去甲斑蝥素对人胰腺癌PANC-1 细胞凋亡作用的研究

目的 探讨去甲斑蝥素对人胰腺癌PANC-1细胞凋亡的作用及其机制。方法 将PANC-1 细胞株随机分为处理组 和对照组,处理组加入不同浓度的去甲斑蝥素培养24h后,CCK-8 法检测细胞增殖情况;流式细胞术分析细胞的凋亡情况;免疫印迹法检测细胞内质网应激和凋亡相关蛋白的表达;荧光定量PCR 技术检测细胞内质网应激和凋亡相关蛋白mRNA表达。结果 不同浓度去甲斑蝥素处理PANC-1细胞24h后,与对照组相比,能降低细胞的存活率并诱导其凋亡。与对照组相比,处理组中内质网应激和凋亡相关蛋白的表达水平均上调（均P＜0.05）,同时其mRNA 的表达水平亦均上调（均P＜0.05）。结论 去甲斑蝥素能明显抑制人胰腺癌PANC-1 细胞的生长并诱导其凋亡,并且具有浓度依赖性,这一作用可能是通过内质网应激介导的凋亡途径实现的。     

三联疗法治疗难治性原发性胆汁性胆管炎的临床研究

目的 探讨熊去氧胆酸（ursodeoxycholic acid,UDCA）联合泼尼松龙、免疫抑制剂治疗难治性原发性胆汁性胆管炎（primary biliary cholangitis,PBC）的临床疗效。方法 选取2017年6月至2019年6月于温州医科大学附属平阳医院就诊的难治性PBC患者59例,所有患者在原有UDCA治疗的基础上加用泼尼松龙和免疫抑制剂（硫唑嘌呤或吗替麦考酚酯）,记录患者在基线和治疗3、6、12、18、24个月时的实验室检查、免疫指标、肝纤维化无创性评估数据,探讨影响难治性PBC患者预后的因素。结果 所有患者基线时谷丙转氨酶（alanine aminotransferase,ALT）、谷草转氨酶（aspartate aminotransferase,AST）、碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）、γ-谷氨酰转移酶（γ-glutamyl transferase,GGT）、总胆红素（total bilirubin,TBiL）、免疫球蛋白（immunoglobulin,Ig）G和IgM均高于正常值范围,白蛋白（albumin,ALB）均低于正常值;肝脏病理分期以Ⅱ～Ⅲ期为主。谷草转氨酶-血小板比率指数（aspartate aminotransferase-to-platelet ratio index,APRI）、基于4因子的纤维化指数（fibrosis index based on the four factors,FIB-4）显示肝纤维化进展与肝脏病理一致。抗线粒体抗体（anti-mitochondrial antibody,AMA）阳性率为72.88%,抗核抗体（antinuclear antibody,ANA）阳性率为96.61%。随访24个月,结果显示ALT、AST、ALP、GGT、TBiL、IgG、IgM、APRI和FIB-4呈下降趋势（P<0.05）,ALB呈上升趋势（P<0.05）;治疗3个月后AMA阳性率和ANA阳性率均为0。多因素分析结果显示基线ALB降低是难治性PBC患者预后不良的危险因素（P<0.05）。结论 UDCA联合泼尼松龙、免疫抑制剂的三联疗法治疗难治性PBC患者可明显改善各项指标,值得临床推荐应用;基线ALB降低是造成难治性PBC患者预后不良的危险因素,应密切监测。     

胃组织NHE1蛋白检测诊断早期胃癌的可行性分析

目的 探讨胃组织钠氢交换蛋白1(NHE1)检测在早期胃癌诊断中的作用。 方法 选择2007年5月—2015年5月期间于浙江省平阳县人民医院接受手术的胃癌患者、胃镜检查中取得的胃黏膜组织共50例,人胃癌细胞株SGC-7901和人正常黏膜细胞株GES-1,比较NHE1的mRNA表达以及蛋白质表达情况。观察NHE1特异性阻断剂EIPA对SGC-7901胃癌细胞株的影响。 结果 胃癌样本组织及SGC-7901细胞株中NHE1的mRNA表达明显高于胃正常黏膜组织和GES-1胃黏膜细胞(均P＜0.05)。胃正常黏膜组织中NHE1的IOD值与GES-1细胞株中NHE1的IOD值差异无统计学意义(P＞0.05),胃癌组织中NHE1的IOD值与SGC-7901细胞株中NHE1的IOD值差异无统计学意义(P＞0.05),胃癌组织中的NHE1的IOD值高于正常黏膜组织中NHE1的IOD值(P＜0.05),SGH-7901细胞株的NHE1的IOD值高于GES-1细胞株中的NHE1的IOD值(P＜0.05)。采用不同浓度EIPA处理SGC-7901,24 h后测定OD值,随着EIPA浓度增加,SGC-7901的OD值呈现明显下降的趋势,在EIPA浓度不超过30 μm/ml的范围内具有较好的剂量-效应关系。 结论 胃癌患者生存率的提高有赖于早期的诊断和早期正确的治疗,胃组织NHE1蛋白检测用于辅助诊断胃癌或癌前病变有一定的临床意义。