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目的:观察肿瘤坏死因子α（TNF-α）对肝X受体α（LXRα）启动子活性及其下游ATP结合盒转运蛋白（ABCA1和ABCG1）表达的影响,从而探讨TNF-α加速HepG2细胞内胆固醇积聚的分子机制。方法:构建LXRα基因的启动子表达载体,观察炎症因子TNF-α对LXRα启动子活性的影响,进一步将HepG2细胞分为对照组（control）、TNF-α组（20 μg/L）、高脂组（LDL,100 mg/L）及联合处理组（TNF-α 20 μg/L+ LDL 100 mg/L）。采用实时定量PCR和Western blotting检测LXRfα、ABCA1和 ABCG1的mRNA及蛋白的表达。［3H ］标记胆固醇,液体闪烁计数法检测胆固醇外流量。油红O染色和定量比色法分析细胞内胆固醇的含量。结果:成功构建LXRα启动子的萤火虫萤光素酶报告质粒,证明了该启动子有明显活性,TNF-α能明显抑制LXRα启动子的活性。进一步检测发现,和对照组相比,TNF-α下调了LXRα、ABCA1和ABCG1 mRNA与蛋白表达。高脂组胆固醇外流量增加,而TNF-α组胆固醇外流量明显降低。油红O染色显示,TNF-α使细胞内脂质染色明显增加。结论: TNF-α可通过抑制LXRα启动子活性从而抑制HepG2细胞内胆固醇外流导致肝细胞内脂质异常积聚。 相似文献
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目的 建立重庆地区婴幼儿和儿童血凝检查项目的参考区间,以更好地服务于临床.方法 采用Sysmex CS5100、Sysmex CSA2000全自动血凝分析仪检测重庆地区经健康筛查的5 119例儿童的凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、血浆纤维蛋白原(FIB)、凝血酶时间(TT)、血浆D-二聚体(D-D)血凝五项.将所有儿童根据年龄分为6组:新生儿(0～＜15 d)、新生儿(15 d至小于1个月)、婴儿(1～＜7个月)、幼儿(7个月至小于3岁)、儿童(3～＜7岁)、儿童(7～15岁)组,进行比较分析.正态分布的资料按照(x)±1.96s确定参考区间,偏态分布的资料按照P2.5～P975确定参考区间.结果 本室血凝五项参考区间,PT:11.1～20.2 s(0～＜15 d)、10.7～15.8 s(15 d至小于1个月)、9.9～13.5 s(1个月至15岁);APTT:28.8～91.6 s(0～＜15 d)、33.3～64.2 s(15d至小于1个月)、24.0～53.2 s(1～＜7个月)、21.2～39.2 s(7个月至15岁);FIB:1.45～3.52 g/L(0～＜3岁)、1.50～3.52 g/L(3～15岁);TT:15.4～26.3 s(0～＜15 d)、14.9～21.4 s(15 d至小于7个月)、14.7～20.1 s(7个月至小于3岁)、14.9～19.3 s(3～15岁);D-D:0.1～5.1 mg/L(0～＜15 d)、0.2～2.2 mg/L(15 d至小于1个月)、0.1～1.1 mg/L(1～＜7个月)、0.1～1.4 mg/L(7个月至小于3岁)、0.1～1.3 mg/L(3～＜7岁)、0～1.0 mg/L(7～15岁).结论 初步建立了重庆地区婴幼儿和儿童血凝五项(PT、APTT、FIB、TT、D-D)的参考区间,为该地区婴幼儿及儿童相关疾病的诊疗提供了更准确的依据. 相似文献
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