HBx通过Notch信号通路在正常免疫小鼠体内导致肝癌的作用机制

目的 构建长期携带乙型肝炎病毒X(hepatitis B virus X,HBx)的正常免疫小鼠模型,以探讨HBx在体内导致肝癌发生的机制.方法 将转染HBx的肝前体细胞经肝门静脉注射入昆明小鼠体内构建动物模型,分别于术后30、90、180、360 d收取肝脏组织,Western blot和RT-qPCR检测HBx的表达,HE染色观察组织病理切片,Western blot和RT-qPCR检测Notch1、Notch4、Hes1的表达,然后于180 d腹腔注射抑制剂DAPT,Western blot和RT-qPCR检测肝脏细胞凋亡及细胞周期相关因子的表达变化.结果 动物模型构建成功且于360 d发生肝癌,与对照组相比,Notch1、Notch4、Hes1的基因及蛋白水平均于30 d呈现显著上调且一直持续至360 d(P＜0.05、P＜0.05、P＜0.001;P＜0.05、P＜0.05、P＜0.01);Bcl-2、CDK4、CyclinE、CyclinD1的蛋白水平在HBx组上调(P＜0.001;P＜0.01;P＜0.001;P＜0.01),Bax呈下调(P＜0.001),基因水平与其一致(P＜0.05;P＜0.001;P＜0.001;P＜0.01;P＜0.001),而抑制剂DAPT组显著扭转上述趋势.结论 HBx在体内通过持续激活Notch通路引起细胞凋亡及细胞周期异常变化,最终导致肝癌发生.     

妊娠期高血压综合征剖宫产产妇细菌群落结构变化

目的妊娠会影响产妇肠道微生物的组成,非妊娠高血压与肠道微生物组成密切相关,探讨妊娠期高血压综合征对婴儿肠道内细菌群落结构的影响。方法采用高通量测序技术对患有和未患有妊娠期高血压综合征剖宫产产妇的肠道、阴道及婴儿胎便样品中的细菌群落组成进行分析。结果显示患有妊娠期高血压综合征产妇各个样品的细菌群落结构都发生了变化。其中,产妇肠道及阴道内细菌群落结构变化较为明显。结论妊娠期高血压综合征对产妇自身肠道及阴道中细菌群落组成影响较大,特别是阴道样品,母亲患有妊娠期高血压综合征对其婴儿肠道内细菌群落结构几乎没有影响。     

糖尿病对不同分级慢加急性肝衰竭肝移植受者术后生存率的影响

目的探讨糖尿病对不同分级慢加急性肝衰竭(ACLF)肝移植受者术后生存率的影响。 方法回顾性分析美国移植受者科学登记处2017年1月1日至2017年12月31日因ACLF接受肝移植的1 144例受者临床资料。根据术前是否患有糖尿病,将其分为非糖尿病组(n＝927)和糖尿病组(n＝217)。采用Kaplan-Meier法评估生存率并绘制生存曲线,log-rank法用于比较组间差异。使用Cox比例风险模型分析预后因素。P<0.05为差异具有统计学意义。 结果糖尿病组与非糖尿病组受者年龄、体质指数(BMI)、基础肝脏疾病、终末期肝病模型评分、ACLF分级和术后住院时间差异均有统计学意义(U/χ²＝-6.290、-3.592、76.451、-2.959、8.150和-2.542,P均<0.05)。两组供者ABO血型差异有统计学意义(χ²＝8.463,P<0.05)。非糖尿病组受者肝移植术后死于多器官功能衰竭的比例(1.54%)低于糖尿病组受者(5.16%),差异有统计学意义(χ²＝8.863,P<0.05)。两组受者死于移植物功能衰竭、心脑血管疾病、出血、感染、恶性肿瘤和其他疾病的比例差异均无统计学意义(P均>0.05)。截至2021年9月1日,非糖尿病组ACLF 1级肝移植受者术后1、2和3年生存率分别为93.1%、90.5%和88.7%,糖尿病组分别为93.8%、92.2%和92.2%,差异无统计学意义(χ²＝1.021,P>0.05)。非糖尿病组ACLF 2级肝移植受者术后1、2和3年生存率分别为93.6%、89.8%和88.4%,糖尿病组分别为96.8%、95.7%和90.3%,差异无统计学意义(χ²＝0.850,P>0.05)。非糖尿病组ACLF 3级肝移植受者术后1、2和3年生存率分别为91.5%、89.2%和87.5%,糖尿病组分别为80.0%、71.7%和71.7%,差异有统计学意义(χ²＝11.444,P<0.05)。Cox比例风险模型多因素分析结果显示,受者术前糖尿病、族裔(非裔)和BMI是影响ACLF 3级肝移植受者术后生存的独立预测因子(HR＝2.31、2.13和1.04,P均<0.05)。 结论糖尿病显著降低ACLF 3级肝移植受者术后生存率,但对于ACLF 1、2级受者无明显影响。因此在进行肝移植受者术前评估时,应该重视ACLF 3级受者是否合并糖尿病,以获得更好的预后。     

HBx通过COX-2及其下游因子诱导小鼠发生肝癌的机制研究

目的 利用稳定表达乙型肝炎病毒X(hepatitis B virus X,HBx)的小鼠模型探讨HBx在致癌过程中COX-2以及下游因子的动态变化过程及其作用.方法 利用Western blot、RT-qPCR检测HBx-EGFP-14-19细胞中HBx的表达;通过向昆明(KM)小鼠肝门静脉注射HBx-EGFP-14-19细胞建立可长期稳定表达HBx的动物模型,分别在30、90、180和360 d处死小鼠;利用Western blot,RT-qPCR及免疫组化的方法检测HBx在肝脏中的表达,HE染色观察肝组织病理特征;Western blot,RT-qPCR检测肝组织中COX-2及其下游因子、细胞周期、凋亡相关因子mRNA和蛋白表达水平.结果 成功构建了可长期稳定表达HBx的动物模型并最终发展为肝癌;HBx转入小鼠体内90 d后COX-2及其下游因子VEGF的蛋白质和mRNA表达水平被持续上调直至肿瘤发生(P＜0.05);小鼠转入HBx后肝脏促凋亡因子Bad、Bax的蛋白质和mRNA表达水平降低(P＜0.05),抗凋亡因子Bcl-2的mRNA和蛋白水平升高(P＜0.05);细胞周期因子CyclinD1、CDK4的mRNA和蛋白质表达水平升高(P＜0.05);给予HBx组小鼠COX-2抑制剂塞来昔布后可逆转HBx对上述基因的作用.结论 HBx可导致肝癌发生,其机制可能与上调COX-2及其下游因子有关.