RGD肽联合转化生长因子-β1对组织工程瓣膜构建的影响

细胞对支架的黏附和生长是构建组织工程心脏瓣膜(tissue engineering heart valve,TEHV)的关键环节。去细胞瓣被认为是一种较理想的TEHV支架,本实验率先采用RGD肽(精-甘-天冬氨酸, Arg-Gly-Asp)表面修饰以促进细胞黏附,联合种     

转化生长因子-β1对天然支架组织工程瓣膜作用

构建组织工程心脏瓣膜（TEHV）关键在体外重建宏观、微观培养环境。我们以去细胞瓣作天然支架，肌成纤维细胞作种子细胞，观察转化生长因子（TGF）-β1对TEHV微环境影响。     

人重组促红细胞生成素预处理对缺血再灌注心肌血流动力学、心肌酶谱和超微结构的影响

目的研究人重组促红细胞生成素(rHuEPO)对离体缺血再灌注心脏的血流动力学、心肌酶谱和超微结构的影响.方法利用Langendorff离体心灌注模型平衡30 min,给予停搏液使心脏停跳90 min,再灌注60 min.16只Wistar大鼠(雌雄不拘)随机分为两组:对照组、rHuEPO预处理组.预处理组大鼠实验前24 h于腹腔给予rHuEPO 5 000 U/kg.观察两组再灌注后血流动力学指标、冠脉流出量、心肌酶谱(CK、LDH),电镜观察心肌超微结构.结果预处理组大鼠血流动力学、冠脉流出量及心肌酶谱改善情况显著优于对照组(P＜0.01);电镜示:预处理组大鼠心肌肿胀轻,线粒体及肌丝等超微结构损伤小.结论 rHuEPO预处理对离体心肌缺血再灌注损伤有良好保护作用,可望成为心外科极具应用前景的促进造血、心肌保护和脑保护的药物.     

转化生长因子-β1对体外构建组织工程瓣膜的实验研究

目的研究转化生长因子-β1(TGF-β1)在组织工程心脏瓣膜(TEHV)体外构建中的作用。方法经胰酶/EDTA、去污剂Triton X-100和核酸酶处理,去除猪主动脉瓣叶的细胞成分,然后在其表面种植大鼠肌成纤维细胞,构建TEHV。实验组培养基中添加TGF-β1(10ng/ml),对照组采用普通培养基。体外培养2周后取瓣叶,行HE染色和扫描电镜观察,并检测羟脯氨酸、DNA含量及瓣叶最大负荷力,应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测瓣膜细胞MMP-13和TIMP-1mRNA的表达。结果HE染色和扫描电镜显示实验组较对照组的细胞联合紧密且细胞外基质更丰富,羟脯氨酸含量和DNA含量增高,最大负荷力提高,MMP-13mRNA和TIMP-1mRNA的表达增强。结论TGF-β1在TEHV体外构建过程中具有积极作用,能为种子细胞生长提供有利因素,促进细胞增殖和细胞外基质分泌,提高瓣膜的最大负荷力。     

RGD肽联合转化生长因子-β对组织工程瓣膜构建的影响

细胞对支架的黏附和生长是构建组织工程心脏瓣膜（tissue engineering heart valve，TEHV）的关键环节。去细胞瓣被认为是一种较理想的TEHV支架，本实验率先采用RGD肽（精-甘-天冬氨酸，Arg-Gly-Asp）表面修饰以促进细胞黏附，联合种植转化生长因子-β1（TGF-β1）基因转染细胞以促进细胞及细胞外基质（ECM）增生，观察两种生物活性分子对去细胞瓣体外构建TEHV的影响。     

骨骼肌卫星细胞移植后心肌梗死区血管内皮因子表达及血管新生作用

目的:研究骨骼肌卫星细胞移植后心肌梗死(MI)区血管内皮因子(VEGF)表达及血管新生作用。方法:成年Louis近交系大鼠,结扎前降支建立急性MI模型,将骨骼肌卫星细胞移植到梗死区,2W后应用免疫组化方法鉴定梗死区VEGF的表达及新生血管密度。结果:骨骼肌卫星细胞在梗死区增殖、分化良好,梗死区VEGF表达移植组明显高于对照组(P<0.05),新生血管密度移植组也高于对照组(P<0.05)。结论:移植区卫星细胞可以分泌生长因子,促进血管形成,改善梗死区细胞的生存环境。     

转化生长因子-β_1基因转染构建组织工程瓣膜

目的:转化生长因子(TGF)-β1基因转染细胞,研究对天然支架组织工程瓣膜(TEHV)构建作用.方法:脂质体介导pcDNA3.0/TGF-β1基因载体进入大鼠肌成纤维细胞(MFB),48 h和4周后G418筛选法培养,SABC法检测TGF-β1表达.A组将转基因细胞种植去细胞猪主动脉瓣叶,B组种植未转基因细胞,C组单纯支架,体外培养2周构建TEHV.苏木精-伊红染色、扫描电镜观察,测定羟脯氨酸、DNA含量和最大负荷力.结果:基因转染48 h和4周,MFB瞬时和稳定表达TGF-β1蛋白.A组较B组细胞生长旺盛,胶原分泌较多,力学性能增强.结论:TGF-β1基因转染MFB作为种子细胞,能较好发挥TGF-β1活性,促进TEHV构建.     

对氧磷酯酶1与2型糖尿病并发冠心病相关因素分析

目的　分析对氧磷酯酶 1(PON1)的活性与 2型糖尿病各种相关因素 (血压、血脂、血糖、病程等 )的相互关系 ,研究PON1活性变化对 2型糖尿病并发冠心病的影响。方法　以对氧磷 (paraoxon)为底物 ,测定 4 9例对照组、10 3例2型糖尿病患者空腹血清PON1活性 ,同时测定各组血脂、血糖、血压、肝功能、肾功能等。结果　对照组血清PON1的活性明显高于 2型糖尿病组 ,差别有显著性意义 (P <0 0 1)。 2型糖尿病组TC、TG高于对照组 ,有显著性差异 (P <0 0 1)。 2型糖尿病并发冠心病组血清PON1活性低于 2型糖尿病无并发症组 (P <0 0 1)。 2型糖尿病并发冠心病组的TC、LDL高于无并发症组 (P <0 0 5 )。相关分析 :PON1活性与TC、LDL呈负相关 (P <0 0 1)。PON1活性与HDL呈正相关 (P <0 0 5 )。PON1活性与收缩压、舒张压均呈负相关 (P <0 0 5 )。TC、LDL、收缩压和PON1为 2型糖尿病并发冠心病的危险因素。对照组血清PON1活性为 10～ 70 8IU/L ,2型糖尿病组为 4～ 4 76IU/L。结论　血清PON1活性与2型糖尿病并发冠心病明显相关。PON1活性、收缩压、总胆固醇、LDL是 2型糖尿病并发冠心病的重要危险因素。     

精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸肽固定去细胞瓣构建组织工程瓣膜的实验研究

目的：研究促黏附分子精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸（RGD）肽对去细胞瓣组织工程心脏瓣膜（TEHV）构建的影响：方法：酶＋去污剂法制备去细胞瓣天然支架，应用化学交联剂Sulfo-LC-SPDP，使GRGDSPC肽与之稳定纳合，然后表面种植大鼠肌成纤维细胞以构建TEHV文验组采用GRGDSPC肽固定去细胞瓣，对照组则为未处理去细胞瓣．体外培养1周后取瓣叶，作苏木精-伊红（H-E）染色和扫描电镜观察，检测羟脯氨酸和DNA含量，逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测瓣膜Ⅰ型胶原、赖氨酰氧化酶（LOX）mRNA表达：结果：与对照组比较，实验组形态学显示细胞紧密联合且胞外基质丰富，羟脯氨酸和DNA含量值增高，Ⅰ型胶原、LOX mRNA表达增强：结论：RGD肽表面修饰去细胞瓣，提高天然支架细胞黏附性，促进种子细胞生长、繁殖与细胞外基质分泌，有利TEHV构建。