Aegisy滤器置入后28d回收的安全性及可行性分析

<正>深静脉血栓形成(DVT)及其可能伴随发生的肺栓塞(PE)在临床死亡患者中是可以预防的,美国每年大约有500万人患DVT,约80%的PE由四肢静脉及盆腔静脉血栓脱落引起[1]。目前,经皮经静脉置入下腔静脉滤器(IVCF)成为预防PE发生的主要治疗方式。已有的商业滤器类型包括永久型滤器、临时滤器及可回收滤器,而应用永久型滤器其引起的并发症高达19%,包括下腔静脉血栓形成、下腔静脉闭塞     

缺氧条件下中介素和系膜细胞对内皮细胞血管生成的影响

目的探讨缺氧条件下,中介素(IMD)和肾小球系膜细胞(HMC)对内皮细胞的影响。方法内皮细胞分为4组:(1)内皮细胞与系膜细胞共培养,加IMD处理作为HEMI组;(2)内皮细胞与系膜细胞共培养,无处理作为HEM组;(3)内皮细胞加IMD处理作为HEI组;(4)内皮细胞无处理作为HE组;将各组细胞在1%O2、94%N2、5%CO2条件下缺氧培养12 h后,蛋白质印迹法(Western blot)、免疫细胞化学技术检测相关蛋白表达,实时定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测相关基因mRNA相对表达量,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血管内皮生长因子A(VEGFA)含量,体外血管形成实验检测内皮细胞的成管分支数。实验结果两组间比较采用t检验,多组间比较采用单因素方差分析。结果上皮型钙黏分子(VE-cadherin)表达量HEMI(1.629±0.197、1.557±0.066、10.552±0.523)高于HEM(1.116±0.118、1.340±0.161、8.128±0.542)、HEI(1.278±0.096、1.078±0.088、7.523±1.211)、HE组(1.000±0.000,F=0.734、1.244、6.134,P<0.05),差异有统计学意义;血小板内皮细胞黏附分子(PECAM-1/CD31)表达量HEMI(1.309±0.234、1.203±0.105、1.654±0.462)高于HEM(1.067±0.379、1.038±0.035、1.601±0.397)、HEI(1.225±0.091、1.101±0.038、1.605±0.207)、HE组(1.000±0.000),差异无统计学意义(F=5.083、5.434、6.428,P>0.05);VEGF表达量HEMI(0.904±0.005、1.922±0.457)高于HEM组(0.690±0.071、1.000±0.000,F=8.307、10.896,P<0.01),ELISA中加入IMD组(1.018±0.319)VEGFA浓度比值高于对照组(0.921±0.294,F=0.132,P<0.05),差异有统计学意义;体外血管形成中HEMI(22.289±0.131)、HEM(21.318±0.594)、HEI(21.533±0.867)、HE(20.755±1.798)高于NE组(18.731±0.525,F=5.926、0.030、1.033,P<0.05;F=6.753,P>0.05)。结论缺氧条件下,IMD可以直接或通过系膜细胞间接双重影响内皮细胞,促进血管形成。     

血管内皮生长因子及其受体在门静脉高压性胃病中的表达及其意义

目的 探讨血管内皮生长因子（VEGF）及其受体FLT-1、FLK-1mRNA在门静脉高压性胃病（PHG）中的作用。方法 采用逆转录聚合酶链反应（RT-PER）对44例肝硬化门静脉高压症患者PHG动态变化过程中病变部位的VEGF、FLT-1及FLK-1mRNA的表达进行检测。结果 轻度胃病组VEGF、FLT-1、FLK-1mRNA的表达量分别为（2．28±0．33）、（0．59±0．17）和（0.56±0．14），与无胃病组及正常对照组比较差异均有显著性（均P〈0．01）；重度胃病组VEGF、FLT-1、FLK-1mRNA分别为（3．48±1．02）、（0．68±0．20）和（0.71±0．18），与轻度胃病组、无胃病组及正常对照组比较差异均有显著性（均P〈0．01）。结论 VEGF及其受体FLT-1、FLK-1过度表达是胃病胃黏膜损害的重要因素之一。     

梗阻性黄疸患者肝脏免疫功能变化的临床研究

目的 :间接观察梗阻性黄疸患者肝脏枯否细胞功能的变化。方法 :采用测定梗阻性黄疸患者不同时期的肝功能、血浆内毒素值、肿瘤坏死因子 α(TNFα)及丙二醛 (MDA)的含量。结果 :梗阻性黄疸患者血中内毒素值明显高于对照组 ,TNFα及 MDA明显高于对照组 ,手术后内毒素水平较正常高 ,但无显著性意义 ,TNF及 MDA在一段时间维持一个高水平 ,而且 TNF及 MDA值越高 ,肝功能异常越明显 ,两者有相关性。结论 :血中 TNFα及 MDA含量可作为梗阻性黄疸患者肝脏枯否细胞功能变化的参数指标 ,为判定肝脏免疫功能及肝功能变化提供依据。     

抗人肝癌单克隆抗体嵌合Fab在巴氏毕赤酵母中的高效分泌表达

目的:通过分步整合,用巴氏毕赤酵母表达抗人肝癌单克隆抗体(mAb)HAb18的嵌合Fab(cFab)片段。方法:将抗人肝癌mAbcFab/HAb18基因的原核表达载体pET32a/cFab中的CL和Fd段基因,分别亚克隆到酵母表达载体pPIC9K和pPICZαA中,构建重组质粒pPIC9K/CL和pPICZαA/Fd并测序鉴定。将重组质粒pPIC9K/CL和pPICZαA/Fd分步整合到酵母菌GS115的染色体上,经G418和Zeocin筛选高拷贝的转化子及鉴定Mut表型后,用含5mL/L甲醇的培养基诱导表达。结果:成功地表达抗人肝癌mAbHAb18的cFab,表达水平为26mg/L。Westernblot鉴定证实,表达产物具有良好的与HAb18结合的活性和特异性。结论:cFab/HAb18在巴氏毕赤酵母获得表达,为对其进一步大规模的生产和临床应用奠定了基础。     

体外加压灌注对新西兰白兔慢性后肢动脉闭塞疾病侧支循环建立的影响

本实验拟运用新西兰白兔慢性后肢动脉闭塞疾病模型,探索体外加压灌注治疗,并检测对侧支血管生成密切相关的血管内皮生长因子（VEGF）因子表达的影响。1材料和方法1.1实验动物分组：新西兰白兔（体质量2～2.5 kg）雌雄不限,共16只（山西医科大学动物中心供应并饲养）,随机分为2组：①健康对照组8只（Ⅰ组）;②实验组8只（Ⅱ组）。     

转染CD147干扰质粒肝癌细胞7721的鉴定

目的构建CD147干扰质粒,对肝癌细胞7721内源性CD147表达的抑制效果进行检测。方法设计及构建3对pGenesil-1-CD147/shRNA及1对阴性对照干扰质粒,通过测序鉴定。将干扰质粒用Lipofec-tamineTM2000转染肝癌细胞,通过瞬时转染获得细胞系,实时PCR和蛋白印迹法检测3对干扰质粒、阴性对照质粒的mRNA及蛋白表达水平。结果实时PCR和蛋白印迹法结果显示干扰质粒pGenesil-1-CD147/shRNA3对肝癌细胞7721内CD147mRNA及蛋白的抑制效果最显著。结论成功构建了CD147干扰真核表达载体,筛选出有效干扰质粒,为进一步研究低表达CD147的肝癌细胞7721在肝癌发生发展中的机制提供基础。     

Lichtenstein无张力修补腹股沟疝个体化治疗123例疗效分析

目的:探讨Lichtenstein无张力疝修补术对腹股沟疝治疗的效果。方法:采用聚丙烯网片,应用Lichtenstein术式对2000年2月—2009年10月实施无张力疝修补术123例患者的临床资料进行回顾性总结。结果:123例成人疝及复发疝患者术后恢复快,术后平均1d即可下床活动,平均住院天数为5.1d,无术后并发症,随访1~3年无复发且疗效满意。结论:Lichtenstein无张力疝修补术操作简单,术后恢复快,并发症少,疗效肯定,是临床上值得推广的首选术式。     

缺氧条件下中介素和系膜细胞对内皮细胞血管生成的影响

目的探讨缺氧条件下,中介素(IMD)和肾小球系膜细胞(HMC)对内皮细胞的影响。方法内皮细胞分为4组:(1)内皮细胞与系膜细胞共培养,加IMD处理作为HEMI组;(2)内皮细胞与系膜细胞共培养,无处理作为HEM组;(3)内皮细胞加IMD处理作为HEI组;(4)内皮细胞无处理作为HE组;将各组细胞在1%O2、94%N2、5%CO2条件下缺氧培养12 h后,蛋白质印迹法(Western blot)、免疫细胞化学技术检测相关蛋白表达,实时定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测相关基因mRNA相对表达量,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血管内皮生长因子A(VEGFA)含量,体外血管形成实验检测内皮细胞的成管分支数。实验结果两组间比较采用t检验,多组间比较采用单因素方差分析。结果上皮型钙黏分子(VE-cadherin)表达量HEMI(1.629±0.197、1.557±0.066、10.552±0.523)高于HEM(1.116±0.118、1.340±0.161、8.128±0.542)、HEI(1.278±0.096、1.078±0.088、7.523±1.211)、HE组(1.000±0.000,F=0.734、1.244、6.134,P<0.05),差异有统计学意义;血小板内皮细胞黏附分子(PECAM-1/CD31)表达量HEMI(1.309±0.234、1.203±0.105、1.654±0.462)高于HEM(1.067±0.379、1.038±0.035、1.601±0.397)、HEI(1.225±0.091、1.101±0.038、1.605±0.207)、HE组(1.000±0.000),差异无统计学意义(F=5.083、5.434、6.428,P>0.05);VEGF表达量HEMI(0.904±0.005、1.922±0.457)高于HEM组(0.690±0.071、1.000±0.000,F=8.307、10.896,P<0.01),ELISA中加入IMD组(1.018±0.319)VEGFA浓度比值高于对照组(0.921±0.294,F=0.132,P<0.05),差异有统计学意义;体外血管形成中HEMI(22.289±0.131)、HEM(21.318±0.594)、HEI(21.533±0.867)、HE(20.755±1.798)高于NE组(18.731±0.525,F=5.926、0.030、1.033,P<0.05;F=6.753,P>0.05)。结论缺氧条件下,IMD可以直接或通过系膜细胞间接双重影响内皮细胞,促进血管形成。     

Aegisy型可回收性下腔静脉滤器的动物实验研究

目的探讨Aegisy型下腔静脉滤器（inferior vena cava filters,IVCF）放置于成年羊的下腔静脉后不同时点内滤器附着处静脉内膜增生情况,评估其临床应用的安全性及可回收时间。方法18只成年羊（体重23～51kg,平均39．6kg）随机分为A、B组,每组9只羊,每只羊置入1枚IVCF,按滤器留置时间分为2、3、4周组,每组3只。观察期满后造影观察滤器有无移位及血栓形成,A组滤器回收,B组为观察滤器附着处静脉内膜的增生情况而不回收滤器。所有羊无痛处死,取出置入滤器处下腔静脉段,行病理检查,评估滤器置入处下腔静脉内膜增生和损伤情况。结果18只羊成功置入滤器,滤器无移位及血栓形成。A组中2周组滤器均成功回收,3周组1只滤器回收成功,2只滤器未能回收,4周组滤器均未能回收。2组滤器未成功回收的病理结果显示：2周组新生内膜开始轻度增生,3周组新生内膜中度增生,4周组滤器周围有袖套样新生内膜显著增生。结论Aegisy滤器在置入羊体内后2周时滤器支撑丝和倒刺部位轻度内膜增生,可安全回收,对于Aegisy滤器在延长回收时间窗后能否安全的回收仍需要进行大量研究并准确评估。