DNMT1蛋白通过沉默MEG3基因促进视网膜母细胞瘤增殖

目的 探讨 DNMT1 蛋白是否通过沉默 MEG3 基因诱导视网膜母细胞瘤增殖。方法 通过转染 pcDNA-DNMT1 或si-DNMT1上调或干扰DNMT1的表达水平;通过转染pcDNA-MEG3或si-MEG3上调或干扰MEG3的表达水平;用Western blot检测视网膜母细胞瘤细胞系中DNMT1蛋白表达量;用CCK-8法及EdU法检测细胞的增殖能力;用实时荧光定量PCR技术检测转染后的视网膜母细胞瘤细胞中MEG3表达量的变化;干扰DNMT1表达后,用甲基化特异性PCR检测MEG3基因启动子DNA甲基化水平的变化。结果 视网膜母细胞瘤SO-RB50及HXO-RB44细胞中DNMT1蛋白表达量显著升高（P<0.05）。转染了 pcDNA-DNMT1 的 HXO-RB44 细胞中 DNMT1 蛋白表达增加,细胞增殖能力增加,MEG3 表达量降低;转染了 siRNADNMT1的SO-RB50细胞DNMT1蛋白表达减少,细胞增殖能力降低,MEG3表达量增加（P<0.05）。干扰DNMT1蛋白表达后,MEG3基因启动子DNA甲基化水平降低（P<0.05）。逆转DNMT1蛋白对MEG3基因的调控后,DNMT1蛋白调控RB细胞增殖的能力减弱（P<0.05）。结论 在视网膜母细胞瘤细胞中,DNMT1蛋白表达的上调,诱导了MEG3基因启动子DNA甲基化失活,最终导致细胞异常增殖。     

剖宫产术后硬膜外镇痛对产妇泌乳的影响

目的:探讨剖宫产术后硬膜外镇痛对产妇泌乳的影响.方法:将86例剖宫产产妇随机分为两组各43例,观察组给予术后硬膜外镇痛,对照组给予肌内注射盐酸哌替啶镇痛,观察比较两组术后镇痛效果、初次泌乳时间、24 h哺乳次数及不良反应发生情况.结果:观察组术后镇痛效果、初次泌乳时间及24 h泌乳次数与对照组比较差异均有统计学意义(P＜0.05),两组不良反应发生情况比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论:剖宫产术后应用硬膜外镇痛效果确切,可促进产妇身体恢复及母乳分泌,对保证母婴健康有着重要作用.     

不同剂量布托啡诺用于剖宫产术后硬膜外镇痛效果观察

目的 观察布托啡诺复合左布比卡因在剖宫产术后硬膜外镇痛的效果和不良反应.方法 90例产妇分3组,每组30例,布托啡诺浓度B1组为0.004%,B2组为0.006%,B3组为0.008%,3组均复合0.15%左布比卡因,观察镇痛效果及不良反应.结果 在术后8、12、24 h的VAS评分B2、B3组低于B1组(P<0.05),术后镇痛满意综合评分B2、B3组优于B1组(P<0.05),不良反应B3组明显要高于B1、B2组(P<0.05).结论 0.006%布托啡诺复合0.15%左布比卡因用于剖宫产术后硬膜外镇痛,效果好且不良反应少.     

蛤蚧肽对小鼠免疫功能的调节作用

目的:观察蛤蚧肽对免疫功能低下小鼠免疫功能的影响.方法:动物分组设正常对照组、模型阴性对照组、左旋咪唑(25mg/kg)阳性对照组、蛤蚧肽三剂量(400,200,100 mg/kg)组,腹腔注射环磷酰胺(CTX)造成小鼠免疫功能低下模型,给药7d后,应用MTS法测定小鼠脾淋巴细胞增殖反应、自然杀伤细胞(NK)活性、腹腔...     

序贯法测定布托啡诺抑制无痛人工流产术后宫缩痛的50％和95％有效剂量

目的 测定布托啡诺抑制无痛人工流产术后宫缩痛的50％和95％有效剂量(ED50、ED95).方法 选择26例要求行无痛人工流产术的早孕患者,术前5 min将布托啡诺按改良序贯法要求的剂量缓慢静脉推注,在麻醉深度监测下按200 mg/min速度给予普鲁泊福直至患者睫毛反射消失才开始手术,观察术后唤醒时、醒后10 min、醒后20 min患者宫缩痛情况,计算布托啡诺的ED50、ED95及相应的95％ CI.结果 布托啡诺能有效抑制人工流产术后的宫缩痛;布托啡诺抑制人工流产术后宫缩痛的ED50和ED95分别是246 μg(95％ CI为201～281 μg)和324 μg(95％ CI为287 ～548 μg).结论 在无痛人工流产术前5min,根据ED50、ED95给予适当剂量布托啡诺,可有效抑制患者术后宫缩痛,且能减少药物的不良反应.     

EGCG对小鼠调节性T细胞的产生及细胞因子TGF-β1表达的影响

目的:探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对小鼠体内调节性T细胞(Treg)的产生及转化生长因子TGF-β1的表达和分泌的影响。方法:选择健康、雄性、体重相近的BALB/c小鼠40只,随机分为4组(n=10),设立不同剂量浓度的EGCG组(10、50、85 mg/kg)和对照组。EGCG组每天给予EGCG腹腔注射一次,连续注射3天,对照组每天给予等体积生理盐水腹腔注射一次,连续注射3天。采用流式细胞仪检测小鼠脾脏Treg细胞的产生。采用荧光定量PCR和ELISA方法分别检测小鼠脾脏细胞和外周血TGF-β1因子的表达和分泌水平。结果:与对照组相比较,EGCG处理组小鼠体内的Treg细胞的比例上升,TGF-β1的基因表达水平和蛋白分泌水平均明显增高,当EGCG剂量为85 mg/kg时,其促进作用最明显。结论:EGCG可促进小鼠体内的Treg细胞产生,增强TGF-β1表达和分泌。     

蛤蚧肽对荷瘤小鼠的免疫调节及抗肿瘤作用

目的观察蛤蚧肽对S180和Hepa1-6荷瘤小鼠免疫调节及其对小鼠移植肿瘤的生长抑制作用。方法以S180和Hepa1-6荷瘤小鼠为模型,研究蛤蚧肽及其联合环磷酰胺（CTX）对肿瘤的治疗效果,采用MTS法测定小鼠腹腔巨噬细胞杀瘤活性、脾淋巴细胞刺激指数、自然杀伤细胞（NK）活性,并称瘤重,计算抑瘤率。结果单纯蛤蚧肽灌胃400 mg.kg-1.d-1,连续12 d,可显著提升S180荷瘤小鼠的腹腔巨噬细胞杀瘤活性及Hepa1-6荷瘤小鼠的腹腔巨噬细胞吞噬功能（P〈0.05）,蛤蚧肽治疗后S180及Hepa1-6荷瘤小鼠脾淋巴细胞增殖能力及NK细胞活性均显著提高（P〈0.05）。与CTX联合应用时,蛤蚧肽能使受CTX抑制的上述免疫指标得到改善,并能显著提高抑瘤率。结论蛤蚧肽对肿瘤及化疗药物造成的免疫功能抑制有调节作用,并可通过此途径达到协同化疗药物抗肿瘤效果。     

蓖麻毒素B链的克隆表达与鉴定

采用PCR法扩增出蓖麻毒素B链基因,并将其与PMD18-T克隆载体相连接,经序列分析正确后插入到表达载体PET-28a中,构建重组表达质粒pET-28a-RTB,将构建好的重组质粒转化入BL21感受态中,经IPTG于37℃诱导表达后,得到的融合表达的目的蛋白质经SDS-PAGE分析,相对分子质量约为31 000,利用Western与间接ELISA鉴定证明,其具有抗原性,为制备RTB单克隆抗体及提高检测方法的敏感性打下基础.     

联合腰-硬镇痛对分娩产妇IL-1β、IL-10及T细胞亚群的影响

Objective To investigate the effect of combined spinal-epidural analgesia(CSEA) on immunological function and Th1/Th2 balance by observing the levels of serum T-lymphocyte subsets,IL-1β and IL-10 during labor in maternity.Methods Fifty healthy primipara expecting spontaneous labor were randomly divided into two groups(n=25).CSEA was performed with 20 μg fentanyl for lumbar analgesia and with complex of ropivacaine(0.1%) and fentanyl(2 μg/ml) for epidural analgesia in group Ⅰ,and no labor analgesia was given in group Ⅱ.Serum cortisol,IL-1β,IL-10 and T lymphocyte subsets was detected at cervical dilation of 2 cm-3 cm (T1),fetal disengagement (T2) and 24 h after childbirth (T3).Labor progress,VAS and neonatal Apgar score were recorded.Results The active phase of the first labor stage significantly shortened in group Ⅰ compared to that in group Ⅱ (P＜0.05),without difference in neonatal Apgar score between two groups.Along with labor progress,the level of serum IL-1β markedly increased in two groups,and the levels of cortisol,IL-1β and IL-10 were obviously decreased at T2 in group Ⅰ compared to those in group Ⅱ(P＜0.05).The levels of serum CD3+,CD4+,and CD4+/CD8+ decreased in both groups,with significant reduction at T3 (P＜0.05) and more significant in group Ⅱ than in group Ⅰ (P＜0.05).Conclusion CSEA shortens the active delivery phase in the first stage of labor and alleviates pain stress-induced inhibition on immune function and may benefit the balance of Th1/Th2 in maternity.     

老年病人术后谵妄相关因素分析及其护理

[目的]探讨引起老年病人术后谵妄的原因及相应的护理对策。[方法]统计1998年1月—2009年6月60岁以上病人,记录68例术后谵妄病人的术前疾病、手术种类、术中及术后用药等,并控制环境因素、心理因素、疼痛因素、药物因素、体位因素等,在术前、术后、出院后进行全方位的护理。[结果]发生术后谵妄的老年病人中术前有各种内科疾病的占100%,术前用药中阿托品占95.6%,甲硝唑占86.8%,胃肠外营养(TPN)占63.2%。针对这些影响因素采取护理措施后,68例病人24h至1周内好转,绝大多数3d内好转。[结论]老年术后谵妄与术前已存内科疾病、术前使用阿托品、甲硝唑等用药及胃肠外营养等有关。应明确各种高危因素并采用相应细致的护理措施。