人肝癌顺铂耐药细胞株HepG2的建立

目的体外建立顺铂(DDP)诱导的人肝癌耐药细胞株(HepG2/DDP),研究其生物学特性。方法以采用药物大剂量冲击结合低剂量持续诱导方法诱导HepG2细胞株,建立人肝癌顺铂耐药细胞株HepG2/DDP;MTT法检测顺铂对HepG2和HepG2/DDP的半数抑制浓度(IC50)和耐药系数(RI),绘制细胞生长曲线及计算细胞倍增时间,并用流式细胞仪(FCM)检测细胞周期。结果历时5个月成功建成HepG2/DDP细胞株,MTT法检测DDP对HepG2的IC50为1.35μg/ml,HepG2/DDP的IC50为23.35μg/ml,RI达17生长曲线表明其增殖速度明显低于亲本HepG2人肝癌细胞,且倍增时间增加;细胞周期分析发现相对于亲本HepG2细胞,G0/G1期细胞减少、S期与G2/M期细胞增多。结论成功建立稳定耐药细胞株HepG2/DDP。     

RISK信号通路在1-磷酸鞘氨醇后适应减轻心肌细胞缺氧/复氧损伤中的作用

目的研究再灌注损伤挽救激酶(reperfusion injury salvage kinase,RISK)信号通路在1-磷酸鞘氨醇(sphingosine-1-phosphate,S1P)后适应减轻H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤中的作用。方法将H9c2细胞随机分为7组,即(1)正常对照组(C);(2)缺氧/复氧组(H/R);(3)S1P组;(4)S1P+LY294002组(S1P+LY);(5)LY组;(6)S1P+PD98059组(S1P+PD);(7)PD组。采用MTT法测定各组细胞存活率;比色法测定丙二醛(MDA)含量、总超氧化物歧化酶(TSOD)和锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)活力;采用激光共聚焦显微镜技术检测细胞内游离钙离子浓度变化;流式细胞仪检测心肌细胞凋亡率;Western blot法测定Akt和ERK1/2蛋白的磷酸化水平。结果与H/R组比较,S1P组可明显增加H9c2细胞缺氧/复氧损伤后细胞存活率及凋亡率,增加TSOD及Mn-SOD活力,降低MDA含量,降低钙离子浓度,增加Akt和ERK1/2磷酸化水平,而PI3K/Akt信号通路阻断剂LY294002或ERK1/2阻断剂PD98059可阻断S1P对H9c2的上述作用。结论 S1P能够减轻H9c2细胞缺氧/复氧损伤,加入PI3K/Akt抑制剂LY294002和ERK1/2抑制剂PD98059均使S1P的保护作用被取消,表明S1P通过RISK信号通路发挥抗H9c2细胞缺氧/复氧损伤作用。     

学龄期注意缺陷多动障碍儿童症状与母亲抑郁、焦虑状况的相关性研究

目的分析学龄期注意缺陷多动障碍（ADHD）儿童症状与母亲抑郁、焦虑状况之间的相关性。方法选取符合精神障碍诊断与统计手册（第5版）诊断标准的学龄期ADHD儿童120例作为病例组,选择正常学龄期儿童120名作为对照组。采用抑郁自评量表（SDS）和焦虑自评量表（SAS）对2组儿童母亲的焦虑、抑郁状况进行评价及比较;采用SNAP-Ⅳ评定量表对病例组儿童的ADHD症状进行评估,结合症状的首次发现时间及持续时间,对儿童ADHD症状与母亲抑郁、焦虑评分进行相关性分析。结果病例组儿童母亲SDS、SAS标准分均明显高于对照组（P < 0.01）,抑郁、焦虑严重程度均明显高于对照组（P < 0.01）。学龄前发现症状ADHD儿童母亲的SDS标准分及抑郁程度均明显高于学龄期发现症状者（P < 0.01）。学龄前发现症状ADHD儿童的SNAP-Ⅳ多动冲动因子得分及总分与母亲SAS标准分均呈正相关关系（P < 0.01和P < 0.05）;学龄期发现症状ADHD儿童除注意缺陷因子得分与母亲SAS标准分无明显相关性（P>0.05）,其余各因子得分及总分与母亲SDS、SAS标准分均呈正相关关系（P < 0.05~P < 0.01）。结论学龄期ADHD儿童母亲易出现抑郁、焦虑情绪,根据发现症状的不同时间,儿童ADHD症状与母亲抑郁、焦虑呈不同程度相关性。     

玻璃体切割术联合口服荧光素钠治疗增殖性糖尿病视网膜病变

目的：观察玻璃体切割术联合口服荧光素钠治疗增殖性糖尿病视网膜病变的疗效。方法回顾性分析我院眼科2013年10月至2015年3月采用玻璃体切割术治疗增殖性糖尿病视网膜病变88例(101眼)患者的临床资料。其中51眼联合术前空腹30 min口服荧光素钠为观察组,50眼未口服荧光素钠为对照组,所有患者采用标准三切口经睫状体平坦部玻璃体切除手术。术后随访1~12个月,平均8个月。比较两组患眼的最佳矫正视力(BCVA)、眼压,并分析观察组术前术后视网膜电流图(ERG)的b波波幅情况。结果随访1个月,观察组视力不同程度提高48眼(94.1%),不变2眼(3.9%),视力下降1眼(2.0%),对照组视力提高46眼(92.0%),不变2眼(4.0%),下降2眼(4.0%),两组患者术后1个月的BCVA比较差异无统计学意义(P>0.05),但术后3、6、12个月分别比较差异均有统计学意义(P<0.05);两组患者术后眼压比较差异均无统计学意义(P>0.05);观察组术前及术后ERG比较b波波幅未见明显变化(P>0.05)。结论荧光素钠在增殖性糖尿病视网膜病变的玻璃体切割手术中的应用有利于识别玻璃体残留的皮质,彻底清除玻璃体皮质并且提高手术成功率,ERG的b波检测显示荧光素钠对视网膜未见明显的毒性作用。     

20种中药基原植物鲨烯合酶基因的生物信息学分析

目的鲨烯合酶(squalene synthase,SQS)是三萜化合物合成途径中的关键限速酶,对其蛋白特性进行分析与预测。方法利用生物信息学相关分析工具对20种《中国药典》2015年版收录中药基原植物SQS的理化性质、结构特征及功能特点进行分析。结果20种中药基原植物有关各条SQS氨基酸序列,其在氨基酸长度、氨基酸组成、相对分子质量及平均亲水系数方面基本一致;所有的SQS均未发现信号肽;二级结构具有明显的一致性,并且α-螺旋和无规则卷曲是主要的结构元件;所有SQS蛋白均含有4个高度保守的结构域和在氨基酸的C端有1~2个跨膜结构;系统进化树结果与植物系统分类学结果基本一致。结论这20种中药基原植物的SQS的特性差别不大,进化距离也比较近,显示SQS具有较高的保守性和稳定性。分析结果为SQS的功能和作用机制研究提供依据。     

高危新生儿扭动运动阶段与婴儿痉挛的相关性研究

目的 探讨高危新生儿扭动运动阶段与婴儿痉挛的相关性, 为临床诊治提供有效参考。方法 对178例在康复科随访的高危新生儿, 在扭动运动阶段进行全身运动质量评估, 在12月龄(纠正年龄)后对于发生婴儿痉挛的患儿进行统计分析。结果 扭动运动阶段痉挛-同步性运动对于婴儿痉挛有预测性。运动形式具有痉挛同步运动特征的患儿的婴儿痉挛的发病率与单调性全身运动的婴儿相比差异有统计学意义(P<0.01)。痉挛-同步性运动对于婴儿痉挛的预测敏感度90.9%, 特异度96.8%, 阳性预测值80%, 阴性预测值98.7%。结论 扭动运动阶段痉挛-同步性运动对于婴儿痉挛有一定的预测价值, 该种运动形式的患儿, 应定期进行动态脑电图检查。     

从脑髓-脑神-脑气多角度探讨帕金森病

帕金森病,临床表现为静止性震颤、运动障碍、姿势不稳及肌肉僵直等,其病位在脑,多因肾虚、血瘀、痰浊所致,究其根源,脑髓损伤是发病的基础,肾虚是源头,但不应完全责之肾、髓.脑髓为阴,脑气为阳,脑神为用,脑髓为病,脑神无以统帅,脑气逆乱无章,影响五脏六腑、五官九窍而发病,是故帕金森病非一元一体所能述清,当从脑髓、脑神、脑气多角度论治,相互依存,共为一体.     

三草水煎剂对非酒精性脂肪肝大鼠治疗作用的实验研究

目的:研究三草水煎剂对高脂饲料诱导的非酒精性脂肪肝大鼠肝组织及血脂的药效作用。方法:80只健康SPF级wistar大鼠随机分为五组:正常对照组、非酒精性脂肪肝(NAFLD)模型组,辛伐他汀组、三草水煎组、辛伐他汀组+三草水煎组各16只,其中正常组常规饲养,模型组则给予改良的高脂饲料灌胃9周,建立非酒精性脂肪肝大鼠模型。"三草"组[2.25(g/100g·d)]、辛伐他汀组[4.67(mg/kg·d)]以及N"三草"[2.25(g/100g·d)]和辛伐他汀[4.67(mg/kg·d)]合用组各给与相应的治疗6周。检测体质量、肝湿重、血清丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)以及血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL),低密度脂蛋白(LDL)的含量并观察肝组织病理学改变。结果:模型组与正常组相比较,肝湿重及肝指数显著上升,血清TC、TG、LDL、MDA升高,而HDL、SOD、GSH则下降。并且肝组织出现不同程度的脂肪浸润(P0.05)。经三草水煎剂治疗后,脂肪肝大鼠的体质量和肝湿重均低于模型组以及辛伐他汀治疗组,血清TC、TG水平降低,肝组织病变缓解(P0.01)。三草组大鼠相较于模型组,血清中MDA下降,SOD及GSH上升。而"三草"与辛伐他汀合用组的效果更为明显,甚至部分指标包括肝指数、TG、HDL、SOD、GSH的改善效果强于单独使用辛伐他汀(P0.01)。结论:三草水煎剂具有辅助治疗非酒精性脂肪肝的作用,其作用机制可能与调节脂质代谢、缓解氧化应激状态进而改善肝功能有关。     

痉挛同步性全身运动合并婴儿痉挛症27例临床分析

目的探讨全身运动质量评估结果为痉挛同步性全身运动的患儿合并婴儿痉挛症的临床特点及癫痫治疗效果。方法总结2010年10月-2013年3月于我院康复科诊治的全身运动质量评估结果为痉挛同步性全身运动的患儿,其合并婴儿痉挛症的发生率、发病年龄、头颅cT、脑电图等方面的特点及抗癫痫治疗效果。结果38例痉挛同步性全身运动的患儿中有27例合并婴儿痉挛症,占71．1％,首次发病年龄多为5～7个月,仅4例首次发病年龄在7个月以上;其合并婴儿痉挛症患儿头颅CT异常率为100％;合并婴儿痉挛症患儿均需要2种或以上的抗癫痫药物治疗,其中16例（59．3％）得到有效控制,1例（3．7％）完全控制。结论具有痉挛同步性运动特征的高危儿其婴儿痉挛症的发生率较高,应定期进行动态脑电图监测。     

孤独症谱系障碍及智力落后引起的语言发育迟缓儿童的共同注意力分析

目的探讨孤独症谱系障碍（ASD）及智力落后引起的语言发育迟缓（LR）两类儿童的共同注意力情况。方法选取ASD以及LR患儿各40例,并选取同期健康体检幼儿40名为对照组,应用早期社会交流量表检测评估3组研究对象的共同注意力。结果3组儿童共同注意力比较显示,LR组回应性共同注意力（RJA）、自发性共同注意力（IJA）、高水平自发注意力（HIJA）、低水平自发注意力（LIJA）、注视交替（Alt）及眼神接触（EC）得分均低于对照组（P < 0.01）,ASD组RJA、高水平回应注意力（HRJA）、低水平回应注意力（LRJA）、IJA、HIJA、LIJA、Alt及EC得分均低于对照组（P < 0.01）;ASD组与LR组比较,LR组RJA、HRJA、LRJA、IJA、LIJA及EC得分均高于ASD组（P < 0.01）,但HIJA、Show、Point及Alt 2组比较差异均无统计学意义（P>0.05）。结论ASD以及LR患儿均存在明显的共同注意力下降问题,不过LR患儿集中体现为眼神接触行为缺陷,临床上可以以此进行ASD的初步诊断。