRNA递送系统及其在CAR-T细胞治疗中的应用研究。     

BCMA靶向的嵌合抗原受体T细胞治疗复发/难治多发性骨髓瘤患者发生肿瘤溶解综合征的危险因素

目的：探究应用B细胞成熟抗原（BCMA）靶向的嵌合抗原受体（CAR）T细胞治疗的复发/难治多发性骨髓瘤（MM）患者发生肿瘤溶解综合征（TLS）的危险因素。方法：收集浙江大学医学院附属第一医院2018年7月至2021年12月共99例接受BCMA靶向的CAR-T细胞治疗MM患者的临床资料,通过单因素分析及多因素logistic回归分析患者接受BCMA靶向的CAR-T细胞治疗后发生TLS的危险因素。结果：99例患者中,17例发生TLS（TLS组）,发生率为17.2%,发生时间为BCMA靶向的CAR-T细胞输注后（8.9±3.0）d。TLS组均出现TLS相关临床表现,其中出现肾功能不全17例,心律失常8例。TLS组均发生细胞因子释放综合征（CRS）,发生时间为BCMA靶向CAR-T细胞输注后1.0（1.0,6.5）d,其中3~4级CRS 13例。TLS组治疗前血肌酐、血尿酸较非TLS组高,3~4级CRS患者的比例也高于非TLS组（P<0.01或P<0.05）。Logistic回归分析结果显示,高血肌酐水平（OR=1.015,P<0.01）和严重CRS（OR=9.371,P<0.01）是TLS发生的独立危险因素。结论：接受BCMA靶向的CAR-T细胞治疗的复发/难治MM患者具有较高的TLS发生率,高血肌酐水平和严重CRS是TLS的主要危险因素,临床可通过降低血肌酐、控制CRS严重程度预防TLS的发生。     

嵌合抗原受体T细胞治疗复发/难治B细胞非霍奇金淋巴瘤患者的长期疗效

目的：评价嵌合抗原受体（CAR）T细胞治疗复发/难治B细胞非霍奇金淋巴瘤（B-NHL）的长期疗效。方法：收集2016年6月至2020年6月在浙江大学医学院附属第一医院骨髓移植中心应用CAR-T细胞治疗的27例复发/难治B-NHL患者的资料,随访日期截至2022年2月1日。运用Kaplan-Meier生存分析评估患者总存活率和无进展存活率,并统计相关不良反应。结果：27例患者中位随访时间为32（1,56）个月,CAR-T细胞治疗总反应率为85.2%（23/27）,完全缓解率为63.0%（17/27）,部分缓解率为22.2%（6/27）。患者3年总存活率为（50.0±10.1）%,无进展存活率为（44.4±9.6）%。CAR-T细胞治疗后获完全缓解患者的总存活率和无进展存活率均优于未获完全缓解患者[总存活率分别为（66.9±12.7）%和（20.0±12.6）%,P＝0.01;无进展存活率分别为（64.7±11.6）%和（10.0±9.5）%,P<0.01]。CD19单靶点和CD19/CD22双靶点的CAR-T细胞治疗患者总存活率和无进展存活率差异无统计学意义（均P>0.05）。92.6%（25/27）的患者发生细胞因子释放综合征;88.9%（24/27）的患者治疗期间发生Ⅲ~Ⅳ级骨髓抑制;其他不良反应包括免疫效应细胞相关神经毒性综合征、乙型肝炎病毒激活以及肺部或胃肠道感染等。未观察到远期不良反应发生。结论：CAR-T细胞治疗是复发/难治B-NHL患者的有效治疗方案,不良反应可控。CAR-T细胞治疗后获得完全缓解及随访至1年时处于存活状态的患者可能有更好的长期存活率。     

中药面膜治疗痤疮等皮肤病320例

痤疮、黄褐斑、手足皲裂是临床常见皮肤病,虽有各种治疗方法,但效果均欠理想。我们于1986年1月～1988年5月,采用中药面膜治疗痤疮、黄褐斑、手足皲裂,经杭州市四家医院皮肤科对320例病例临床观察,取得显著疗效,并与硫磺霜、氢醌霜、尿素霜及普通面膜作对照,有显著性差异。现介绍如下。临床资料治疗组:320例中男119例,女201例;年龄13～71岁,平均35岁;病程半月～20年,平均5年。其中痤疮154例,黄褐斑97例,手足皲裂69例。对照组:191例中男71例,女120例,年龄、病程与治疗组基本相似,其中痤疮101例,黄褐斑66例,手足皲裂24例。     

心脏手术复苏困难原因分析(附2例报告)

在体外循环下行心内直视手术 ,当开放升主动脉时即为心脏复苏的开始 ,然而有诸多因素可影响心脏的复苏。现将 2例心脏复苏困难的经过和处理过程报告如下。1　病历简介例 1:男 ,42岁 ,82 kg。术前诊断 :风湿性心脏病 ,二尖瓣狭窄 ,二尖瓣关闭不全 ,主动脉瓣狭窄。在体外循环下行心内直视瓣膜置换术。建立体外循环及手术过程均顺利。开放升主动脉后 ,2 0 W/s除颤两次无效 ,术者考虑主动脉瓣装反 ,行探查手术 ,经证实无误后 ,再次复苏 ,心肌收缩无力 ,右心胀满 ,观察发现右冠状动脉中有呈串珠状的气栓。再一次阻断升主动脉 ,经主动脉根部灌注…     

寒冷性和胆硷能性荨麻疹一例报告

患者男性20岁,1976年5月早操后初发瘙痒性荨麻疹,以后常因运动,温水浴、焦虑或游泳而诱发。其荨麻疹有2种不同类型:(1)局限型,发生于游泳时与冷水接触的部位;(2)全身性皮疹,为小的、边界清晰的风团,常起于运动后。既往健康及家族史无异常。实验室检查:血清乙酰甲胆硷量正常,用放射免疫扩散法测定补体成份C_3和C_4等正常,Ig量和IgE量也正常、抗核因子在1∶20滴度呈微弱反应,冷球蛋白、冷凝素等均阴性。因怀疑为寒冷性荨麻疹,故首先作冰块试验,除去冰块后5分钟内,在前臂试验部位发生瘙痒和荨麻疹。然后让患者在原位作跑步运动10分钟,随接     

CD20scFv-IgGFc T 淋巴细胞的建立及其对B细胞淋巴瘤靶向杀伤作用的比较

目的：研究CD20scFv嵌合T淋巴细胞靶向杀伤Daudi细胞时杀伤的效果和T细胞活化情况。方法：将两种质粒转染至PA317细胞中，用转染成功的PA317上清液感染外周血T淋巴细胞后经800 mg/L的G418筛选1周后去杀伤Daudi、K562细胞，分别在不同时点用流式细胞仪检测Daudi细胞AnnexinⅤ的阳性率 ，用ELISA检测细胞因子IL-2、IFNγ。结果：Daudi细胞AnnexinⅤ的阳性率在24 h内两实验组与K562组相比明显增高，而实验组之间没有显著差异。72 h时CD20scFv-IgGFc-CD28-ζ组比CD20scFv-IgGFc组IL-2（1 509.00 ng/L比220.54 ng/L）和IFNγ（912.16 ng/L比251.42 ng/L）的分泌量有显著增高。结论：①两种CD20scFv特异的T细胞在引起Daudi细胞早期凋亡无显著差异，说明在CD20scFv的靶向杀伤过程中CD28-ζ基因可能不主导Daudi细胞的早期凋亡。②CD20scFv-IgGFc-CD28-ζ组IL-2、IFNγ增幅更加明显，说明CD3ζ和CD28嵌合的T细胞可以自身活化而不受MHC的限制，从而增强了T细胞的活化和杀伤等功能。     

Ⅱa型高脂蛋白血症合并黄瘤病1例

Ⅱａ型高脂蛋白血症合并黄瘤病１例吴蓓玲，胡永仙浙江省中医院皮肤科（邮政编码３１０００６）Ⅱａ型高脂蛋白血症伴发结节性黄瘤病仅占１０％～１５％。笔者见到１例幼儿期发病者，报告如下。患儿男，６岁。ｌ岁时胭窝部出现黄色结节和斑块，后渐扩展至四肢末端、耳背、...     

抗CD20阳性淋巴瘤单抗真核表达载体的包装及增殖

在我国,恶性淋巴瘤在儿童和青年中所占比例较高。大部分恶性B细胞淋巴瘤呈CD20高表达状态,利妥昔单抗是针对CD20抗原的单克隆抗体药物,能准确地识别并与之结合，并通过人体免疫清除这些肿瘤细胞，然而该药物单独治疗B细胞淋马瘤的效率仅达到48%。本实验用包装细胞对抗CD20阳性淋马瘤单抗真核表达载体PLNCX/anti-CD20-scFv-Fc-￡进行包装，并通过测定病毒滴度的方法来检测其增殖情况，报告如下。