尿毒症毒素对人肾小管上皮细胞外基质的影响及临床意义

目的 探讨尿毒症毒素对人肾小管上皮细胞外基质的影响及临床意义。方法 无菌收集40份尿毒症患者血清和20例正常人血清，培养及鉴定人肾小管上皮细胞株（HK-2），采用消化法检测羟脯氨酸含量，ELISA方法检测纤连蛋白（FN）、金属蛋白酶-1（MMP-1）、金属蛋白酶组织抑制因子-1（TIMP-1）的蛋白分泌量，RT-PCR方法检测MMP-1、TIMP-1 mRNA的表达。结果 5％-20％浓度尿毒血清组胶原蛋白、FN分泌量均较正常对照组增高（P〈0．01），且随着尿毒血清浓度的升高而增高，以分子量〉10000ku的组分增高最为显著（P〈0．01）。各浓度尿毒血清组MMP-1／TIMP-1基因表达和蛋白分泌的比值均较正常对照组降低（P〈0．01），且随着尿毒血清浓度的增高而降低，以分子量〉10000ku尿毒血清组降低最为显著，而分子量〈5000ku尿毒血清组较正常对照组增高（P〈0．01）。结论 慢性肾衰竭患者体内蓄积的尿毒症毒素可能通过促进人肾小管上皮细胞外基质的分泌，减少其降解，加速肾小管．间质纤维化的进展，其中以分子量〉10000ku的尿毒症毒素作用最为显著。     

游离脂肪酸对大鼠系膜细胞细胞外基质表达及分泌的影响

目的探讨游离脂肪酸(freefattyacids,FFAs)对大鼠系膜细胞(MC)细胞外基质(ECM)的基因表达及分泌的影响。方法以体外培养的大鼠系膜细胞(HBZY-1细胞)为基础,采用半定量逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)法检测Ⅳ型胶原(ColⅣ)、纤维连接蛋白(FN)、转化生长因子(TGF-β1)mRNA的表达;采用酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测细胞外基质ColⅣ、FN的分泌。结果25、100、400μmol/L油酸刺激组中ColⅣ、FN、TGF-β1mRNA的表达分别为0.94±0.17、1.16±0.15、1.28±0.19和0.82±0.11、0.97±0.07、1.09±0.08及1.15±0.07、1.24±0.06、1.36±0.05,各处理组与对照组(0.73±0.16、0.53±0.09、0.96±0.11)相比较差异有统计学意义(P<0.01);25、100、400μmol/L油酸刺激组中ColⅣ、FN的分泌分别为(59.6±6.4)、(63.1±6.7)、(72.4±8.6)ng/ml和(106.1±6.4)、(121.0±7.1)、(137.5±9.7)ng/ml,各处理组与对照组[(52.3±7.2)、(93.2±8.7)]ng/ml相比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论游离脂肪酸具有增加细胞外基质基因表达和分泌的作用,可能参与肾小球硬化(GS)的进展机制。     

方格星虫提取物对膜性肾病模型的治疗作用及机制初探

目的:初步探讨方格星虫粗提物(SNP)对膜性肾病(MN)的治疗作用及其可能机制。方法:50只SD大鼠随机分为模型组和对照组,模型组大鼠腹腔一次注入抗FxlA血清建立被动性Heymann肾炎模型,模型建立1周后依24 h尿蛋白排泄量(24 h UPE)随机将Heymann肾炎大鼠分为SNP治疗组和未治疗组,治疗组用SNP灌胃治疗。考马斯亮蓝法每周测定24 h UPE。治疗4周结束后处死大鼠取双肾,光镜、电镜观察肾脏病理改变,RT-PCR法检测肾组织nephrin mRNA和podocin mRNA的表达量。结果:SNP治疗4周后大鼠24 h UPE较未治疗组降低(P<0.05);模型组大鼠肾小球基底膜增厚,上皮下电子致密物沉积,足细胞足突融合等病理改变,SNP治疗组大鼠上述病变较未治疗组减轻,经测定,足细胞足突融合率较未治疗组显著降低(P<0.01);SNP治疗组nephrin mRNA和podocin mRNA表达量较未治疗组升高(P<0.05)。结论:SNP可通过上调膜性肾病大鼠足细胞nephrin和podocin基因表达水平,一定程度上减轻足细胞足突融合,进而减少尿蛋白滤过,可能对人类膜性肾病具有辅助治疗作用。     

狼疮性肾炎患者白细胞介素-13的表达及其临床意义

目的 探讨狼疮性肾炎(LN)患者血浆及肾组织白细胞介素-13(IL-13)的表达及其临床意义。方法 采用ELISA法检测血浆IL-13水平，采用免疫组化ABC法检测肾组织IL-13的表达。结果 LN患者血浆IL-13水平、肾小球及肾小管间质区IL-13表达较对照组和非LN肾脏病对照组增高，以Ⅳ型LN患者肾小球区IL-13表达最高，而不同病理类型的LN肾小管间质区IL-13表达无显著性差异。LN患者血浆及肾小管间质区IL-13表达与Ccr和血清C3呈负相关，与肾小管间质病变活动指数和肾小球病变活动指数呈正相关。结论 IL-13参与LN的分子病理机制，血浆及肾组织IL-13水平可能有助于判断狼疮活动程度。     

Toll样受体9及其靶向药物研究进展

Toll样受体9是一种在天然免疫系统中发挥重要作用的模式识别受体,主要识别细菌和病毒DNA中的CpG基序,活化信号通路,诱导产生强烈的Thl优势免疫应答,调节IFN—α、ILs等细胞因子的分泌,参与感染和过敏性疾病、肿瘤、自身免疫性疾病的发病。因此,靶向TLR9的药物在这些疾病的治疗中有广泛的应用前景。     

系统性红斑狼疮活动的季节分布及其与气象因素的相关关系

目的探讨系统性红斑狼疮（SLE）活动的季节分布特点以及气象因素对狼疮活动的影响。方法回顾性分析湛江地区1997年1月至2006年12月共640例SLE活动患者的季节分布特点及其与气象因素（气温、湿度）的相关关系。结果在紫外线较弱的冬季,活动性SLE的比率（相对于总住院患者数）为3．89‰,显著高于紫外线较强的其他季节（春季：2．17‰,夏季：1．87‰,秋季：2．12‰）,均P〈0．001,尤以与夏季差异最显著;SLE活动病例分布与本地区月平均气温呈负相关（r=-0．352,P〈0．001）;SLE活动病例分布与本地区月平均湿度无相关性（r=0．053,P〉0．05）。结论SLE病情活动具有季节性,并与气温相关,原因需进一步研究。     

狼疮性肾炎患者肾组织Epstein-Barr病毒感染状况及其致病作用初探

并感染之间以及不同病理类型之间差异均无统计学意义(P＞0.05).肾组织EBER和EBV LMP1表达阳性的LN患者的血清中anti-Sm-Ab阳性率显著高于两标记物表达阴性的LN患者(EBER:34.3%vs 8.7%,EBV LMP1:35.3%vs 9.1%,P均＜0.05).结论 肾组织EBV感染可能参与了LN的发病,其机制可能部分与诱导机体产生自身抗体anti-Sm-Ab有关.     

游离脂肪酸对培养肾小管上皮细胞增殖和转化生长因子-β_1分泌的影响

目的:探讨游离脂肪酸(FFAs)在肾小管间质纤维化中的作用。方法:以去脂牛血清白蛋白(d-BSA)为油酸(OA)载体,用不同浓度OA刺激培养肾小管上皮细胞(RTECs),以不加d-BSA及只加普通培养液的细胞作对照组,应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测RTECs增殖能力,反转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测RTECs TGF-β1mRNA的表达水平,酶联免疫吸附(ELISA)法检测培养上清TGF-β1水平。结果:d-BSA组与空白对照组RTECs的增殖、TGF-β1mRNA表达及蛋白分泌比较无统计学差异(P>0.05),而不同浓度OA组与空白对照组比较有统计学差异(P<0.05),且随差OA浓度增加,对RTECs的增殖抑制以及对TGF-β1mRNA表达及蛋白分泌的促进作用有增强趋势。结论:FFAs可能通过抑制RTECs的生长并促进其TGF-β1的表达和分泌从而在肾小管间质纤维化(RTF)的发生发展中起着一定的作用。     

选择性Caspase-1抑制剂对BXSB狼疮性肾炎小鼠治疗作用研究

目的研究特异性Caspase-1抑制剂对狼疮性肾炎（LN）的治疗作用及其作用机制.方法应用特异性Caspase-1抑制剂AC-YVAD-CMK处理LN模型BXSB小鼠4周,然后观察此潜在药物对该模型尿蛋白浓度、肾功能和血清自身抗体水平以及肾脏病理形态学的影响,继之检测它对肾脏局部及全身系统Caspase-1活性以及其下游细胞因子IL-18和IFN-γ表达的影响.结果未治疗LN模型血清肌酐（Scr）、血清抗ds-DNA抗体水平以及尿蛋白浓度显著升高（P均＜0.05）;肾小球IgG沉积及肾小球病理损伤程度显著较对照小鼠严重（P均＜0.005）;肾脏及脾脏Caspase-1活性显著升高（P＜0.01）,成熟形式IL-18蛋白表达升高（P＜0.001）,IFN-γmRNA表达显著上调（P＜0.05）;血清IFN-γ水平也显著升高（P＜0.01）.ICE抑制剂处理后Scr、抗ds-DNA抗体水平及尿蛋白浓度显著回降（P＜0.05）;肾小球病理损伤较未处理组显著减轻（P＜0.05）,但肾小球IgG沉积差异无统计学意义（P＞0.05）;肾脏及脾脏Caspase-1活性、成熟IL-18蛋白表达和IFN-γ mRNA表达均有不同程度回降（P均＜0.05）,血清IFN-γ水平也显著回降（P＜0.05）.结论选择性Caspase-1抑制剂对LN肾损伤具有良好的保护作用,抑制Caspase-1活性,进而抑制IL-18等细胞因子的活化和下游因子IFN-γ等的表达是其主要作用机制.     

IL-13对肾小球系膜细胞表达ICAM-1的影响

<正> 白细胞介素13(IL-13)是一种多效性Th2细胞因子,与IL-10有部分相似的生物学功能。有报道IL-10能抑制肾小球系膜细胞(MC)表达细胞间粘附分子-1(ICAM-1),亦有报道IL-13抑制体外培养的MC表达一氧化氮合酶mRNA。IL-13对MC表达ICAM-1的影响未见报道,因此本实验拟观察IL-13对体外培养的MC表达ICAM-1的影响。1 材料与方法1.1 实验材料 雄性SD大鼠,体重120-150 g,2-3月