重组腺相关病毒载体介导的人血管抑素对1型糖尿病大鼠肾脏TGF-β1和VEGF表达的影响

目的 尾静脉注射重组腺相关病毒载体介导的人血管抑素(rAAV-AS),研究rAAV-AS在1型糖尿病大鼠肾脏中表达以及其对转化生长因子(TGF-β)1和血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响.方法 清洁级SD雄性大鼠随机分为正常组(NC组,n=1 0),其余大鼠使用链脲佐菌素(STZ)60 mg/kg腹腔注射诱导糖尿病模型,分为糖尿病组(DM组,n=10),重组腺相关病毒空载体组(rAAV-0组,n=10),重组腺相关病毒载体介导的人血管抑素组(AS组,n=10,2×1012 VG/kg)；尾静脉注射给药,8 w末,检测各组大鼠尿微量白蛋白变化,免疫印迹法检测肾组织中AS的表达以及TGF-β1和VEGF的表达.结果 DN组基本不表达AS,给予rAAV-AS治疗后,大鼠肾组织中AS表达明显增多(P＜0.05)；DN组的MAU、Glu、HbA1c明显增高,给予rAAV-AS治疗后,MAU明显降低(P＜0.05)；光镜:与NC组大鼠相比,DN组病变较明显:肾小球细胞数显著增多,毛细血管袢塌陷,管腔闭塞,肾小球明显体积增大,肾小球基底膜增厚、淋巴细胞数量增多,肾小管肿胀、变性、空泡形成,肾间质可见大量淋巴细胞和单核巨噬细胞浸润.rAAV-0组较DN组未见改善,AS组上述病变较DN组有改善,可见肾小球细胞数教多,毛细血管腔轻度狭窄,肾小管-间质见少量淋巴细胞浸润.免疫组化结果:DN组的TGF-β1和VEGF表达明显增多,rAAV-AS治疗后,TGF-β1和VEGF表达减少(P＜0.05).结论 重组腺相关病毒载体介导的人血管抑素能在一定时间内在肾组织中表达；重组腺相关病毒载体介导的人血管抑素对大鼠糖尿病肾病具有保护作用,且这种保护作用可能通过降低TGF-β1和VEGF的表达.     

类风湿关节炎患者血清炎症因子与骨质疏松的关系

目的探索及分析类风湿关节炎患者的血清白细胞介素-34(IL-34)、类风湿因子(RF)、细胞核因子κB受体活化因子配体(RANKL)等指标水平变化,且观察其变化与骨质疏松的关系。方法收集2016年1月至2017年1月间该院接收的患类风湿关节炎的40例患者作为研究组,同时取同期于本院进行健康体检的40例健康人群作为对照组。通过酶联免疫吸附试验(ELISA)对2组对象的血清IL-34、RANKL水平进行检测,通过乳胶凝集法对2组对象的血清RF水平进行检测,同时常规检测患者的骨密度(BMD)、红细胞沉降率(ESR)、C反应蛋白(CRP)、抗CCP抗体,并经改良DAS28评分对类风湿关节炎的疾病活动度进行评估。结果研究组的血清IL-34、RF及RANKL等指标水平高于对照组,BMD低于对照组,且差异均具有统计学意义(P0.05);研究组的骨质疏松发生率大于对照组,差异具有统计学意义(P0.05);研究组中骨质疏松患者的IL-34、RF、RANKL水平高于骨量正常组,差异具有统计学意义(P0.05);经Spearman秩相关分析发现,研究组的血清IL-34水平与ESR、CRP、抗CCP抗体及DAS28评分等指标均呈正相关(P0.05),血清IL-34、RF及RANKL水平与BMD呈均呈负相关(P0.05)。结论类风湿关节炎患者的血清IL-34、RF、RANKL水平均有明显上升,且以上指标均与BMD呈负相关,提示可能IL-34协同参与了骨质疏松的出现。     

不同剂量的重组腺相关病毒载体介导的人血管抑素对糖尿病肾病大鼠肾功能的影响

目的探讨不同剂量的重组腺相关病毒载体介导的人血管抑素（recombinant adeno-associated viruscarrying human angiostatin gene,rAAV-AS）对糖尿病肾病（diabetic nephropathy,DN）大鼠肾功能的影响。方法60只清洁级雄性SD大鼠随机抽取10只作为正常对照组（NC组）,其余造模为糖尿病大鼠。大鼠空腹12 h腹腔注射链尿佐菌素（STZ）60 mg/kg,72 h后尾静脉测血糖大于16.7 mmol/L记为造模成功,适应性喂养1周后,把糖尿病大鼠随机分为DN组（n=10）,rAAV-0组（n=10）,AS1组（n=10,1×1012VG/kg）,AS2组（n=10,2×1012VG/kg）,AS3组（n=10,4×1012VG/kg）。AS1组、AS2组和AS3组3组大鼠尾静脉注射rAAV-AS,NC组和DN组分别注射同等剂量的生理盐水,rAAV-0组注射同等剂量rAAV-0空载体;从第2周起,整个实验过程共持续8周。8周后检测各组大鼠的体重（body weight,BW）、肾重（kidney weight,KW）,计算肾指数（kidney in-dex,KI）,检测血糖（blood glucose,BG）、糖化血红蛋白（hemoglobin A1c,HbA1c）、尿素氮（blood urea nitrogen,BUN）、血肌酐（serum creatinine,SCr）、尿微量白蛋白（miscroalbunminuria,MAU）。结果与NC组相比,DN、rAAV-0、AS1组的KI、MAU、BUN、SCr、BG、HbA1c明显增高（P〈0.05）;与DN组相比,AS2组和AS3组KI、MAU、BUN、SCr明显降低（P〈0.05）;与rAAV-0组相比,AS2组和AS3组KI、MAU、BUN、SCr降低（P〈0.05）;与AS1组相比,AS2组和AS3组KI、MAU、BUN、SCr降低（P〈0.05）。结论中等剂量和大剂量rAAV-AS对DN大鼠肾脏具有保护作用,且不依赖血糖降低而起作用。     

血管抑素对糖尿病肾病大鼠MMP-2和MMP-9表达的影响

目的 探讨腺相关病毒介导血管抑素基因(rAAV-AS)对糖尿病肾病(DN)大鼠肾皮质中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和-9(MMP-9)表达的影响.方法 采用链脲佐菌素(STZ)腹腔注射法建立糖尿病动物模型.SD大鼠随机分为对照组、糖尿病组、rAAV空载体组和rAAV-AS治疗组.第10周检测大鼠的微量白蛋白尿(MAU)及肾脏肥大指数、肾功能、血糖、糖化血红蛋白;免疫组化观察肾皮质内MMP-2、MMP-9,光镜观察病理变化.结果 治疗组肾皮质中MMP-2、MMP-9的表达高于糖尿病组,但都低于对照组,免疫组化有相应的改变.结论 rAAV-AS对DN大鼠肾脏具有保护作用,其可能机制与其上调大鼠肾皮质中MMP-2、MMP-9的表达,从而减少肾组织细胞外基质(ECM)的聚集有关.     

应用FRAX评价乳腺癌术后患者骨折风险的临床研究

目的应用骨折风险评估工具(fracture risk assessment tool,FRAX)评价乳腺癌术后患者骨折风险的临床研究。方法选取2017年3月至2019年8月在连云港市第一人民医院接受过手术治疗的Ⅰ期至Ⅲ期乳腺癌女性181例作为观察组,并选取181例年龄和身体质量指数匹配的非乳腺癌女性作为对照组,收集个人基本信息、骨折风险因素、股骨颈骨密度(bone mineral density,BMD)及治疗方式等资料,比较不同组间的骨折风险,并进行骨折风险与临床因素的回归分析。结果(1)乳腺癌术后患者10年内主要部位骨质疏松性骨折概率(probability of major osteoporotic fracture,PMOF)和10年内髋部骨折概率(probability of hip fracture,PHF)较对照组无显著增加(P=0.570、0.582);(2)PMOF在芳香化酶抑制剂组最高,他莫昔芬组最低(P<0.05)。芳香化酶抑制剂组的PHF显著高于单纯化疗组和他莫昔芬组(P<0.05);(3)回归分析显示,年龄、股骨颈BMD、骨折史、父母髋部骨折史和激素应用史对PMOF的影响具有统计学意义(P<0.05)。年龄、股骨颈BMD、骨折史对PHF的影响具有统计学意义(P<0.05)。结论应用FRAX工具评估乳腺癌术后患者的骨折风险尚需进一步研究。     

骨折风险评估工具(FRAX)对40岁以上2型糖尿病患者的骨折风险预测价值分析

目的 研究探讨骨折风险评估工具（fracture risk assessment tool,FRAX）对40岁以上2型糖尿病患者的骨折风险预测价值。方法 选择2016年1月至2017年12月就诊于我院的300例40岁以上2型糖尿病患者为研究对象,调查了解研究对象的基本信息,再对患者进行骨密度检查。将研究数据录入至FRAX问卷中,分别计算未录入股骨颈骨密度数据的髋部骨折风险系数（FRAX）和录入股骨颈骨密度数据后的髋部骨折风险系数（FRAX-BMD）,比较患者的FRAX与FRAX-BMD。将髋部骨折风险系数≥3%作为治疗切点,统计其治疗建议,以FRAX-BMD为参照,计算FRAX对髋部骨折治疗建议的灵敏度、特异度、准确率,分析其一致性,再将2型糖尿病患者分为治疗建议相同组、治疗建议不同组,比较治疗建议相同组与治疗建议不同组的临床资料。结果 2型糖尿病患者的FRAX与FRAX-BMD比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。以FRAX-BMD为参照,FRAX对2型糖尿病患者髋部骨折治疗建议的灵敏度、特异度、准确率分别为96.76%、96.23%、96.67%,而经一致性分析,FRAX与FRAX-BMD对2型糖尿病患者髋部骨折治疗建议的一致性良好（Kappa=0.835）。治疗建议相同组的年龄小于治疗建议不同组（P＜0.05）,其股骨颈骨密度高于治疗建议不同组（P＜0.05）,其男性患者多于治疗建议不同组（P＜0.05）。结论 在40岁以上2型糖尿病患者中,采用骨折风险评估工具对患者髋部骨折风险的预测准确性较高,尤其是年龄较小、骨密度值较大、男性等患者。