姜黄素通过Piezo1离子通道促进骨肉瘤细胞凋亡

摘要:目的 探讨姜黄素能否通过抑制 Piezo1的表达促进人骨肉瘤细胞系(U2OS)的凋亡。方法 利用生物信息 学方法分析 GEO 数据库(GSE16088数据集)骨肉瘤标本的差异表达基因。以姜黄素干预 U2OS细胞,借助 RNA-seq、 生物信息学方法分析 Piezo1的表达变化;利用qRT-PCR、Westernblot技术,验证 Piezo1的表达变化;借助钙离子振荡 检测姜黄素对 Piezo1离子通道活性的影响;通过 Piezo1-siRNA 基因沉默技术、划痕实验和流式细胞术观察 Piezo1表达 变化对骨肉瘤细胞迁移能力和凋亡的影响。结果 与正常组织相比,Piezo1在骨肉瘤组织中呈显著高表达。姜黄素能 明显降低 U2OS细胞中 Piezo1的表达及抑制 Piezo1离子通道的活性;姜黄素能协同 Piezo1-siRNA,降低骨肉瘤细胞的 迁移能力,促进骨肉瘤细胞凋亡。结论 姜黄素能通过抑制骨肉瘤 Piezo1的表达促进骨肉瘤细胞的凋亡,Piezo1有可能 成为治疗骨肉瘤的新靶标。     

槲皮素调控关节炎软骨细胞胆固醇代谢的机制研究

探讨槲皮素对关节炎软骨细胞胆固醇代谢的影响及作用机制。方法 体外分离培养小鼠软骨细胞,分为对照组、模型组、低浓度组、高浓度组。CCK-8检测槲皮素对软骨细胞增殖的影响;胆固醇检测试剂盒检测细胞内总胆固醇（TC）水平;qRT-PCR检测骨关节炎软骨细胞中Cyp7b1、CH25H、RORα、Mmp3、Mmp13、Col2a1、Il-6的表达水平;Western blot检测软骨细胞中CYP7B1、CH25H、RORα、MMP3和MMP13的蛋白表达水平。结果 ①CCK-8结果显示浓度在10 μmol/L以下的槲皮素对软骨细胞没有毒性,而高浓度（25、50、100 μmol/L）的槲皮素会抑制软骨细胞增殖。②细胞内总胆固醇水平测定结果显示,使用槲皮素处理后的关节炎软骨细胞内总胆固醇水平较模型组低（P <0.05）。③qRT-PCR结果显示,槲皮素组中软骨细胞的Cyp7b1、CH25H、RORα、Mmp3、Mmp13、Il-6的表达水平较模型组降低,Col2a1的表达水平较模型组升高（P <0.05）。④Western blot结果显示药物干预组中CYP7B1、CH25H、RORα、MMP3、 MMP13的蛋白表达水平均比模型组降低（P <0.05）。结论 槲皮素可以通过CH25H/CYP7B1/RORα 信号通路调控关节炎软骨细胞中的胆固醇代谢,减轻关节炎软骨细胞中的炎症和细胞外基质降解。     

脂质硬化性黏液纤维瘤3例报道并文献复习

<正>脂肪硬化性黏液纤维瘤(liposclerosing myxofibrous tumor, LSMFT)好发于股骨近端转子间区,属于多形性纤维骨病,是一种罕见的良性纤维骨病变^[1-2]。LSMFT往往在患者进行X线平片检查时偶然发现,平均发病年龄为40岁,常见的临床表现为疼痛,症状无明显的性别差异^[3-4]。虽具有独特的放射学和组织学特征,但LSMFT仍有可能被误诊为其他具有类似特征的病变,如：     

膝骨关节炎经筋辨证研究进展

对膝骨关节炎(KOA;中医归属为"膝痹")经筋病变的理论基础、KOA的筋痹与骨痹的关联、KOA经筋病变实质的现代研究、KOA经筋病变的治疗等进行了综述。KOA经筋病变主要涉及足太阳经筋、足少阳经筋、足阳明经筋和足三阴经经筋。KOA筋痹与骨痹的关系表现为膝痹病情的轻重,筋痹尚未及骨,而骨痹必定伴有筋痹,筋痹至骨痹的发展过程是KOA病变进展的过程。KOA经筋病变实质的现代研究涉及病灶命名及分布、膝关节周围软组织的变化、生物力学改变、影像学改变及患者步态差异等。KOA经筋病变的治疗方式有多种,包括艾灸、点穴、经筋刺法、经筋手法、经筋贴敷疗法、经筋微创疗法等。以上研究成果可为经筋疗法在KOA临床治疗的推广运用提供理论依据。     

组蛋白甲基转移酶2（SMYD2）抑制剂LLY-507对成骨分化的影响

目的 研究SMYD2抑制剂LLY-507对小鼠颅顶前骨细胞亚克隆14（MC3T3-E1）及人骨髓间充质干细胞（hMSCs）成骨分化的影响。方法 通过CCK-8法检测LLY-507对MC3T3-E1和hMSCs增殖的影响;采用碱性磷酸酶( ALP) 染色和活性测定检测不同浓度LLY-507干预下MC3T3-E1和hMSCs早期成骨分化标志物ALP的活性情况;通过茜素红染色及半定量分析检测LLY-507对MC3T3-E1和hMSCs矿化能力的影响;运用荧光定量PCR检测hMSCs的成骨相关基因Osterix、Runx2、OPG、OPN mRNA的表达;Western blot检测hMSCs的Runx2和SMYD2蛋白表达量。结果 CCK-8结果表明LLY-507在0.8 μmol/L的剂量下细胞活性无明显影响,不会明显抑制细胞增殖。ALP染色及活性测定表明,加入50 nmol/L及以上剂量的LLY-507干预7 d后能够明显抑制MC3T3-E1及hMSCs成骨分化以及碱性磷酸酶的表达（P<0.05）;茜素红染色及半定量分析表明100 nmol/L剂量的LLY-507能够明显抑制MC3T3-E1及hMSCs的矿化能力（P<0.05）。通过qPCR,加入25 nmol/L及以上剂量的LLY-507分别干预7 d和14 d后能够明显抑制hMSCs成骨分化相关基因Runx2、Osterix、OPG、OPN的mRNA表达（P<0.05）。通过Western blot, 加入50 nmol/L及以上剂量的LLY-507干预7 d和14 d后均能够明显抑制hMSCs的Runx2蛋白和SMYD2蛋白的表达。结论 抑制SMYD2的表达能够抑制成骨相关基因的表达,说明SMYD2在成骨分化过程中起到促进成骨的作用。     

从“圆运动”理论解析水气病“大气一转，其气乃散”的机理

"圆运动"思想是将人体的内在本质看作一个圆,从气机周流循环的角度把握疾病的诊治,是一种高度升华概括的医学思想。"大气一转,其气乃散"出自《金匮要略》水气病篇气分病的病机和治则,意为只有阴阳气机得运,上下气机得条,方能气行津布,水气泄之消散。本文通过五行圆运动思想对此理念进行解析。     

大型跨膜蛋白Piezo1在骨科相关疾病中的参与及意义

背景:近年来研究发现间充质干细胞、成骨细胞、破骨细胞、软骨细胞、髓核细胞和骨肉瘤细胞等均可通过Piezo1蛋白接受细胞外环境的力学机械刺激,从而激活细胞信号转导途径,影响细胞的增殖、分化、迁移及凋亡,进而决定着骨骼的生理构造、关节退变及骨折的愈合等生理病理过程。目的:文章主要针对近年来与骨质疏松症及退行性骨关节病相关的Piezo1展开综述,并通过回顾Piezo1在其他骨科疾病中的最新发现,归纳总结其最新研究进展,为骨科相关疾病的新型治疗策略提供思路。方法:计算机检索CNKI及PubMed等数据库建库至2020年1月与Piezo1在骨科疾病研究进展的相关文献,中文关键词为"机械敏感性离子通道蛋白,骨质疏松症,退行性骨关节病,骨科疾病",英文关键词为"Piezo1,Osteoporosis,Degenerative Osteoarthropathy,Orthopedic Diseases",进行全网检索,最终纳入60篇文献进行综述进行探讨。结果与结论:①Piezo1在骨质疏松症发展过程中可通过直接检测成骨细胞谱系细胞中的机械负荷来释放出生物信号,调节破骨细胞活性;②在退行性骨关节病进展过程中,软骨细胞膜上的Piezo1能够有效识别不同强度和类型的外界机械应力刺激,最终诱导软骨细胞凋亡;③在骨代谢性疾病、关节退变性关节炎等骨科疾病中,Piezo1均参与了疾病的病理进展过程,Piezo1的出现为机械性刺激在骨科中的应用提供了更具体的分子基础,打开了新的思路和视角,也为以后双联给药和精准医疗提供了参考依据。     

通过Micro-CT评价瘦素受体缺乏的2型糖尿病小鼠四肢骨的骨代谢变化

目的探讨瘦素受体(leptin receptor,Lepr)缺乏的2型糖尿病小鼠的骨骼表型,为2型糖尿病((T2DM)合并骨质疏松(OP)的防治提供一个新的靶点。方法获取20只14周龄雄性db/db小鼠(瘦素受体缺乏小鼠)和野生型小鼠(C57BL小鼠)的胫骨(各10只),通过Micro-CT检测比较两者骨小梁相对体积(BV/TV)、骨表面积组织体积比值(BS/TV)、骨小梁厚度(Tb.Th)、骨小梁数量(Tb.N)、骨小梁分离度(Tb.Sp)、骨结构模型指数(SMI)、骨皮质厚度(Ct.Th)、骨皮质面积(Ct.Ar)等骨微结构参数的差异。结果与野生型小鼠相比,14周龄的db/db小鼠的胫骨骨小梁相对体积(BV/TV)、骨小梁厚度(Tb.Th)、骨小梁数量(Tb.N)明显减小,小梁骨间距(Tb.Sp)相应增加,皮质骨厚度(Ct.Th)、横截面积(Ct.Ar)减小,两者比较差异均有显著统计学意义(P0.05);其结构模式指数(structure model index,SMI)较野生型明显减小,两者比较差异均有统计学意义(P0.05)。结论 2型糖尿病可能是通过瘦素受体参与的信号通路影响了骨量变化,为利用该模型进行DOP病因及治疗方法研究提供了新的方向。且在缺乏瘦素信号传导的情况下,骨质量和强度的降低验证了瘦素在体内起着合成代谢骨因子的作用。