简易肾癌及膀胱癌原位肿瘤模型的建立与应用研究

目的：建立一种操作简单、稳定可靠的肾癌及膀胱癌原位癌模型,并运用于抗癌药效评价工作。方法将人肾癌肿瘤组织块穿刺接种到肾实质组织中,建立肾癌原位肿瘤模型;用留置针机械摩擦损伤膀胱黏膜,人膀胱癌细胞悬液暴露法建立膀胱癌原位肿瘤模型。通过小动物B超和荷瘤组织的HE染色确定模型建立的可靠性,并采用该模型对硝羟喹啉（ nitroxoline,NTX）的体内抗肿瘤药效进行初步药效评价。结果术后2周通过B超可见肿瘤发生;组织病理HE染色显示肾癌原位模型肿瘤呈现浸润性生长,膀胱癌模型可见明显突向膀胱腔的癌组织团块。 NTX体内药效评价中,60 mg／kg NTX对肾癌原位肿瘤抑制率为57．5％,30 mg／kg NTX对膀胱癌原位肿瘤抑制率为48．8％。结论利用上述方法建立的肾癌及膀胱癌原位肿瘤模型简单、实用,是评价治疗肾癌和膀胱癌抗癌药物的可靠方法。     

SM－1通过激活前胱天蛋白酶－3诱导人胃腺癌BGC－823细胞凋亡发挥抗肿瘤作用

目的：探讨前胱天蛋白酶（ procaspase）－3激活剂SM－1体内外对人胃癌BGC－823细胞的抗肿瘤作用及初步机制。方法体外MTT法测定SM－1对BGC－823细胞增殖的抑制作用,流式细胞仪分析不同浓度SM－1对BGC－823细胞凋亡率的影响,分别用Western印迹和RT－PCR测定SM－1对胱天蛋白酶（ caspase）－3蛋白和procaspase－3 mRNA表达的影响,采用裸鼠皮下移植瘤模型评价SM－1体内抗肿瘤作用。结果 SM－1体外呈剂量依赖性地抑制BGC－823细胞增殖并诱导其凋亡;SM－1暴露48 h 后, caspase－3蛋白和 procaspase－3 mRNA 表达水平增加;在300 mg／kg剂量下,SM－1对BGC－823皮下移植瘤生长具有明显的抑制作用,其抑制率达到56．3％（ P＜0．05）。结论 SM－1体内外对BGC－823细胞及皮下移植瘤具有较好的抑制作用,其机制主要通过激活procaspase－3诱导肿瘤细胞凋亡发挥抗肿瘤作用。     

小鼠术后残瘤模型的建立及T肽抑制术后残瘤生长的初步研究

目的模拟临床实际情况,建立一种抗癌免疫增强剂药效学评价模型-小鼠移植瘤术后残瘤模型,并初步探讨T肽抑制术后残瘤生长的体内药效学作用。方法选择S180、H22等鼠源肿瘤细胞株,建立了小鼠移植瘤术后残瘤模型,观察比较手术后残余肿瘤和未手术肿瘤的生长状况;研究T肽抑制小鼠移植瘤术后残余肿瘤生长的体内药效学作用。结果手术后小鼠残瘤的生长速度快于小鼠未手术肿瘤。T肽对小鼠S180和H22移植瘤术后残瘤生长有明显的抑制作用;在给药剂量为8mg/kg时可以明显抑制小鼠移植瘤术后残瘤的生长,最高抑瘤率大于80%,量效关系明显;未见明显的毒性反应,抗癌疗效接近阳性药环磷酰胺。结论术后残瘤药效学评价模型的建立为抗癌免疫增强剂的筛选提供了更可靠的选择。     

人急性早幼粒细胞白血病小鼠模型的建立

目的:探索稳定、可靠且重复性较好的人急性早幼粒细胞白血病Nod/SCID小鼠模型的建立方法,并观察模型的病程特点.方法:Nod/SCID小鼠经60Coγ射线照射,照后第5天,外周血白细胞降至较低水平,此时尾静脉注射接种HL60细胞.通过流式细胞计数分析外周血中HL60细胞比例,以观察白血病细胞在外周血中分布变化;日常观察小鼠身体浅表部位实体瘤的形成及生长;并应用组织病理学方法确认组织脏器中肿瘤播散状况.结果:接种第7天,Nod/SCID小鼠外周血中可检测到HL60细胞;接种30 d左右,可观察到小鼠出现全身播散的实体瘤;40 d左右,动物体质状况显著衰退,小鼠陆续死亡.小鼠的造血系统及非造血系统的组织及脏器均出现肿瘤的浸润.重复实验结果一致.结论:Nod/SCID小鼠经60 Co γ射线照射后第5天,尾静脉注射接种HL60细胞,小鼠的病程可控制在40 d左右,且该模型符合临床疾病发展规律,可应用于骨髓毒性较低的受试药物的药效筛选及评价.     

促吞噬肽衍生物T肽抑制小鼠移植瘤和术后残瘤生长的药效学研究

目的研究免疫增强剂促吞噬肽（tuftsin）衍生物T肽对小鼠皮下移植瘤以及移植瘤术后残瘤生长的抑制作用。方法建立S180肉瘤、B16-BL6黑色素瘤小鼠皮下移植瘤模型以及S180肉瘤、Lewis肺癌术后残瘤模型,观察T肽给药后肿瘤的生长情况,研究T肽的抗癌作用。结果 T肽对S180肉瘤皮下移植瘤有一定的抑制效果,按照肿瘤体积得出的抑制率范围为37.0%～48.1%,按照瘤重得出的抑制率范围为12.1%～40.9%;对B16-BL6黑色素瘤小鼠皮下移植瘤的生长基本没有抑制作用。对小鼠术后残瘤生长T肽表现出良好的抑制效果,按照肿瘤体积得出的抑制率范围为59.9%～78.8%,按照瘤重得出的抑制率为64.4%～79.6%,对小鼠未观察到毒副作用。结论 T肽明显抑制小鼠术后残瘤的生长,毒副作用小,预示着T肽有潜力成为防治术后残瘤生长和转移的抗癌新药。     

埃坡霉素B对A549人肺腺癌细胞的体内外抗肿瘤药效学研究

目的:观察埃坡霉素B在体内外对A549人肺腺癌细胞生长的抑制作用。方法:用MTT法观察埃坡霉素B体外作用72h对A549人肺腺癌细胞增殖的抑制作用;用A549人肺腺癌裸鼠移植瘤模型评价埃坡霉素B在1.0、0.5、0.25mg/kg剂量下,给药2~3次后的体内抗肿瘤活性。结果:实验结果显示,埃坡霉素B在体外对人肺腺癌细胞A549抑制作用的IC50为(0.53±0.11)nmol/L,实际检测的最大抑制率为68.6%。体内实验表明受试物对A549人肺腺癌裸鼠移植瘤具有较强的抑制作用,并呈现出良好的剂量依赖性。给予1.0、0.5、0.25mg/kg受试物,第一次实验,其对A549裸鼠移植瘤的抑制率分别为78.6%、58.8%和48.3%;第二次实验,其对A549裸鼠移植瘤的抑制率分别为84.2%、76%和68.2%。阳性药物紫杉醇15mg/kg多次给药的抑瘤率分别为56.0%和85.7%。结论:埃坡霉素B在体内外对A549人肺腺癌具有较强的抑制作用。     

促吞噬肽衍生物T肽抑制小鼠移植瘤和术后残瘤生长的药效学研究

目的研究免疫增强剂促吞噬肽(tuftsin)衍生物T肽对小鼠皮下移植瘤以及移植瘤术后残瘤生长的抑制作用。方法建立S180肉瘤、B16-BL6黑色素瘤小鼠皮下移植瘤模型以及S180肉瘤、Lewis肺癌术后残瘤模型,观察T肽给药后肿瘤的生长情况,研究T肽的抗癌作用。结果 T肽对S180肉瘤皮下移植瘤有一定的抑制效果,按照肿瘤体积得出的抑制率范围为37.0%～48.1%,按照瘤重得出的抑制率范围为12.1%～40.9%;对B16-BL6黑色素瘤小鼠皮下移植瘤的生长基本没有抑制作用。对小鼠术后残瘤生长T肽表现出良好的抑制效果,按照肿瘤体积得出的抑制率范围为59.9%～78.8%,按照瘤重得出的抑制率为64.4%～79.6%,对小鼠未观察到毒副作用。结论 T肽明显抑制小鼠术后残瘤的生长,毒副作用小,预示着T肽有潜力成为防治术后残瘤生长和转移的抗癌新药。     

干细胞样U87胶质瘤细胞向内皮细胞转分化及VEGFR2人源化单克隆抗体的干预作用

目的建立干细胞样U87胶质瘤细胞向内皮细胞的转分化模型,初步评价抗VEGFR2人源化单克隆抗体对转分化的影响。方法体外诱导培养获得干细胞样U87胶质瘤细胞;流式细胞仪检测CD133+细胞含量;定量PCR检测CD133、Nestin以及VEGFR2表达;观察干细胞样U87细胞的致瘤能力、肿瘤生长速度和CD31表达情况;观察干细胞样U87细胞在Matrigel上血管状结构形成和CD31、CD34、vW F表达情况;建立干细胞样U87细胞向内皮细胞的转分化模型,评价抗VEGFR2人源单抗对转分化的抑制作用。结果获得干细胞球样的U87细胞,其肿瘤生长更快,且血管增多,接种在Matrigel上形成血管状结构,CD31、CD34、vW F表达增加;抗VEGFR2人源单抗使血管状结构和CD31、CD34、vW F表达均减少。结论成功建立干细胞样U8细胞向内皮细胞转分化模型,VEGFR2人源化单抗对转分化有抑制作用。     

人血管内皮抑制肽抑制小鼠及裸鼠移植瘤术后残瘤生长的药效学研究

 目的 初步探讨人血管内皮抑制肽在小鼠/裸鼠移植瘤术后残瘤模型中的抗癌药效学作用。方法 建立S180肉瘤昆明小鼠手术后残瘤和人结肠癌Lovo裸鼠手术后残瘤模型,评价人血管内皮抑制肽对小鼠手术后残瘤的抑制效应,选择恩度（重组人血管内皮抑素）作为阳性对照药。结果 人血管内皮抑制肽给药组对S180肉瘤昆明小鼠手术后残瘤生长产生较强的抑制作用,按照肿瘤体积得出的抑制率范围为 16.9%~43.9%,按照瘤重得出的抑制率范围为21.2%~45.5%;人血管内皮抑制肽给药组对人结肠癌Lovo裸鼠手术后残瘤生长产生较强的抑制作用,按照肿瘤体积得出的抑制率范围为42.0%~70.3%,按照瘤重得出的抑制率范围为45.5%~73.8%。结论 人血管内皮抑制肽对小鼠/裸鼠手术后残瘤的生长具有较强的抑制作用,为人血管内皮抑制肽开发和临床应用奠定了基础。