重组人白细胞介素10的融合表达及鉴定

目的 研究重组人白细胞介素10(rhIL—10)载体在大肠杆菌B121(DE3)pLyse细胞中的表达，为进一步研究IL-l0在动脉粥样硬化中的作用机制奠定基础。方法 用构建成功的IL-l0—PCRT7/NT-TOPO质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)pLyse细胞，并通过SDS-PAGE鉴定融合表达蛋白。结果 PCRT7/NT—TOPO质粒载体成功载入rhIL-l0基因；在异丙基硫代—β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导下表达的蛋白质主要以包涵体形式存在。结论 在IPTG诱导下，重组的IL-l0—PCRT7/NT—TOPO质粒载体在大肠杆菌BL2l(DE3)pLyse细胞内成功表达。     

人乳头瘤病毒18型E2基因的原核表达载体构建与表达

目的 将人乳头瘤病毒18型(Human papillomavirus 18, HPV18) E2基因插入到原核表达载体pET28a( )T7启动子下游,构建原核表达载体pET28a( )-HPV18E2,原核表达并纯化HPV18E2蛋白,为研究HPV18 E2蛋白相关疫苗奠定实验基础.方法 1)以HPV18型基因组DNA为模板,运用聚合酶链反应扩增E2基因,将其插入到原核表达载体pET28a( )中,构建重组表达质粒pET28a( )-HPV18E2;2) PCR、限制性内切酶切分析以及核酸序列测定重组质粒pET28a( )-HPV18E2的正确性;3)将重组表达质粒pET28a( )-HPV18E2转化大肠杆菌BL21(DE3), IPTG诱导表达,经镍螯合亲和层析胶体纯化HPV18E2蛋白;4)十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹法(Western blot)鉴定HPV18E2蛋白的正确表达.结果 1) PCR、限制性内切酶切分析和核酸序列分析鉴定证实了重组表达质粒pET28a( )-HPV18E2的成功构建;2) SDS-PAGE电泳分析, HPV18E2蛋白在大肠杆菌BL21中表达量占菌体总蛋白的21%,纯化后的蛋白纯度大于90%;经Western blot鉴定,显示HPV18E2蛋白与标签蛋白(6xHis)形成相对分子质量约42KD的蛋白,与理论预计值相符.结论 1)成功构建了原核表达载体pET28a( )-HPV18E2;2)原核表达获得了HPV18E2蛋白.     

高脂、去β-VLDL高脂和正常家兔血清对巨噬细胞内胆固醇堆积的影响

用高脂、去β-VLDL 高脂和正常家兔血清与小鼠腹腔巨噬细胞培养,观察细胞内 TC、FC、CE 和 Apo—B 含量变化及细胞形态学改变。结果表明:高脂和去β-VLDL 高脂血清可引起细胞内 Ch 堆积,培养后高脂血清组细胞内 TC、FC、CE 和 Apo-B 含量为146.5±14.7、40.3±7.0、106.0±14.2和26.3±2.3μg/mg 细胞蛋白质,差别均有高度显著性(P<0.01);去β-VLDL高脂血清组相应为125.5±3.8、46.1±5.1.79.4±18.1和25.5±3.8μg/mg,细胞蛋白质,差别亦均有高度显著性,电镜下观察到高脂和去β-VLDL 高脂血清均可引起胞浆中大量无膜包裹的脂滴空泡形成。正常血清培养组虽然也有差异,但其数量远较前二者低,且胞浆中无脂滴空泡形成。对β-VLDL 及修饰的 LDL 可引起泡沫细胞的形成作了讨论。     

带锁髓内钉治疗胫腓骨骨折58例疗效观察

【目的】观察带锁髓内钉治疗胫腓骨骨折的临床疗效。【方法】58例新鲜胫腓骨骨折病人采用带锁髓内钉治疗,并与加压钢板治疗胫腓骨骨折42病例,进行愈合时间、住院时间、并发症发生率、疗效优良率比较分析。【结果】带锁髓内钉组:愈合时间(22.59±7.6)周,住院时间(14.5±5.8),并发症发生率10.34%、疗效优良率96.5%;加压钢板组:愈合时间(39.9±11.3),住院时间(21.55±6.9),并发症发生率38.1%,疗效优良率83.3%,带锁髓内钉组均优于加压钢板组(P均<0.01)。【结论】带锁髓内钉治疗胫腓骨骨折创伤小、固定坚强、骨折愈合率高、能早期活动、感染率低,疗效优于加压钢板,适用于基层医院骨科临床治疗。     

健康教育在骨外科病房的实施和体会

健康教育是整体护理的重要组成部分,也是护理学科发展、完善的标志。我科于1998年率先把健康教育作为整体护理的主要内容,取得了一定成效。1 选拔专业护士 为能对每个住院患者都实施相应的健康教育,我们在病区11名护士中,挑选了2名护理骨干,担任专业护土。她们主要负责10～15名患者白班的临床治疗、护理、心理护理和健     

内镜下局部喷洒凝血酶治疗活动性胃肠道出血的临床观察

我院在动物及试管实验的基础上,自1990年10月至1991年7月对18例经常规治疗难以控制的活动性胃肠道大出血患者行内镜下局部喷洒凝血酶止血,取得满意效果,现报道如下。     

氚-胆固醇标记血浆脂蛋白方法的研究

本研究用~3H-胆固醇标记血浆脂蛋白,血浆经3.75％PAGE,可将脂蛋白分成HDL、LDL和VLDL。分别测定各脂蛋白的每分钟计数(cpm),并计算放射化学纯度。HDL、LDL和VLDL的放射化学纯度分别为99％、96％和94％。本法标记的脂蛋白具有一定的化学稳定性,不改变生物活性和其他理化性质等优点。可通过制备性PAGE纯化~3H-胆固醇标记的脂蛋白。该方法操作简单,~3H-胆固醇半衰期长,可广泛应用于血浆脂蛋白代谢的研究。     

小鼠颌下腺2.5S神经生长因子生物活性评估标准的建立

目的观察小鼠颌下腺2．5S神经生长因子(NGF)对鸡胚背根神经节(DRG)细胞生长的作用,建立一套对神经生长因子在生物活性的评估标准。方法分离培养鸡胚背根神经节,加入不同浓度NGF、NGF标准品,另设空白和NGF与NGF抗体对照组,共培养48h后观察各组神经节周围神经突起的生长情况。结果NGF促进神经节细胞突起生长,随浓度升高突起而增多增长,与标准品相似,而不加NGF或加NGF与NGF抗体则无或仅有少量突起生长。结论小鼠颌下腺2．5SNGF呈剂量依赖性促进背根神经节细胞生长的作用,依神经节突起生长的不同程度可将NGF的生物活性划分为五个等级标准。     

消痔灵注射液治疗腋臭55例疗效观察

腋臭的病因是腋窝大汗腺排泄的汗液在皮肤表面多种细菌的分解下,产生短链脂肪酸及氨而放出臭味。此病女性多于男性,与遗传有关,青春期发病,老年时逐渐减轻。近年来,我们诊治55例,现报告如下。