产前应用地塞米松和沐舒坦对胎鼠及仔鼠肺组织Toll样受体4表达影响的比较

目的 比较产前单次应用小剂量地塞米松与联合应用地塞米松加盐酸氨溴索(沐舒坦)对胎鼠及仔鼠肺Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)基因及蛋白表达的影响. 方法 54只SD孕鼠随机分为3组:地塞米松组(干预组1)、地塞米松加沐舒坦组(干预组2)和生理盐水对照组.妊娠17 d,腹腔注射给药,干预组1予地塞米松0.2 mg/kg,干预组2予地塞米松0.2 mg/kg加沐舒坦100 mg/kg,对照组予等体积生理盐水.分别在妊娠19d及生后3、7d取胎(仔)鼠肺组织,通过逆转录聚合酶链反应、免疫组织化学和蛋白质免疫印迹技术检测各组胎(仔)肺组织中TLR4基因转录水平及蛋白表达差异.统计学方法 采用方差分析和独立样本t检验. 结果 (1)孕19 d,2个干预组分别与对照组相比,TLR4 mRNA在胎鼠肺组织中的表达均明显增加(对照组:0.26±0.18,干预组1:0.39±0.21,t=5.866,P＜0.05;对照组:0.27±0.22,干预组2:0.46±0.13,t=9.572,P＜0.01).生后3d和7d干预组2与对照组相比,TLR4 mRNA在仔鼠肺组织中的表达均明显增加(生后3 d:0.59±0.23与0.47±0.24,t=2.295,P＜0.05;生后7 d:0.52±0.12与0.35±0.17,t=4.219,P＜0.05),但干预组1与对照组比较,差异无统计学意义(生后3 d:0.45±0.22与0.44±0.14,t=0.128,P＞0.05;生后7 d:0.40±0.16与0.36±0.12,t=1.365,P＞0.05).(2)免疫组织化学:孕19 d,2个干预组分别与对照组相比,TLR4蛋白表达量在胎鼠肺组织中的表达均明显增加(对照组:0.20±0.29,干预组1:0.35±0.32,t=7.179,P＜0.05;对照组:0.20±0.29,干预组2:0.39±0.25,t=10.764,P＜0.01).生后3d和7d干预组2与对照组相比,TLR4蛋白表达量在仔鼠肺组织中的表达均明显增加(生后3 d:0.55±0.32与0.37±0.18,t=7.121,P＜0.05;生后7d:0.41±0.29与0.25±0.24,t=6.355,P＜0.05),但干预组1与对照组比较,差异无统计学意义(生后3 d:0.40±0.21与0.37±0.18,t=0.683,P＞0.05;生后7 d:0.28±0.31与0.25±0.24,t=0.462,P＞0.05).免疫印迹法:孕19 d,2个干预组分别与对照组相比,TLR4蛋白表达量在胎鼠肺组织中的表达均明显增加(对照组:0.15±0.12,干预组1:0.27±0.20,t=7.835,P＜0.05;对照组:0.16±0.18,干预组2:0.34±0.16,t=10.470,P＜0.01).生后3d和7d干预组2与对照组相比,TLR4蛋白表达量在仔鼠肺组织中的表达均明显增加(生后3 d:0.37±0.20与0.25±0.22,t=6.379,P＜0.05;生后7 d:0.35±0.15与0.24±0.13,t=5.152,P＜0.05),但干预组1与对照组比较,差异无统计学意义(生后3 d:0.32±0.26与0.25±0.16,t=1.167,P＞0.05;生后7 d:0.29±0.19与0.24±0.10,t=1.248,P＞0.05). 结论 小剂量地塞米松可能参与调控大鼠胎肺中TLR4表达的上调,这可能是糖皮质激素促胎肺成熟的重要机制之一;小剂量地塞米松联合沐舒坦产前应用可能不仅参与调控大鼠胎肺组织中TLR4表达的上调,也上调生后大鼠肺中TLR4的表达.     

大鼠胚胎肺泡发育形态学观察研究

目的:观察大鼠胚胎肺泡发育形态学变化,建立连续系统的胎肺发育形态学资料?方法:自SD大鼠孕16 d起,分别取孕16?19?21 d胎鼠肺脏行HE切片染色及透射电镜观察?结果:胚胎16 d胎肺开始出现上皮性管道,形成支气管众多分支,上皮细胞呈高柱状,围绕排列成环形;在胚胎19 d肺泡腔逐渐扩大,出现板层小体和2型肺泡上皮细胞;在胚胎21 d肺泡分隔增多,腔体扩张,间质变薄,同时板层小体数目增多?结论:大鼠胎肺发育是循序渐进的过程,一直延续到生后?板层小体的出现是肺泡2型上皮细胞分化的标志,且其数目随着发育而增多?     

产前单次应用地塞米松和氨溴索对胎鼠及子代鼠肺形态的影响

目的:探讨产前单次联合给药小剂量地塞米松和氨溴索对胎鼠及生后子代大鼠肺形态发育的影响?方法:36只孕鼠随机分成2组:地塞米松加氨溴索干预组(n=9)和生理盐水对照组(n=9)?在妊娠第17天,干预组腹腔注射地塞米松0.2 mg/(kg·d)加氨溴索100 mg/(kg·d),对照组腹腔注射等体积的生理盐水?取两组孕19天,生后3天,生后7天胎(仔)鼠肺组织,通过光镜和电镜技术,观察在大鼠肺发育的不同阶段两组肺组织形态发育差异?结果:①光镜下:孕19天干预组胎鼠肺每视野平均原始肺泡计数大于对照组(P < 0.05),平均原始肺泡腔面积大于对照组(P < 0.01),平均原始肺泡间隔厚度小于对照组(P < 0.01)?生后3天干预组仔鼠肺每视野平均囊泡表面积大于对照组(P < 0.05),平均囊泡间隔厚度小于对照组(P < 0.05),平均囊泡计数与对照组相比无显著差异(P > 0.05)?生后7天干预组仔鼠肺每视野平均肺泡表面积大于对照组(P < 0.05),平均肺泡间隔厚度小于对照组(P < 0.05),平均肺泡计数与对照组相比无显著差异(P > 0.05);②透射电镜观察:孕19天胎鼠肺干预组Ⅱ型肺泡上皮细胞绒毛发育较对照组密集完整,可见板层小体,对照组难见板层小体?生后3天及7天的仔鼠肺干预组和对照组均可见大量板层小体,但干预组较对照组板层小体染色深?致密,且可见大量线粒体等发达的细胞器?结论:小剂量地塞米松联合氨溴索产前单次用药,不仅能促进大鼠胎肺成熟,也可促进其生后一段时期的肺发育且未产生明显不良影响?     

脂多糖致新生鼠脑白质软化模型的建立

目的:证实脂多糖致新生鼠脑白质软化模型的可靠性?方法: 16只健康孕鼠随机分为实验组和对照组,于妊娠第15天按0.3 mg/kg剂量脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)对实验组孕鼠进行腹腔内注射, 对照组孕鼠在同一天使用等量蒸馏水腹腔内注射,妊娠第21天,孕鼠均分娩,取两组新生鼠脑组织进行形态学观察和脑组织含水量测定?结果:①光镜下可见,实验组脑室周围白质水肿软化,带状或灶状凝固性坏死,而对照组无明显形态学变化;②电镜下发现, 实验组少突胶质细胞线粒体肿胀明显?线粒体脊减少或空泡化,内质网明显扩张,对照组无明显变化;③实验组脑组织含水量较对照组脑组织含水量明显增高,差异具有统计学意义(P < 0.05)?结论:脂多糖可导致新生鼠脑室周围白质软化, 且脑组织含水量也明显增高?脂多糖是制备新生鼠脑白质软化的一种有效方法?