外周血单个核细胞内人类免疫缺陷病毒DNA和RNA定量对病毒转录活性的区分

目的基于人类免疫缺陷病毒Ⅰ型(HIV-1)感染者外周血单个核细胞(PBMCs)中HIV-1总DNA和RNA定量检测结果对感染细胞内病毒的转录活性进行区分。方法采集2017年10月至2018年12月于哈尔滨医科大学附属第四医院感染科就诊的HIV-1感染者血液样本,分离PBMCs细胞,采用PCR荧光探针法对PBMCs细胞内HIV-1总DNA和RNA进行定量检测,并计算两者比值(Ratio)。根据Ratio值筛选出HIV-1转录活跃组样本和相对非活跃组样本,另外选择健康人PBMCs样本作为对照组。对3组样本进行基因转录组表达谱检测以及人口特征差异性检验,并对基因表达谱检测结果进行主成分分析以验证对3组样本病毒转录活性区分的准确性。结果从60例感染HIV-1患者的PBMCs样本中筛选出HIV-1转录活跃组样本(10例)和相对非活跃组样本(11例),另外选择6例健康人PBMCs样本作为对照组。其中转录活跃组样本Ratio值为165.2~738.93,平均为(339.27±189.68);相对非活跃组Ratio值为4.67~42.39,平均为(17.65±11.78)。转录活跃组和相对非活跃组样本间的CD4+T细胞计数(P=0.049)和Ratio值(P<0.001)差异均具有统计学意义;3组样本年龄(P=0.989)和性别(P=0.650)分布差异无统计学意义。对3组样本的PBMCs基因表达谱主成分分析结果显示:对照组与HIV-1感染者(包括转录活跃组和相对非活跃组)间区分明显。转录活跃组和相对非活跃组间有部分样本重合,同时结果也显示当HIV-1感染者的CD4+T淋巴细胞计数与健康人无显著差异时,其细胞内的基因表达与健康人接近。结论基于HIV-1总DNA和RNA定量检测结果及两者间比值可以较好地区分PBMCs内病毒转录活性。HIV-1感染细胞内部病毒的不同转录激活状况可导致其基因表达谱的异质性。     

苦参碱对视网膜母细胞瘤细胞增殖与凋亡及PI3K/Akt信号通路的影响

目的:研究苦参碱对视网膜母细胞瘤(Rb)细胞增殖与凋亡及PI3K/Akt信号通路的影响。方法:将Rb细胞株Y79作传代培养,使用不同浓度(15、30、60、120mg/L)的苦参碱对细胞进行培养作为观察组,同时选择空白组作为对照组,采用噻唑蓝比色法(MTT)检测生长抑制情况,流式细胞术检测细胞凋亡情况,计算凋亡率,RT-PCR法检测PI3K、AktmRNA相对表达量,免疫组化法检测PI3K、Akt蛋白表达情况。结果:培养24小时、48小时、72小时后,观察组各组Y79细胞生长抑制率均高于对照组,并且随着时间与苦参碱浓度的增加,生长抑制率也在升高(P0.05);经过培养,观察组在G0/G1期的细胞比例高于对照组,处于S期和G2/M期细胞低于对照组(P0.05);相同时间内,随着苦参碱浓度的升高,细胞凋亡率明显升高,且高于对照组(P0.05)。相同浓度时,随着时间的增加,细胞凋亡率也升高,均高于同时期对照组(P0.05);观察组中各浓度条件下,PI3KmRNA、AktmRNA相对表达量均明显低于对照组(P0.05),并且随着浓度的升高,PI3KmRNA、AktmRNA相对表达量显著降低(P0.05);观察组中各浓度条件下,PI3K、Akt蛋白表达均低于对照组(P0.05),并且随着浓度的升高,PI3K、Akt蛋白表达也下降(P0.05)。结论:苦参碱能够明显抑制Rb细胞的增殖,促进细胞凋亡,可能是通过抑制PI3K/Akt信号通路,使细胞停留在G0/G1期,诱导细胞凋亡。     

南京SARS病人及疑似SARS患者T细胞亚群变化规律

自 2 0 0 3年 4月 2 8日至 5月 15日 ,南京市共收治 16例病人 ,按照卫生部 4月 14日颁布的《传染性非典型性肺炎临床诊断标准 (试行 )》 ,确诊SARS病人 2例 ,疑似 3例 ,排除 11例。 5例病人从发热至入院时间 1～ 9d ,平均 5 3d ,均无吸烟和基础疾病史。其中发热 5例 ,咳嗽 4例 ,胸闷气急 2例 ,头痛、肌肉酸痛、咳痰、畏寒各 1例 ,恶心呕吐伴腹泻 1例。肝功能ALT升高 2例 ,CK升高 2例 ,LD升高 2例 ,ESR升高 2例 ,CRP升高 2例。胸片异常 5例 ,其中 2例伴少量胸水。所有病人均予利巴韦林 ,日达仙 ,丙种球蛋白 ,抗菌药物 (阿奇霉素 ,帮…     

肿瘤坏死因子α与OLP癌变的关系

口腔扁平苔藓（OLP）是一种常见的口腔黏膜慢性炎症性疾病。其发病原因和病理机制至今尚未明确。肿瘤坏死因子α是介导自身免疫反应的重要效应因子，许多研究表明肿瘤坏死因子。在OLP的发生发展过程中起着至关重要的作用。本文从肿瘤坏死因子α与口腔扁平苔藓癌变的关系方面做一综述。     

原发性肝癌患者血清AFP和总胆汁酸的关系

目的：阐述原发性肝癌患者血清AFP和总胆汁酸的关系,为原发性肝癌的准确诊断提供临床资料。方法：回顾性分析126例确诊原发性肝癌患者,按照血清AFP浓度分为三组,分析各组间总胆汁酸升高率和升高均值差别。结果：AFP≥400μg/L组总胆汁酸升高均值明显低于20μg/L＜AFP＜400μg/L组和AFP≤20μg/L组。结论：总胆汁酸也是与AFP相关的因素之一,具体机制有待研究。     

不同血清AFP浓度原发性肝癌临床比较

目的：为更准确诊断较低血清AFP浓度原发性肝癌提供临床依据。资料与方法：根据血清AFP值，将纳入患者分为AFP较高组和AFP较低组，分析两组患者临床资料方面的差异。结果：较低浓度AFP组主诉腹痛的发生率、HBeAb阳性率、TBA升高均值明显高于后者；前者DBIL的升高率明显低于后者。结论：较低AFP浓度患者在临床上更多出现腹痛，其乙肝活动性可能较低，较少发生肝细胞损伤和（或）胆汁淤积，然而，一旦发生，程度可能更重。     

核酸原位杂交检测人淋巴结组织中的弓形虫

目的：探讨弓形虫感染的淋巴结组织中的病原体检测。方法：用聚合酶链反应（ＰＣＲ）和基因工程技术制备弓形虫（ＲＨ株）特异ＤＮＡ克隆片段，以地高辛随机引物法标记克隆的弓形虫ＤＮＡ片段作为探针，与淋巴结组织切片中核酸原位杂交试验（ＩＳＨ）检测病理标本中的弓形虫ＤＮＡ。结果：３２例何杰金淋巴瘤（ＨＤ）和４１例非何杰金淋巴瘤（ＮＨＬ）病理标本中各有一例阳性，４７例慢性淋巴结炎（ＣＬ）病理标本中呈ＩＳＨ阳性者２例，总阳性率为３．３％（４／１２０）。研究证明，所制备的探针能检测１０ｐｇ的ＤＮＡ，且特异性强。结论：核酸原位杂交为弓形虫病的病理标本中病原体检测提供了可行的方法。     

去除牙垫降低经口气管插管清醒患者非计划性拔管效果观察

目的观察去除牙垫对降低经口气管插管行机械通气清醒患者非计划性拔管的效果,以探讨去除牙垫的可行性。方法将100例经口气管插管行机械通气清醒患者随机分为两组,观察组采用去除牙垫固定气管插管,对照组采用常规放置牙垫方法,比较两组患者舒适度、口腔异味溃疡、非计划性拔管的发生。结果观察组舒适度明显优于对照组(P<0.01);置管期间对照组非计划性拔管发生6例,观察组无故意拔管发生,显著低于对照组(P<0.05);置管期间口腔异味及溃疡发生,明显低于对照组(P<0.01)。结论清醒患者采用去除牙垫固定方法能增加舒适度、降低口腔异味及溃疡发生、减少非计划性拔管发生。因此,去除牙垫在经口气管插管清醒患者中的应用是安全可行的。     

乙型、丙型和丁型肝炎病毒与肝细胞癌岛关系

采用 ELISA 法检测了140例肝癌患者的 HBV—M 和抗—HCV(其中38例检测了 HDV—M),并分别与56例非肝病患者和164例肝炎患者比较。结果肝癌病人中有91.2％检出 HBV—M 阳性,32.1％检出抗—HCV 阳性,HDV—M 无阳性检出。在抗—HCV 阳性的肝癌病人中,HBV—M 阳性率达95.6％。经X(?)检验分析,在 HCC 中,HBV—M、抗—HCV 和 HDV—M 的总体率两两之间均有极显著性差异。提示 HBV 与 HCC 关系最密切。HCV 次之,而 HDV 关系不明显。HCV 主要与 HBV 以重叠感染方式存在,因而推测 HCV 单独致癌的可能性不太,主要是通过调节和协同 HBV 而起促癌作用。