吉非替尼联合二甲双胍对EGFR-TKIs原发性耐药非小细胞肺癌H1975细胞的抑制作用及其机制研究

目的 探讨吉非替尼联合二甲双胍对肺癌H1975细胞的抑制增效作用及其机制.方法 采用MTT、克隆形成实验观察吉非替尼与二甲双胍单用及联用对原发性耐药非小细胞肺癌H1975细胞增殖活性的影响;Matrigel包被的Transwell小室检测细胞侵袭能力;划痕愈合实验检测细胞迁移能力;TUNEL检测细胞凋亡率;Western blot、免疫荧光法检测凋亡和上皮细胞-间充质转化(epithelial tomesenchymal transition,EMT)相关蛋白的变化.结果 吉非替尼联合二甲双胍组对H1975细胞增殖、侵袭及迁移抑制效应优于吉非替尼组,协同增效作用明显(P＜0.05);吉非替尼和二甲双胍单用时较对照组的细胞凋亡率增加,当两者联合作用时细胞凋亡率增加更显著(P＜0.05),且明显下调抗凋亡相关蛋白(Bcl-xl、Mcl-1)和上调促凋亡蛋白Bax;两药联用明显逆转H1975细胞EMT的发生;间质细胞相关蛋白(Vimentin、N-cadherin、Slug、Snail)表达水平降低,上皮细胞相关蛋白E-cadhenn表达水平升高.结论 吉非替尼联合二甲双胍可显著抑制EGFR-TKIs原发性耐药非小细胞肺癌H1975细胞的增殖、侵袭和迁移,促使肿瘤细胞凋亡;其机制可能通过激活线粒体凋亡途径及逆转EMT的发生来发挥抗肿瘤作用.     

ＩＬ-６致非小细胞肺癌 ＰＤ-１抑制剂治疗抵抗的效应和机制研究

目的：通过回顾性分析晚期非小细胞肺癌（ｎｏｎ ｓｍａｌｌｃｅｌｌｌｕｎｇｃａｎｃｅｒ,ＮＳＣＬＣ）患者外周血白细胞介素 ６（ｉｎ ｔｅｒｌｅｕｋｉｎ６,ＩＬ ６）水平与程序性细胞死亡蛋白 １（ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄｃｅｌｌｄｅａｔｈｐｒｏｔｅｉｎ １,ＰＤ １）抑制剂疗效的相关性,初步探 讨 ＩＬ ６致 ＰＤ １抑制剂治疗抵抗的效应和机制。方法：纳入接受 ＰＤ １抑制剂治疗且有治疗前外周血 ＩＬ ６检测结果 的晚期 ＮＳＣＬＣ患者,分析 ＩＬ ６水平与客观缓解率（ｏｂｊｅｃｔｉｖｅｒｅｓｐｏｎｓｅｒａｔｅ,ＯＲＲ）、持续临床获益（ｄｕｒａｂｌｅｃｌｉｎｉｃａｌｂｅｎｅ ｆｉｔ,ＤＣＢ）、无持续临床获益（ｎｏｎ ｄｕｒａｂｌｅｃｌｉｎｉｃａｌｂｅｎｅｆｉｔ,ＮＤＢ）的相关性。通过 ＣＣＫ ８及 Ｋｉ６７实验检测 ＩＬ ６对 Ｔ细胞 杀伤肿瘤细胞效应的影响,Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测目的蛋白的表达情况。结果：３０例晚期 ＮＳＣＬＣ患者中 ＤＣＢ组 ＩＬ ６水平 显著低于 ＮＤＢ组（中位值 ４．６０ｐｇ／ｍＬｖｓ１２．８８ｐｇ／ｍＬ,Ｐ＝０．００２）。低 ＩＬ ６组（＜７ｐｇ／ｍＬ,ｎ＝１０）与高 ＩＬ ６组（≥７ ｐｇ／ｍＬ,ｎ＝２０）相比,ＤＣＢ占比更大（１００％ ｖｓ５０％,Ｐ＝０．００２）,ＯＲＲ更高（６５％ ｖｓ２０％,Ｐ＝０．０２５）,中位无进展生存 期更长（未达到 ｖｓ８个月,Ｐ＝０．００７）。ＣＣＫ ８及 Ｋｉ６７检测结果示,外加 ＩＬ ６可显著抑制 Ｔ细胞对 Ｈ１２９９、Ａ５４９细胞 的杀伤效果。Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测发现,外加 ＩＬ ６可显著上调 ｐ ＳＴＡＴ３、ｐ ＡＫＴ水平,并显著下调 ＳＴＩＮＧ和 ｐ-ＴＢＫ１表 达。结论：外周血 ＩＬ-６水平与晚期 ＮＳＣＬＣ患者 ＰＤ-１抑制剂治疗效果显著负相关。ＩＬ-６可能通过活化 ＳＴＡＴ３-ＡＫＴ 通路进而抑制 ＳＴＩＮＧ-ＴＢＫ１信号,减弱 Ｔ淋巴细胞对肿瘤细胞的杀伤。     

不同剂量吉非替尼对博莱霉素所致大鼠肺纤维化影响的比较

目的：对比观察不同剂量吉非替尼对博莱霉素所致大鼠肺纤维化的影响。方法将75只雄性SD大鼠分为5组：对照组、博莱霉素组、低剂量吉非替尼联用组、中剂量吉非替尼联用组、高剂量吉非替尼联用组,每组15只。观察大鼠存活情况,第21天时杀鼠取左肺石蜡切片行HE染色及Masson染色,右肺ELISA方法检测羟脯氨酸含量。结果高剂量吉非替尼联用组能明显加重博莱霉素所致肺纤维化,Ashcroft评分、肺组织胶原沉积及羟脯氨酸含量明显增多（P＜0．05）。中等剂量吉非替尼联用组Ashcroft评分较博莱霉素组差异无统计学意义（P＞0．05）,羟脯氨酸含量明显增加（P＜0．05）。而低剂量吉非替尼联用组各项指标与博莱霉素组比较,差异无统计学意义（P＞0．05）。结论吉非替尼能加重博莱霉素所致大鼠肺纤维化,且吉非替尼剂量越大,大鼠肺纤维化程度越高。