多肿瘤组织芯片在评价肿瘤细胞增殖与凋亡状态研究中的作用

目的 :研究多种常见肿瘤组织芯片在观察癌细胞增殖和凋亡中的作用。方法 :在病理档案材料中选取 10种常见恶性肿瘤及其癌旁或正常组织的石蜡包埋标本 ,HE染色切片定位穿刺部位 ,每一蜡块穿取直径 0 6mm大小组织柱 ,排布成 196点列阵的芯片 ;用ki 67、p5 3、rasp2 1、bcl 2和bax单抗SP法进行免疫组化染色 ,对各切片阳性细胞进行计数观察。结果 :组织芯片经染色后结构完整 ,在肿瘤组织中ki 67、p5 3和rasp2 1标记的阳性细胞比癌旁和正常组织明显增高 ;而大多数肿瘤中bcl 2和bax表达呈负相关 ,即bcl 2阴性或低表达者 ,则bax呈不同程度阳性表达 ,反之则相反。结论 :组织芯片技术可以同时用于评价多种不同类型肿瘤样本的增殖活性和凋亡状态 ,为临床预后判断提供资料     

利用组织芯片技术观察p53及其同系物p63在恶性肿瘤中的表达

目的探讨p53和p63在部分肿瘤发生中的作用,为其人群大规模筛查、早期诊断及预后评估提供依据。方法选取病理科档案材料中食管鳞癌、胃腺癌、大肠腺癌、膀胱移行细胞癌、肺癌、肝细胞性癌、乳腺浸润导管癌、肾透明细胞癌、卵巢腺样囊腺癌和胰腺癌石蜡包埋组织各6例及相应正常组织各3例。肿瘤标本先观察苏木精-伊红(HE)切片以确定肿瘤部位,采用组织芯片仪及手工法制作180点列阵组织芯片,进行p53和p63抗体免疫组化染色。光镜观察p53、p63阳性细胞在各组的分布,并进行对比分析。结果p53表达类型:(1)正常组织p53阳性细胞数很少;(2)3例食管癌、3例胃癌、2例大肠癌、1例肺癌、1例乳腺癌、2例卵巢癌的绝大多数肿瘤细胞呈强阳性核染色反应,癌旁组织细胞和间质细胞阴性,1例膀胱癌中有少量阳性肿瘤细胞散在分布于阴性肿瘤细胞中。p63表达类型:(1)正常食道复层扁平上皮基底层细胞呈核染色,p63阳性细胞散在分布于棘细胞层;(2)6例食道癌、6例膀胱癌和4例肺鳞癌均为强阳性反应,大多数肿瘤细胞呈强核染色,癌旁组织细胞和间质细胞p63阴性;两例肺腺癌p63阴性;(3)6例胃癌中的4例、6例大肠癌中的3例、6例乳腺浸润导管癌中的2例、6例肝细胞性癌中的1例可见较强的肿瘤细胞胞质染色。其中3例食管癌、3例胃癌、1例大肠癌、1例肺     

老年性痴呆相关基因研究进展

老年性痴呆(Alzheimer disease,AD)的病因十分复杂,涉及神经生化、细胞因子、分子病理和分子遗传各方面。分子遗传研究发现多个基因与AD相关。目前较为确定的相关基因有四个:21号染色体上的APP基因,19号染色体上的APOE基因,14号染色体上的PS1基因及1号染色体上的PS2基因。其中在早发性AD家系中发现APP、PS1和PS2基因突变,呈显性常染色体遗传模式,3个基因的突     

多囊卵巢综合征患者心理状态的调查

目的 探讨多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)患者的心理状态,以便给予针对性的护理.方法 选取2009年11月至2010年11月在解放军第306医院生殖医学中心被确诊为PCOS的不孕症患者75例,采用Derogatis编制的症状自评量表(symptom check list 9...     

应用噬菌体随机肽库研究人肺癌相关抗原表位

目的：从噬菌体随多肽文库中筛选肺癌相关抗原WLA-Ag1表位,深入了解抗原特性,为探索肺癌临床诊断、治疗新方法打下基础。方法：采用肺癌单克隆抗体WLA2C4对噬菌体完全随机十五肽表达文库进行多级同源性及氨基酸分析,结果：12个克隆均为阳性克隆,DNA序列相同。为5′-GCTGGTTGGATTＡＣＴTTT CAT CGT CGT CAT CAT GATＣＧＴ ＧＴＴ ＣＴＴ－3′,其氨基酸序列为ＡＧＷＩＴＰＨＲＲＨＨＤＲＶＬ,氨基酸分析,其中有３个胰蛋白酶酶切位点,与ＷＬＡ－Ａg１抗原能被胰蛋白酶消化的特性相一致。结论：应用肺癌对肿瘤相关抗原表位的筛选具有可行性。     

利用组织芯片技术观察p53及其同系物p63在恶性肿瘤中的表达

目的 探讨p53和p63在部分肿瘤发生中的作用，为其人群大规模筛查、早期诊断及预后评估提供依据。方法 选取病理科档案材料中食管鳞癌、胃腺癌、大肠腺癌、膀胱移行细胞癌、肺癌、肝细胞性癌、乳腺浸润导管癌、肾透明细胞癌、卵巢腺样囊腺癌和胰腺癌石蜡包埋组织各6例及相应正常组织各3例。肿瘤标本先观察苏木精—伊红(HE)切片以确定肿瘤部位，采用组织芯片仪及手工法制作180点列阵组织芯片，进行p53和p63抗体免疫组化染色。光镜观察p53、p63阳性细胞在各组的分布，并进行对比分析。结果 p53表达类型：(1)正常组织p53阳性细胞数很少；(2)3例食管癌、3例胃癌、2例大肠癌、1例肺癌、1例乳腺癌、2例卵巢癌的绝大多数肿瘤细胞呈强阳性棱染色反应，癌旁组织细胞和间质细胞阴性，1例膀胱癌中有少量阳性肿瘤细胞散在分布于阴性肿瘤细胞中。p63表达类型：(1)正常食道复层扁平上皮基底层细胞呈棱染色，p63阳性细胞散在分布于棘细胞层；(2)6例食道癌、6例膀胱癌和4例肺鳞癌均为强阳性反应，大多数肿瘤细胞呈强棱染色，癌旁组织细胞和间质细胞p63阴性；两例肺腺癌p63阴性；(3)6例胃癌中的4例、6例大肠癌中的3例、6例乳腺浸润导管癌中的2例、6例肝细胞性癌中的1例可见较强的肿瘤细胞胞质染色。其中3例食管癌、3例胃癌、1例大肠癌、1例肺癌、1例乳腺癌的肿瘤细胞同时呈p53和p63阳性反应。结论 p53在正常组织中表达量很少，在多种肿瘤细胞中表达量升高；p63阳性细胞主要位于正常上皮组织的增殖区，而在多种癌细胞中表达增强，两者在肿瘤细胞中不同的分布情况提示其在肿瘤的发生发展中作用途径不同。     

肺癌石蜡包埋组织及新鲜标本组织芯片制备方法学探讨

目的：探讨和建立石蜡包埋组织和新鲜冷冻标本制备组织芯片的方法，以及在基因表达分析中的应用。方法：选取肺癌石蜡包埋组织90例，新鲜液氮冻存肺癌及癌旁组织20例，常规切片HE染色下确定穿刺部位，石蜡包埋组织芯片制作按Kononem等方法（1998），每例穿取0.6mm组织柱2条，制备180点阵组织芯片；而新鲜组织芯片参考Fejzo等方法（2001），并略作改良，制备50点阵组织芯片。所有组织芯片模块，经4цm切片、常规组织学染色和免疫组化染色，以评价其在形态学及基因表达分析中应用的可行性。结果：180点阵石蜡包埋肺癌组织芯片，组织排列整齐，HE染色后组织形态可观察率在98%以上；p53、c-myc、bcl-2、bax和Ki-67等免疫组化染色后，肺癌组织可见不同程度的抗原表达，组织点阵的形态可观测率在89%-95%之间。新鲜组织芯片经HE染色后，形态可观测率和基因表达可分析率在70%左右。结论：手工法组织芯片制备简便易行，使用组织少，不破坏原蜡块；实验均一性、可比性好，且节省试剂。与常规组织切片相比，2点0.6mm组织可以获得原蜡块95%以上的信息，完全可以用于组织形态学和蛋白水平上的基因表达分析；新鲜组织芯片技术已经初步建立，但尚有待于进一步完善制备技术和mRNA分析方法。     

IL-11对中子辐射小鼠肠道损伤保护作用的定量病理研究

目的定量研究IL-11对中子照射后小鼠肠道损伤的保护作用。方法4.0 Gy中子全身照射136只BALB/C二级小鼠,于照前和照后注射600μg/kg的rhIL-11(每日1次,连用3 d),并于照后6 h、1 d、2 d和5 d活杀取材,采用光镜和图像分析技术研究IL-11对中子照射后肠道病理形态、肠绒毛高度和隐窝细胞数的影响。结果4.0 Gy中子照射后,肠隐窝细胞核肿胀、浓缩及核碎片形成,再生微弱;照前和照后给予IL-11,肠绒毛高度增加、绒毛上皮和隐窝数量增多,有较多新生的肠隐窝,与单纯照射组比较,差异显著(p<0.05或0.01)。结论应用IL-11可减轻中子辐射肠道损伤的程度,增加存活隐窝细胞数量和绒毛高度,并促进其再生,有利于肠粘膜恢复。     

多肿瘤组织芯片在评价肿瘤细胞增殖与凋亡状态研究中的作用

目的：研究多种常见肿瘤组织芯片在观察癌细胞增殖和凋亡中的作用。方法：在病理档案材料中选取10种常见恶性肿瘤及其癌旁或正常组织的石蜡包埋标本，HE染色切片定位穿刺部位，每一蜡块穿取直径0．6mm大小组织柱，排布成196点列阵的芯片；用ki-67、p53、rasp21、bcl-2和bax单抗SP法进行免疫组化染色，对各切片阳性细胞进行计数观察。结果：组织芯片经染色后结构完整，在肿瘤组织中ki-67、p53和rasp21标记的阳性细胞比癌旁和正常组织明显增高；而大多数肿瘤中bcl-2和bax表达呈负相关，即bcl-2阴性或低表达者，则bax呈不同程度阳性表达，反之则相反。结论：组织芯片技术可以同时用于评价多种不同类型肿瘤样本的增殖活性和凋亡状态，为临床预后判断提供资料。