裸鼠异种移植急性T淋巴细胞白血病模型的建立

目的 比较尾静脉注射和皮下注射入Jurkat细胞建立异种移植急性T淋巴细胞白血病模型的优缺点.方法 雌性BALB/c裸鼠随机分为正常组、尾静脉移植组和皮下移植组.除正常组外,其余裸鼠造模前连续2d给予环磷酰胺(2 mg/只),尾静脉移植组连续2 d尾静脉接种5×106个Jurkat细胞,皮下移植组连续2 d皮下接种5×106个Jurkat细胞,正常组裸鼠尾静脉注射相同体积PBS缓冲液.观察并记录裸鼠体质量、弓背以及精神状态.第7天和第14天通过流式细胞术检测Jurkat细胞在裸鼠外周血中浸润情况.第28天待尾静脉移植组和皮下移植组裸鼠出现衰竭体征濒临死亡时处死裸鼠,记录裸鼠体质量,瑞氏-吉姆萨染色检测外周血和骨髓中Jurkat细胞的浸润情况,流式细胞术检测脾脏和骨髓中Jurkat细胞的百分比,HE染色、免疫组化法检测肝脏和脾脏中浸润的Jurkat细胞表达,ELISA检测血清中Jurkat细胞分泌IL-2水平.结果 与正常组相比,尾静脉移植组和皮下移植组裸鼠均逐渐出现体质量下降、弓背、食欲减退等表现,肝脏、脾脏及骨髓中均有人Jurkat细胞表达.尾静脉移植组成模率73％,皮下移植组成模率40％.结论 尾静脉注射和皮下注射异种移植Jurkat细胞两种方法均可成功建立急性T淋巴细胞白血病动物模型,尾静脉注射移植效果更佳.     

B淋巴细胞刺激因子及其受体介导的免疫细胞信号转导

肿瘤坏死因子家族成员B淋巴细胞刺激因子(BLyS)与其受体BAFF-R、BCMA和TACI特异性结合后,启动下游MAPK和NF-κB等抗凋亡信号通路,是维持免疫细胞生存、分化以及成熟的重要因素。该文就BLyS/BLyS-受体介导信号转导通路调节免疫细胞功能,参与免疫性疾病的发生以及各信号通路间的相互调控予以综述。     

五味子及木脂素成分对肝CYP3A酶活性的影响

目的研究五味子和五味子科8种木脂素成分对大鼠肝CYP3A1／2活性和人肝CYP3A4活性的影响。方法在体外大鼠及健康人肝微粒体孵育体系中加入底物睾酮和不同浓度的五味子或木脂素成分，甲醇终止反应，用高效液相色谱仪检测睾酮的羟化代谢产物68羟基睾酮的生成量反映CYP3A酶活性。人原代肝细胞和五味子水提物共同培养3d后同法测定CYP3A酶活性的变化。结果大鼠肝微粒体孵育体系中，五味子水提物和醇提物对CYP3A1／2酶活性有浓度依赖性抑制作用，IC50分别为487．8和175．7mg·L^-1，五味子酯甲、南五味子素、异南五味子素、内南五味子素和angeloyl binankadsurina A的IC50分别为3．77、6．18、20．67、16．43和23．07μmol·L^-1；人肝微粒体孵育体系中，五味子水提物抑制CYP3A4酶活性的IC50为317．3mg·L^-1，8种木脂素成分对酶活性的抑制作用与大鼠微粒体结果相似；人原代肝细胞培养中，五味子水提物（1500mg·L^-1）浓度可以抑制50％以上的CYP3A4酶活性。结论体外给药五味子和五种木脂素成分对大鼠肝CYV3A1／2活性和人肝CYP3A4活性有浓度依赖性抑制作用。     

白芍总苷对胶原性关节炎大鼠滑膜β抑制蛋白的影响与其抑制滑膜细胞增殖的关系

目的探讨白芍总苷(TGP)对胶原性关节炎(CIA)大鼠滑膜β抑制蛋白1、2表达的影响与其抑制成纤维样滑膜细胞(FLS)增殖的关系。方法采用CCⅡ诱导大鼠CIA模型,TGP(25、50、100 mg.kg-1.d-1)、雷公藤多苷(GTW)(40 mg.kg-1.d-1)灌胃给药(d 14～28),进行大鼠多发性关节炎指数评分;MTT法检测FLS的增殖;Western blot法检测不同剂量TGP体内给药对β抑制蛋白1、2表达的影响。结果 TGP(25、50、100 mg.kg-1,ig,d 14～28)可明显减轻CIA大鼠多发性关节炎指数,抑制FLS增殖反应;TGP可下调β抑制蛋白2的表达;TGP对β抑制蛋白2表达的影响与其抑制FLS增殖作用呈高度相关。结论 TGP可抑制FLS的增殖,其机制可能与其下调β抑制蛋白2的表达有关。     

儿茶素对人肝癌细胞HepG2的影响

目的研究儿茶素[(+)-catechin,Cat]不同时间、不同浓度对人肝癌细胞(HepG2)的增殖、迁移能力的抑制及诱导凋亡作用。方法 HepG2细胞分别与不同浓度Cat作用,MTT法检测细胞增殖率的变化,显微镜观察细胞形态学变化,划痕法检测细胞的迁移能力,流式细胞术检测细胞凋亡率,免疫组织化学染色法检测HepG2的Bcl-2、Bax和Caspase-3蛋白表达。结果 Cat(4~100mg·mL-1)能明显抑制人肝癌细胞HepG2的增殖和迁移能力,并呈浓度依赖性。流式细胞术检测结果显示Cat(4mg.L-1)作用于HepG2细胞24h即可诱导细胞凋亡。免疫组织化学结果显示Cat(4~20mg·mL-1)的Bax和Caspase-3的表达呈浓度依赖性升高,而Bcl-2的表达呈浓度依赖性降低。结论 Cat可以一定程度的抑制HepG2细胞的增殖和迁移能力并诱导其凋亡,其诱导凋亡机制可能与其下调HepG2细胞内Bcl-2蛋白的表达,上调Bax蛋白的表达,从而促进Caspase-3活化有关。     

IgD在自身免疫病中作用的研究进展

免疫球蛋白D(immunoglobulin D,IgD)最初认为是一类进化产生不久的、仅表达于部分哺乳动物体内的免疫球蛋白。然而,新近研究表明,IgD在绝大部分有颚脊椎动物体内都表达,且具有重要的免疫功能。其结构在进化过程中表现出多样性,哺乳类动物通过选择性剪切(alternative RNA splicing)和免疫球蛋白类别转换(class switch recombination,CSR)表达IgD。IgD既可以作为受体也可以作为配体参与免疫应答,但由于B细胞上IgD和IgM功能不易区分,且T细胞等免疫细胞上的IgD受体(IgD receptor,IgD-R)未被克隆,IgD的免疫调节机制尚不明确。故本文就IgD对T、B淋巴细胞功能的影响及其在自身免疫病中的作用、机制作一简要综述。     

重组人肿瘤坏死因子受体融合蛋白治疗大鼠佐剂性关节炎的作用及对巨噬细胞功能的影响

目的:研究重组人肿瘤坏死因子受体融合蛋白(RhTNFR:Fc)对佐剂性关节炎(AA)大鼠模型的治疗作用及对巨噬细胞产生细胞因子的影响。方法:完全弗氏佐剂免疫SD大鼠诱导AA模型,随机分为正常组、模型组、RhTNFR:Fc低、中、高剂量组(1,3,9 mg.kg-1)和阴性对照组(IgG-Fc 9 mg.kg-1)。记录全身评分、关节炎指数、足爪肿胀度、关节肿胀数等整体评价指标、足爪X线摄片、踝关节病理检查及评分,ELISA试剂盒测定腹腔巨噬细胞(PMφ)上清中细胞因子白细胞介素1β(IL-1β),IL-6和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。结果:RhTNFR:Fc给药组能不同程度地降低AA大鼠升高的全身评分、关节炎指数、足爪肿胀度和关节肿胀数等整体评价指标,减轻AA大鼠的关节炎症,改善AA大鼠X线摄片评分和关节病理学变化,下调PMφ的IL-1β,IL-6和TNF-α的分泌水平。结论:RhTNFR:Fc对大鼠AA的关节炎症具有治疗作用,且抑制腹腔巨噬细胞促炎性细胞因子的表达。     

大鼠佐剂性关节炎模型表现特征及评价指标

目的:描述大鼠佐剂性关节炎(Adjuvant-induced arthritis,AA)临床表现主要指标的评价方法。方法:完全弗氏佐剂免疫SD大鼠诱导AA模型,进行全身及关节炎指数评分、计算关节肿胀数、测定足爪肿胀度、进行足爪X线摄片、踝关节病理检查及评分。结果:大鼠免疫后11天(d11)出现足爪红肿,全身及关节炎指数评分和关节肿胀数增加。炎症高峰期在免疫后d19～d28。大鼠出现活动障碍,可见耳朵、鼻和尾根部"关节炎"结节。X线可见关节软组织肿胀、骨密度降低、骨侵蚀病灶以及关节间隙狭窄甚至消失。踝关节病理见滑膜组织增生,炎细胞浸润,血管翳出现等。结论:大鼠AA是兼有局部关节炎症和全身表现的类风湿性关节炎动物模型。关节炎指数、关节肿胀数、足爪肿胀度、足爪X线摄片、踝关节病理等是评价AA模型临床表现的主要指标。