髓样来源的抑制细胞在舌癌小鼠中的表达及意义

目的 评价舌癌小鼠外周血和病变部位髓样来源的抑制细胞（MDSC）的变化及意义。方法 建立4NQO舌癌小鼠模型,观察MDSC细胞在外周血的表达,同时观察T细胞亚群的表达,评价MDSC细胞与T细胞亚群及CD4⁺/ CD8⁺比例变化的相关性。观察MDSC细胞在舌黏膜病变部位的表达,并检测舌组织精氨酸酶1（ARG-1）mRNA的表达。结果 4NQO小鼠外周血中MDSC比例随着肿瘤进展显著升高（P<0.01）,外周血中MDSC比例与相应CD3⁺CD8⁺T细胞的比例呈正相关,与CD4⁺/CD8⁺比呈负相关关系。4NQO小鼠异常增生区域的MDSC细胞较正常对照组有所增加,在舌癌组织内及与正常组织的交界处,均浸润了大量的MDSC细胞,而且ARG-1 mRNA水平显著升高（P<0.01）。结论 MDSC细胞在舌癌组织和外周血中的扩增可能是肿瘤进展的重要原因。MDSC细胞可能成为口腔癌免疫治疗的潜在靶点。     

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目的探讨腮腺多形性腺瘤术后复发及恶变的原因及临床治疗方法。方法对2003年7月至2007年7月北京大学深圳医院口腔颌面外科收治的12例腮腺多形性腺瘤复发患者进行回顾性分析和追踪调查。结果腮腺多形性腺瘤复发病例肿块多呈多灶性(6/12),剜除术复发率最高,复发间期最短(P<0.05)。12例中有4例发生恶变,占33.3%,末次手术分别采用浅叶切除术、腮腺全切术、扩大切除术,对4例有恶变者术后辅以放射治疗。术后平均追踪24个月,均未见复发。结论导致腮腺多形性腺瘤复发的主要原因是不恰当的手术方式以及手术施行者为非口腔颌面外科专业医生。     

转人B7-H3基因鳞癌细胞瘤苗体外诱导抗肿瘤免疫应答的研究

目的:研究转人B7-H3基因鳞癌细胞疫苗体外诱导抗肿瘤免疫应答的能力。方法:采用脂质体介导法将真核表达质粒pEGFP-B7-H3导入人鳞癌细胞Tca8113,经G418筛选后获得稳定高表达克隆,以丝裂霉素C(MMC)处理后,制成肿瘤细胞疫苗,经体外与人外周血淋巴细胞共同培养后,测定淋巴细胞特异性杀伤活性及对淋巴细胞产生细胞因子的影响。结果:转染B7-H3的Tca8113细胞能够高表达B7-H3蛋白。经MMC处理后,与野生型的Tca8113细胞相比,上述瘤苗能诱导淋巴细胞产生针对Tca8113的特异性杀伤作用,能显著增强淋巴细胞分泌IFN-γ的能力。结论:转B7-H3基因人鳞癌细胞疫苗能诱导有效的抗鳞癌免疫反应。     

转人4-1-BBL口腔鳞状细胞癌体外诱导特异性抗肿瘤免疫的研究

目的 构建转染人口腔鳞状细胞癌细胞株4-1-BBL基因,探讨其体外诱导抗肿瘤免疫的能力.方法 通过脂质体法将重组载体pEGFP-4-1-BBL转染人口腔鳞状细胞癌细胞Tca8113,经G-418筛选及有限稀释后获得稳定高表达克隆,分别用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹法检测转染细胞中人4-1-BBL mRNA和蛋白的表达.制备肿瘤细胞疫苗.用淋巴细胞分离液分离纯化人外周血T淋巴细胞,用抗CD-3单抗预处理T细胞后,与转染及未转染人4-1-BBL的Tca8113疫苗混合培养.用CCK-8比色法检测细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocytes,CTL)的杀伤活性;锥虫蓝计数法检测T细胞增殖,酶联免疫吸附实验检测培养上清液中自细胞介素(IL)-2、干扰素γ分泌水平.结果 转基因Tca8113细胞能够稳定高表达人4-1-BBL.与野生型的Tca8113细胞相比较,转染人4-1-BBL的Tca8113细胞PCR扩增产物的大小约271 bp,能够显著增强T细胞增殖,促进IL-2、干扰素γ分泌,并能有效地诱导CTL产生对Tca8113细胞的特异性杀伤作用.结论 转染4-1-BBL基因既能增强野生型Tca8113细胞的免疫原性,也能诱导T细胞产生有效的抗肿瘤免疫应答.     

人共刺激分子4—1BBL表达载体的构建及转染Tca8113细胞的研究

目的：克隆人肿瘤坏死因子配体超家族tumor necrosis factor superfamily，TNFSF）成员4—1BBL基因，构建其真核表达载体，并检测4—1BBL基因在Tca8113中的表达。方法：从淋巴细胞中提取RNA，用RT—PCR方法将4—1BBL的编码序列cDNA扩增。然后将该基因的编码序列插入真核荧光蛋白载体pEGFP—C1质粒中，构建成最终的表达载体DEGFP—C1—4—1BBL。运用脂质体方法将pEGFP—C1—4—1BBL转染Tca8113细胞，转染24h后，荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白的表达．RT—PCR和免疫印迹检测4—1BBL在该细胞中的表达。经G418筛选后。用有限稀释法建立稳定高表达的带有4—1BBL基因的Tca8113细胞系。结果：从淋巴细胞中提取的RNA经RT—PCR扩增出目的基因4—1BBL，其全长大小为768bD。测序鉴定该序列与GenBank中的序列相同。转染pEGFP—C1—4—1BBL载体的靶细胞Tca8113中．荧光显微镜下可见其表达绿色荧光蛋白，RT—PCR方法检测到目的基因4—1BBL的768bp大小的cDNA扩增产物。裂解的4—1BBL／rca8113基因转染细胞膜蛋白中相对分子质量约27．5Kd的特异性条带。结论：转染4—1BBL基因细胞株的建立．为该基因功能的后续研究和单克隆抗体的研制奠定了基础。     

舌鳞癌患者外周血髓样来源抑制细胞的表达及意义

目的：鉴定舌鳞癌患者外周血中血样业源抑制细胞（ MDSC）的表型,探讨影响舌鳞癌患者外周血中MDSC表达的相关因素。方法选择未接受过治疗的舌鳞癌患者27例和健康志愿者16例,分别记录患者的性别、年龄、吸烟史、TNM分期、病理分型。流式细胞学技术分析患者和健康志愿者外周血中CD14－CD33＋CD11b＋MDSC细胞的表达。结果舌鳞癌患者与健康志愿者间性别和年龄差异无统计学意义。患者外周血中MDSC细胞比例高于健康志愿者（ P＜0.001）。舌癌患者中吸烟者与非吸烟者间外周血MDSC细胞差异无统计学意义（ P＞0.05）。晚期舌癌患者MDSC细胞比例高于早期舌癌患者（P＜0.05）。舌癌高分化者与中分化者,中分化者与低分化者间MDSC细胞比例差异均无统计学意义（P＞0.05）;而高分化者MDSC细胞比例高于低分化者（P＜0.05）;三者外周血中MDSC细胞比例均高于健康志愿者（P＜0.05）。患者TNM分期和病理分级与外周血中MDSC细胞比例有明显相关性（P＜0.05）。结论舌鳞癌患者外周血中CD14－CD33＋CD11b＋MDSC比例较健康人明显升高,升高的程度与临床分期和病理分级相关。     

腮腺沃辛瘤31例临床分析

沃辛瘤又名腺淋巴瘤或乳头状淋巴囊腺瘤,是发生于腮腺、仅次于多形性腺瘤是居第二位的良性肿瘤[1].病因目前尚不清楚,有学者认为该病由于涎腺导管上皮迷走于淋巴结并异常增长所形成,也有学者证实腺淋巴瘤上皮是多克隆来源,认为该肿瘤非真性肿瘤,是一种瘤样状态.     

CIK细胞及其抗肿瘤研究进展

细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK细胞)是由多种细胞因子,如干扰素γ、重组白细胞介素2、抗CD3McAb等诱导而成的对多种肿瘤具有杀伤活性的细胞毒性T细胞,具有高效的非主要组织相容性复合物限制性溶瘤活性,被认为是抗肿瘤过继细胞免疫治疗的新希望。本文综述了CIK细胞的特点、杀瘤机制和临床应用现状。