蝙蝠葛酚性碱对胰腺癌BxPC-3细胞增殖抑制作用及其对Hh信号通路影响

目的:探讨蝙蝠葛酚性碱(PAMD)对人胰腺癌BxPC-3细胞的增殖抑制作用,以及通过观察PAMD对胰腺癌BxPC-3细胞Hedgehog信号通路中Shh、Ptch1 mRNA和蛋白表达的影响,进一步讨论PAMD抗胰腺癌的作用机制及其作用靶点。方法:对人胰腺癌BxPC-3细胞进行体外培养,以不同终浓度的PAMD培养液进行干预,对照组用正常培养液培养,进行以下实验:(1)利用台盼蓝染色测定各组中BxPC-3细胞生长周期;(2)运用MTT法检测各组BxPC-3细胞增殖情况;(3)利用RT-PCR、Western Blot技术检测各组BxPC-3细胞中Shh、Ptch1mRNA及蛋白的表达。结果:(1)各给药组与对照组相比,癌细胞生长缓慢;(2)PAMD高、低剂量组及5-FU组细胞的增殖抑制率分别为72.35%、44.62%、56.07%;(3)与对照组相比,Shh、Ptch1 mRNA的表达均下降,差异显著(P0.01),具有统计学意义。结论:PAMD对人胰腺癌BxPC-3细胞有增殖抑制作用,对Hedgehog信号通路关键位点的表达有一定的抑制作用。由此推断,PAMD对胰腺癌的抗癌作用机制可能与Hedgehog信号通路有关。     

PAMD对BxPC-3细胞病理形态、细胞凋亡及细胞周期影响

目的:研究人胰腺癌细胞BxPC-3在蝙蝠葛酚性碱(PAMD)的干预下出现增殖抑制的作用,以及观察PAMD作用于BxPC-3细胞使其产生的病理形态、细胞凋亡及细胞周期的影响。方法:培养BxPC-3细胞,进行以下实验:(1)利用台盼蓝染色测定法测定各组中BxPC-3细胞的生长周期,并根据周期绘制其生长曲线;同时采用MTT法检测法测定各组中BxPC-3细胞的增殖情况;(2)利用透射电镜观察PAMD对BxPC-3细胞病理形态的变化;然后利用流式细胞术检测法检测各组BxPC-3细胞的细胞周期及其细胞凋亡的情况。结果:(1)根据盼蓝染色测定实验可知,各给药组细胞的生长较为缓慢;MTT实验可知,各组细胞的增殖抑制率PAMD高剂量组最高,其次是5-FU组,最后PAMD低剂量;(2)透射电镜显示:各给药组与对照组相比较各给药组的细胞核固缩,并伴有凋亡小体样形成;流式细胞术结果显示:各给药组与对照组的相比,各给药组细胞均停滞在细胞周期中的G1期并且各给药组细胞的细胞凋亡率均有所上升,差异有统计学意义(P0.05或P0.01)。结论:PAMD使BxPC-3细胞被阻滞在G1期然后阻断其复制增殖,促进细胞凋亡,并且对肿瘤细胞的超微结构造成一定的影响。BxPC-3在PAMD的作用下出现增殖抑制。     

PAMD对人胰腺癌Hh信号通路中Smo、Gli-1mRNA和蛋白表达的影响

目的:探讨蝙蝠葛酚性碱(PAMD)对人胰腺癌BxPC-3细胞的增殖抑制作用,以及通过观察PAMD对胰腺癌BxPC-3细胞Hedgehog信号传导通路中Smo、Gli-1mRNA和蛋白表达的影响,进一步讨论PAMD对胰腺癌Hh信号通路的作用机制及其作用靶点。方法:对人胰腺癌BxPC-3细胞进行体外培养,以终浓度为80、40μg/mL的PAMD培养液以及5-FU终浓度为50μg/mL进行干预,进行以下实验:(1)利用台盼蓝染色测定各组中BxPC-3细胞不同时间点的活细胞数;(2)运用MTT法检测各给药组对BxPC-3细胞增殖抑制情况;(3)利用RT-PCR、Western Blot技术检测各组BxPC-3细胞中Smo、Gli-1mRNA及蛋白的表达。结果:(1)与对照组相比,BxPC-3细胞生长缓慢;(2)PAMD高、低及5-FU组细胞的增殖抑制率分别为71.15%、43.44%、55.38%;(3)PAMD高、低剂量组及5-FU组BxPC-3细胞中的Smo、Gli-1mRNA及蛋白表达降低,差异具有统计学意义(P0.01)。结论:PAMD对人胰腺癌BxPC-3细胞有增殖抑制作用,对Hedgehog信号通路中相关蛋白的表达有抑制作用。因此我们推断,PAMD对胰腺癌的增殖抑制作用机制可能与Hedgehog信号通路有关。     

刺五加有效组分对帕金森病模型细胞中相关微小RNA表达的干预作用

目的研究刺五加有效组分对帕金森病模型PC12细胞(MPP+所诱导的)损伤是否具有保护作用,并且观察其对微小RNA表达的影响。方法采用MPP+作用于PC12细胞的方法来构建帕金森病(PD)的细胞模型,以刺五加有效组分对模型进行药物干预;采用MTT法检测细胞存活率;运用RT-PCR法检测mi RNA-205、mi RNA-433以及mi RNA-153 mRNA的表达水平。结果与空白组比较,模型组PC12细胞的OD值存活率减少(P <0.05);与模型组比较,给药组细胞OD值存活率增加(P <0.05),mi RNA-205、mi RNA-433以及mi RNA-153 mRNA的表达水平上升,差异有统计学意义(P <0.05)。结论刺五加有效组分对PC12细胞(由MPP+诱导的)的损伤具有一定的保护作用,其作用机制可能是通过影响相关微小RNA:mi RNA-205、mi RNA-433以及mi RNA-153 mRNA的表达,从而影响帕金森病的出现与发展。