miR-25对缺氧/复氧诱导的H9c2细胞凋亡的作用

目的:探讨微小RNA-25(miR-25)在缺氧/复氧诱导的H9c2细胞凋亡过程中的作用及机制。方法:构建miR-25高表达H9c2细胞系,行缺氧/复氧损伤处理,real-time PCR检测miR-25及高迁移率族蛋白B1(HMGB1)mRNA的表达,Western blot检测HMGB1及细胞凋亡相关蛋白Bcl-2和cleaved caspase-3的蛋白表达水平,流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期的变化,明确miR-25的高表达对缺氧/复氧所诱导的H9c2细胞凋亡及HMGB1表达的影响。然后通过双萤光素酶报告基因验证miR-25与HMGB1的靶向关系,并构建转染HMGB1 shRNA的H9c2稳定细胞系,行缺氧/复氧损伤处理,验证HMGB1是否参与缺氧/复氧诱导的H9c2细胞凋亡的调控。结果:与对照组相比,高表达miR-25组的H9c2细胞在缺氧/复氧诱导后HMGB1表达下调,Bcl-2表达上调,cleaved caspase-3蛋白水平下调,流式细胞术提示处于S期的细胞增多,G1期减少(P0.01)。双萤光素报告基因显示,转染miR-25 mimic+野生型HMGB1-3’UTR报告基因载体组萤光素酶活性明显下降;转染miR-25 inhibitor+野生型HMGB1-3’UTR和转染miR-25 mimic+突变型HMGB1-3’UTR报告基因载体组萤光素酶活性没有变化。转染HMGB1-shRNA的H9c2细胞中抗凋亡蛋白Bcl-2表达上调,凋亡蛋白cleaved caspase-3蛋白水平下调,流式细胞术分析提示细胞凋亡减少,处于S期的细胞增多,G1期减少(P0.05)。结论:miR-25减少缺氧/复氧诱导的H9c2细胞凋亡,期作用机制可能与靶向调控HMGB1表达有关。     

消融过程中新发的舒张期电位在室性期前收缩射频消融中的作用

目的:分析消融靶点心腔内电图及新发的舒张期电位(NEDP),评估NEDP在室性期前收缩成功消融中的作用。方法:回顾性分析47例起源于心室流出道室性期前收缩的患者,分析消融过程靶点电图,探讨NEDP的振幅、持续时间及消融后的反应。结果:47例流出道室性期前收缩患者行射频消融治疗,手术成功44例(93.6%)。11例(25.0%)患者消融过程中出现NEDP,其中7例患者舒张期电位引出室性期前收缩,领先体表心电图QRS波(63±8) ms。11例患者在NEDP附近消融,射频消融术均成功。成功消融后,3例(27.2%)患者舒张期电位振幅下降,8例(72.8%)患者舒张期电位消失。结论:25.0%的流出道室性期前收缩患者消融过程中能记录到NEDP,该电位可能表示缓慢传导区域,对室性期前收缩成功消融具有指导意义。     

乳鼠窦房结细胞的原代培养和形态学特征

目的比较差速贴壁技术和常规培养方法在体外获取窦房结自律细胞的密度,并观察其形态学特征。旨在建立可靠的窦房结自律细胞体外取材分离、纯化培养及形态学鉴定。方法取24 h内新生Wistar乳鼠1 20只,随机分为实验组(差速贴壁技术培养方法)和对照组(常规培养方法),每组60只。每次随机各取5只乳鼠行窦房结取材,分别用2种方法进行原代细胞纯化培养。通过光、电镜观察比较2种方法体外窦房结自律细胞的密度比及形态学特征。结果体外培养窦房结细胞有3种不同形态,梭形细胞、三角形细胞和不规则形细胞,其中梭形细胞最多,搏动频率最快;三角形细胞与心房肌三角形细胞特征相似;实验组窦房结梭形细胞比例明显高于对照组[(65±4)%vs(45±3)%,P<0.01]。结论采用差速贴壁技术纯化培养方法较常规培养可更明显提高窦房结梭形细胞的比例,是一种可靠的窦房结自律细胞培养、纯化技术。在培养的乳鼠窦房结细胞中,细胞体积小、搏动频率快的梭形细胞即是窦房结的起搏细胞。     

乳鼠窦房结细胞原代培养与纯化方法的探讨

目的:探讨乳鼠窦房结细胞的原代培养与纯化方法,观察细胞的生长状况,分析窦房结细胞的自律性及形态结构特征.方法:取SD乳鼠96只随机分为试验组和对照组,每组各48只,每次试验各取6只乳鼠窦房结组织,分别用前述两种方法进行细胞培养观察和比较两个培养组中各种细胞的数量及生长状况,以细胞的搏动频率评价细胞的活性,以梭形细胞的数量评价窦房结细胞的纯度.结果:(1)试验组明显减少了酶与细胞的接触时间和离心时间;简化了操作环节,优化了细胞的培养环境,可提高细胞的活性;(2)经过差速贴壁、阿糖胞苷处理,可明显减少不规则细胞的数量,窦房结细胞的数量明显上升(P＜0.01).结论:试验组纯化培养法是一种较为可行的乳鼠窦房结细胞原代培养方法,可为进一步研究提供高纯度、高活力的窦房结细胞.     

心外膜窦房结电图指导窦房结细胞取材的价值

目的探索经心外膜窦房结电图指导窦房结细胞取材的准确性。方法长白山乳猪12只,行心外膜窦房结电图标测,A波前出现圆顶形或上斜形波形为窦房结电图,又称为"P前波",于"P前波"处取材行窦房结细胞培养及超极化激活环核苷酸门控阳离子通道(HCN4)免疫荧光定量测定。结果窦房结电图指导下窦房结细胞取材,培养的细胞有3种形态,即梭形、三角形与不规则形。培养梭形细胞较多,搏动频率较快;同时免疫荧光证实HCN4通道蛋白密度较高。结论窦房结电图提高窦房结细胞的取材的准确性。     

心电监护下行床旁临时起搏器安置术316例分析

临床上各种原因所致房室传导阻滞、显著心动过缓、长QT间期并发尖端扭转性室速、心脏骤停等急危症或外科手术中保驾时多需要立刻植入临时心脏起搏器维持基本心率,下面旨在讨论床旁心电监护下植入临时起搏器的安全性及有效性。     

盐酸替罗非班治疗急性冠脉综合征疗效分析

目的:观察替罗非班治疗急性冠脉综合征的临床效果和安全性。方法:符合急性冠脉综合征入选标准患者196例,随机分为治疗组(n=108)和对照组(n=105),对照组给予阿司匹林、氯比格雷及低分子肝素治疗,治疗组在上述药物基础上给予微量泵持续泵入替罗非班,疗程为(24～96)小时。观察两组主要终点事件(顽固性心绞痛、再发心肌梗死和死亡)及不良反应发生情况。结果:与对照组相比,主要终点事件有下降趋势,严重不良反应少。结论:替罗非班治疗急性冠脉综合征是安全、有效的。     

“和谐使命-2015”格林纳达站分级式海外医疗服务模式探讨

目的：通过对“和谐使命-2015”格林纳达站医疗服务中,因地制宜调整医疗服务模式的总结,为今后类似岛屿国家医疗服务提供借鉴。方法分析到访国具体情况,与当地卫生机构充分沟通,将医疗模式调整为多点全科初筛患者,医院船重点整体检查和治疗的医疗服务模式。结果服务期间患者就诊流程顺畅,医疗服务效率明显提高,成为“和谐使命-2015”任务中免费医疗人数、质量最高的一站,最大限度地满足了当地民众的医疗需求。结论结合到访国实际情况,对固有医疗模式进行相应调整,在实际工作中达到了预期效果。     

长航对女性黄褐斑的影响研究

目的分析长航对女性黄褐斑的影响。方法选取参加长航任务的17例女性黄褐斑患者(黄褐斑组),并设对照组15例健康女性(健康组),检测长航前、后症状及血清促黑素细胞激素、过氧化脂质、超氧化物歧化酶水平的变化。结果长航3个月后黄褐斑患者皮损面积和颜色较长航前均不同程度扩大和加深(P<0.05),伴随症状失眠、便秘、月经不调均不同程度加重(P<0.05)。黄褐斑组和健康组长航3个月后血清促黑素细胞激素水平均较前升高(P<0.05),黄褐斑组血清促黑素细胞激素长航前、后较健康组均高(P<0.05);黄褐斑组长航3个月后过氧化脂质水平升高、超氧化物歧化酶水平降低(P<0.05),而健康组长航前、后差异无统计学意义(P>0.05)。结论长航能使黄褐斑皮损扩大、颜色加深,伴随症状加重,并使黄褐斑患者的血清促黑素细胞激素和过氧化脂质水平升高、超氧化物歧化酶水平降低。     

Calcineurin,NFAT2,COX-2和VEGF-A在体外培养正常黑素细胞和不同黑素瘤细胞系中的表达

目的检测Calcineurin/NFAT信号途径中Calcineurin,NFAT2,COX-2和VEGF-A分子在正常人黑素细胞和不同黑素瘤细胞系中的表达,初步探讨它们与黑素瘤发生、发展的关系。方法选取正常人原代黑素细胞(MC)及来源于原位(WM793B)、侵袭性(LIBR)及转移性(SK-MEL-5)的黑素瘤细胞系,采用RT-PCR,Westernblot检测四种细胞中Calcineurin,NFAT2,COX-2和VEGF-A的表达情况。结果与正常人黑素细胞相比,在不同黑素瘤细胞系中Calcineurin,NFAT2,COX-2和VEGF-A4个分子明显高表达。结论 Calcineurin/NFAT信号途径可能与黑素瘤的发生有关。