Immunoadjuvant action of liposomes for entrapped Japanese Encephalitis virus E－glucoprotein

ＩｍｍｕｎｏａｄｊｕｖａｎｔａｃｔｉｏｎｏｆｌｉｐｏｓｏｍｅｓｆｏｒｅｎｔｒａｐｐｅｄＪａｐａｎｅｓｅＥｎｃｅｐｈａｌｉｔｉｓｖｉｒｕｓＥ－ｇｌｕｃｏｐｒｏｔｅｉｎ￥ＨｕＪｕｎ（胡军）；ＭａＷｅｎｙｕ（马文煜）；ＨｕａｎｇＱｉｎｇｓｈｅｎｇ（黄庆生）...     

单克隆抗体治疗日本乙型脑炎病毒感染恒河猴的实验研究

用不同剂量的日本乙型脑炎病毒(JEV)SA14株鼠脑悬液从静脉、腹腔及皮下等不同途径感染6月龄4公斤左右JEV抗体阴性的恒河猴,发现用1ml1×10~8TCID_(50)病毒经皮下感染组的动物,发病比较规律、症状比较典型。感染后第6～8天体温突然升高至39℃以上,最高者可达41.5℃,兴奋性增高,腱反射亢进,并且日渐削瘦,第12天左右出现肢体痉挛性麻痹,肌张力增高;第20天后用呼吸及循环衰竭而死亡。但用1ml及0.5ml同一病毒悬液分别经腹腔及静脉途径感染的恒河猴,仅有发烧,而无其余症状。故治疗试验中选用皮下途径感染动物。     

PEG6000沉淀结合差速离心方法浓缩水中脊髓灰质炎病毒

建立一种简便,有效的从细菌培养物中纯化ＰＶ１病毒的方法用于水病毒消毒实验。方法ＰＶ１Ｈｅｎａｎ株在Ｈｅｐ－２细胞中增殖后用聚乙二醇６０００沉淀结合差速离心的方法纯化病毒,ＲＴ－ＰＣＲ和透射电镜鉴定提纯病毒的形态学和分子生物学特性。结论ＰＥＧ６０００结合差速离心的方法较之蔗糖密度梯度区带离方法易于操作且比单独ＰＥＧ沉淀有更高的纯化系数,是一种简便,有效的方法。     

酶联免疫吸附试验检测乙脑病毒抗原的研究Ⅰ实验方法的建立

采用ELISA双夹心法,通过对影响因素实验条件的研究,建立检测乙脑病毒抗原的方法。包被抗体(豚鼠抗乙脑病毒IgG)和第二抗体(兔抗乙脑病毒IgG),用提纯病毒免疫动物制备;以及稀释液中BSA含量提高为2％,显著地降低非特异性反应,并提高敏感性。特异性抑制试验,抗血清浓度越高OD值下降越多;两种乙脑病毒抗原分别与抗血清和正常血清中和后进行测定,阻抑百分率均>50％。敏感试验结果能测出≥5TCID_(50)组织培养病毒抗原和0.5ug/ml差速离心病毒抗原。     

从感染鼠脑浓缩提纯流行性乙型脑炎病毒的研究

本文用硫酸鱼精蛋白沉淀、差速离心、蔗糖线状梯度速率区带离心法从感染鼠脑中浓缩提纯JEV。鱼精蛋白最终浓度在5mg/ml、pH8.0时,一次可沉淀57％的杂蛋白,HA回收66％,感染性回收55％。再经差速离心及蔗糖梯度离心后,病毒区带蛋白含量0.5mg/ml,最终HA回收29％,感染性回收37％,因此提纯系数分别为138和175。在梯度柱的顶部发现有SHA,不具有感染性,其免疫学方面的特征尚待研究。     

乙型脑炎病毒单克隆抗体理化性质的初步观察

理化因素对多克隆抗体和抗人IgD6链单克隆抗体活性的影响已有报告(Ishizaka等J.Immunal 99:610 1967;王世中等:中华微生物和免疫学杂志2(4):258 1982),但对乙脑病毒单克隆抗体(JEV—MCAb)活性的影响至今未见报告,为了掌握JEV—MCAb生物学活性的规律,我们对本室(崔     

单克隆抗体治疗日本乙型脑炎病毒感染恒河猴的实验研究

约3岁4公斤左右,乙脑抗体阴性的恒河猴,皮下攻击1×10~(8.6)TCID_(50)的JEV 1ml,第4天起体温突然上升,第8天体温升至39.5℃以上,兴奋性增高,腱反射亢进,并且日渐消瘦,12天后出现肢体痉挛性麻痹,肌张力增高,20天后终因呼吸循环衰竭而死亡。感染猴体温升至39℃以上后的第2天,注射单克隆抗体制剂5mg,注射途径为:静脉、肌肉、硬膜     

用ELISA检测乙脑病毒抗原的研究Ⅱ双夹心改进法及其检测感染小鼠血液中病毒抗原

ELISA双夹心法在检测乙脑病毒抗原中将稀释液改为0.5％鸡血清PBS-T,并用5％鸡血清PBS—T置37℃水浴30min封闭抗体包被的微量板,代替2％BSA PBS—T稀释抗原,第二抗体及酶结合物进行封闭,并将各抗原抗体反应系统作用时间改为1h。改进后敏感性显著提高,检测时间(从微量板包被抗体后开始)由6h缩短为4h。感染小鼠的血浆接种细胞培养后,在细胞病变出现前、ELISA双夹心改进法即可检出病毒抗原。     

快速IgM抗体捕捉ELISA的建立及其在乙脑早期诊断中的初步应用

用辣根过氧化物酶标记的抗日本乙型脑炎病毒(JEV)种特异性单克隆抗体为结合物,建立了一种快速IgM抗体捕捉酶联免疫测定法(RMAC-ELISA),并初步用于乙脑的快速诊断,取得了良好的效果。该法的特点是:用2％的鞣酸预处理微板,提高反应温度至40℃,每次     

日本乙型脑炎病毒单克隆抗体的抗原结合位点及亲和力测定

本研究应用快速酶联免疫吸附试验双抗体夹心法(RDS-ELISA),对6株抗日本乙型脑炎病毒(JEV)单克隆抗体(单抗)的抗原结合位点及相亲和力进行了测定。通过ELISA相加试验证实,6株单抗识别5个不同的抗原位点。2H_4和2F_2的相加指数小于50％,表明二者识别相同的抗原位点,而其余单抗则具有不同的抗原位点。由本测定可知,JEV表面至少有5种不同的抗原决定簇。 从50％最大结合的单抗浓度分析可知,6株单抗的相对亲和力为nG_2>2H_4>2F_2>mG_9