两种细胞表面抗原标记法流式仪检测健康成人T亚群Ⅰ、Ⅱ型细胞比例实验研究

目的了解正常成人T亚群Ⅰ、Ⅱ型细胞比例，并比较以CD3＋CD4双标记法和以CD3＋CD8双标记方法对检测结果的影响。方法全血以PMA和伊能霉素刺激培养4h，以三色标记法流式检测T亚群Ⅰ、Ⅱ型细胞因子阳性细胞的比例。结果CD3、CD8、CD4抗原在刺激后明显下调，但是不影响T亚群比例值。以CD3＋CD8双标记法检测了23例正常成人，n1和Tcl细胞在CD3^＋淋巴细胞中的比例分别为2．6％（0％-23．8％）和2．2％（0％-23．3％）。Th2和Tc2细胞占CD3^＋淋巴细胞2．8％（0．7％-13．3％）和1．6％（0％-5．1％）。以CD3＋CD4双标记法检测了12例正常成人，Th1和Tc1细胞占CD^＋淋巴细胞的比例分别为4．8％（0％-15．6％）和1．8％（0．3％-18．6％），Trh2和Tc2细胞占CD3^＋淋巴细胞的比例分别为2．6％（0％-6．5％）和1．2％（0％-10．6％），均与以CD3＋CD8标记检测的结果无统计学意义。以CD3-FTTC和CD8-PerCP双标记法检测了17例正常人的IL-2表达，IL-2阳性的CD4^＋T细胞占CD3＋淋巴细胞的比例为3．7％（0％-30．0％），高于CD8^＋IL-2^＋T细胞在CD3^＋淋巴细胞中的比例0％（0％-1．7％），P=0．005。结论可以建立有效的流式检测正常人T亚群Ⅰ、Ⅱ型细胞比例方法。以CD3＋CD4双标记或以CD3＋CD8双标记检测分析T亚群的Ⅰ、Ⅱ型细胞比例都是可行的。     

成人骨髓间充质干细胞对造血干细胞体外增殖的影响

目的研究骨髓间充质干细胞（MSC）对脐带血（CB）CD34^＋细胞体外增殖和造血重建能力的影响。方法取人骨髓单个核细胞贴壁培养．梭形细胞完全融合后传代，用流式细胞仪检测免疫表型；将CBCD34^＋细胞接种到MSC或其他培养液中．比较不同培养条件对造血干细胞扩增能力、集落形成能力及黏附分子表达的影响。结果在加入IL-3的培养体系中．在MSC和细胞因子作用下，CD34^＋细胞扩增7d和14d后，有核细胞（NC）、CD34^＋细胞和CDl33^＋细胞数，实验组均显著多于对照组。CD34＋细胞在未加入IL-3的培养体系中培养8d后，实验组NC、CD34^＋细胞、CD34^＋CD38-细胞和造血祖细胞集落扩增倍数均显著高于对照组。扩增后CD34^＋细胞的ALCAM、VLA-α4、VLA-α5、VLA-β1、HCAM、PECAM和LFA-1表达较扩增前无显著变化。结论MSC可为造血干细胞（HSC）体外扩增提供适宜的微环境，有助于CD34^＋细胞体外增殖并抑制HSC分化，保持其造血重建潜能和归巢能力。     

颅内破裂动脉瘤夹闭术和栓塞术后分流依赖性脑积水的系统评价

目的系统评价颅内破裂动脉瘤夹闭术和栓塞术后分流依赖性脑积水发生率。方法以脑积水、夹闭、介入、栓塞、颅内动脉瘤、脑动脉瘤、蛛网膜下腔出血/蛛网膜下隙出血,以及hydrocephalus、shunt、clipping、coiling、surgical、endovascular、embolization、treatment、intracranial aneurysm、cerebral aneurysm、subarachnoid hemorrhage等中英文词组,计算机检索1990年1月-2015年9月美国国立医学图书馆生物医学信息检索系统、荷兰医学文摘、Cochrane临床对照试验中心注册库、中国知网中国知识基础设施工程、万方数据库,辅助手工检索《中华神经外科杂志》、《中国现代神经疾病杂志》和《中国脑血管病杂志》等相关杂志,查阅关于颅内破裂动脉瘤夹闭术和栓塞术后分流依赖性脑积水发生率的临床研究。采用Jadad量表和Newcastle-Ottawa量表评价文献质量,Rev Man 5.3和Stata 13.1统计软件进行Meta分析。结果共获得731篇文献,经剔除重复和不符合纳入标准者,最终纳入18项临床试验共计15 920例颅内破裂动脉瘤患者,行夹闭术者10 038例、行栓塞术5882例。Meta分析显示:两种治疗方式术后分流依赖性脑积水发生率差异无统计学意义(OR=0.860,95%CI:0.720~1.030;P=0.110);分析结果的稳定性较差,但不存在发表偏倚(Egger法:P=0.795)。结论颅内破裂动脉瘤夹闭术和栓塞术后分流依赖性脑积水发生率无显著差异,但尚待进一步的高质量临床研究加以证实。     

基底核区高血压脑出血术后患者生命质量及影响因素分析

目的测评并分析基底核区高血压脑出血术后患者的生命质量状况及影响因素,为提高此类疾病患者生命质量提供参考依据。 方法搜集基底核区高血压脑出血手术后符合纳入条件的患者资料128例进行回顾性研究分析。设计调查表进行问卷调查,调查患者的人口学特征(性别、年龄、职业、婚姻状况、文化程度、居住地、家庭人口数、是否与子女同住、吸烟、饮酒、家庭收入等)及手术时的各项临床状况(脑中线移位、脑出血量、手术开始时间、脑疝是否发生、意识状态、出血是否破入脑室等)。采用SF-36健康测量量表对患者生命质量进行测评,并对其影响因素进行统计学单因素及多因素分析。 结果（1）单因素分析：①生理功能（PF）主要受年龄、婚姻状况、家庭人口数、脑中线移位、脑出血量、脑疝是否发生、意识状态以及出血是否破入脑室等因素的影响（P<0.05）;②生理职能（RP）主要受婚姻状况、文化程度、婚姻状况、家庭月收入、脑中线移位、意识状态以及出血是否破入脑室等因素的影响（P<0.05）;③躯体疼痛（BP）主要受婚姻状况和家庭人口数的影响（P<0.05）;④总体健康（GH）主要受年龄、婚姻状况、家庭月收入、脑中线移位、脑出血量、脑疝是否发生、意识状态、出血是否破入脑室等因素的影响（P<0.05）;⑤社会功能（SF）主要受婚姻状况、家庭人口数、意识状态以及出血是否破入脑室等因素的影响（P<0.05）;⑥精神健康（MH）主要受是否与子女同住、脑出血量、手术开始时间以及出血是否破入脑室等因素的影响（P<0.05）;⑦情感职能（RE）主要受意识状态和出血是否破入脑室的影响（P<0.05）;⑧活力（VT）主要受婚姻状况、吸烟、意识状态以及出血是否破入脑室等因素的影响（P<0.05）。（2）多因素分析：①PF主要受出血是否破入脑室、家庭人口数、脑中线移位、年龄等因素的影响（P<0.05）;②RP主要受家庭人口数和是否与子女同住两因素的影响（P<0.05）;③BP主要受家庭人口数的影响（P<0.05）;④GH主要受脑中线移位、出血是否破入脑室以及年龄和居住地等因素的影响（P<0.05）;⑤SF主要受出血是否破入脑室和家庭人口数的影响（P<0.05）;⑥MH主要受出血是否破入脑室因素的影响（P<0.05）;⑦RE主要受出血是否破入脑室因素的影响（P<0.05）;⑧VT主要受出血是否破入脑室、家庭人口数和吸烟等因素的影响（P<0.05）。 结论基底核区高血压脑出血术后患者生命质量影响因素主要有年龄、家庭人口数、是否与子女同住、家庭居住地、吸烟、脑中线移位、出血是否破入脑室等。     

甲基强的松龙对伽玛刀照射后胶质细胞Cx43和GFAP表达的影响

目的 研究甲基强的松龙（MP）对伽玛刀照射后胶质细胞缝隙连接蛋白43（Cx43）和胶质纤维酸蛋白（GFAP）表达的影响。方法体外培养原代星形胶质细胞,经伽玛刀照射（边缘剂量32Gy）并培养36h后随机分为1μg／ml、5μg／ml、10μg／ml、20μg／ml、30μg／ml、40μg/ml组及实验对照组,各组进一步随机分为48h、72h、96h、120h4个亚组。将各组胶质细胞与相应剂量MP共培养,于48、72、96、120h各时间点采用免疫组化方法检测GFAP及Cx43的表达。结果伽玛刀照射后,胶质细胞Cx43表达降低,GFAp表达增高。添加MP后,20μg／ml、30μg／ml组Cx43呈时间依赖性上调;GFAP表达虽呈时间依赖性上升,但其峰值低于实验对照组,峰值出现时间亦晚于实验对照组。结论MP可上凋伽玛刀照射后胶质细胞Cx43的表达,抑制GFAP表达的上升趋势。     

人外周血内皮祖细胞分离培养与鉴定

目的 探讨人外周血内皮祖细胞体外分离培养和诱导分化的实验方法,为其在神经系统疾病中的应用提供理论依据.方法 抽取健康成年男性志愿者外周血10ml,密度梯度离心获得单个核细胞,经体外培养后于倒置相差荧光显微镜下观察细胞生长情况及形念变化;免疫荧光染色榆测细胞表面标志物CD133、CD34和凝血囚子Ⅷ表达水平;流式细胞术检测CD133-FITC和CD34-PE双阳性细胞所占比例及CD34-PE单阳性细胞所占比例.结果 倒置相差荧光显微镜下观察,人外周血单个核细胞经体外培养至第2天时,呈贴壁生长;至第4～6天时细胞集落形成,集落周围有内皮样细胞,细胞质和细胞膜呈红色和绿色双色荧光,细胞核呈蓝色荧光,提示内皮祖细胞特异性吸附Dil标记的乙酰化低密度脂蛋白和FITC标记的Ⅰ型荆豆凝集素,具有内皮细胞功能.免疫荧光染色CD133、CD34和凝血因子Ⅷ表达阳性;流式细胞术检测CD133-FTTC和CD34-PE双阳性细胞所占比例为38.30%,CD34-PE单阳性细胞所占比例为82.60%.结论 初步确立人外周血内皮祖细胞体外分离培养和诱导分化的实验方法,为内皮祖细胞的移植研究奠定了基础.     

颈动脉血管成形术和颈动脉内膜切除术治疗颈动脉狭窄的Meta分析

目的 比较颈动脉血管成形术和颈动脉内膜切除术治疗颈动脉狭窄的临床疗效和安全性.方法 检索MEDLINE数据库、Cochrane图书馆和中国知识基础没施工程中国期刊全文数据库1990-2008年发表的关于颈动脉血管成形术和颈动脉内膜切除术治疗颈动脉狭窄的文献共计426篇,最终纳入11篇,进行Meta分析.结果 11篇文献共纳入3267例患者,其中颈动脉血管成形术组1637例、颈动脉内膜切除术组1630例.固定效应模型分析显示,颈动脉血管成形术组患者手术后30 d脑卒中发生率和病死率高于颈动脉内膜切除术组(RR=1.300,95%CI:1.010～1.680,P=0.040);脑神经损伤发生率低于颈动脉内膜切除术组(RR=0.090,95%CI:0.040～0.220,P=0.000);两组患者手术后30 d心肌梗死发生率比较差异无统计学意义(RR=0.660,95%CI:0.310～1.370,P=0.260).随机效应模型分析显示,两组患者手术后30d脑卒中发生率和病死率比较差异无统计学意义(RR=1.300,95%CI:0.880～1.920,P=0.180);颈动脉血管成形术组患者手术后30d脑神经损伤发生率低于颈动脉内膜切除术组(RR=0.110,95%CI:0.040～0.290,P=0.000);两组患者手术后1年脑卒中发牛率和病死率比较差异无统计学意义(RR=1.050,95%CI:0.590～1.890,P=0.860).结论 颈动脉内膜切除术仍足治疗颈动脉狭窄的首选方法.除脑神经损伤发生率降低外,尚无循证医学证据显示颈动脉血管成形术治疗颈动脉狭窄的疗效和安全性优于颈动脉内膜切除术.由于所纳入的部分研究存在异质性,应谨慎对待本研究的结果.正在进行的随机对照临床试验可能在不久的将来为颈动脉狭窄治疗方法的选择提供更佳的循征医学证据.＃     

中药治疗乳癖54例

目的：采用中药治疗乳癖疗效观察。方法：采用乳癖方并随证加减治疗乳癖,乳癖治疗多以疏肝理气、化瘀软坚为大法,并随证加减,水煎服,每日1剂。结果：采用中药治疗乳癖疗效满意。     

湖南永州市不同区域泌尿系结石患病情况调查报告

泌尿系结石是全球性疾病，也是我国最常见的泌尿外科疾病。我国南方是结石高发区，如广东省东莞市1985年泌尿系结石患病率为140/10万。湖南省永州市属南方地区，为了解永州市泌尿系结石的患病情况，我们进行了不同区、县的调查比较。现将1999年至2003年的患病现状报道如下。     

Vα24 NKT细胞的细胞因子生成调控

目的:评价细胞因子培养体系对经α-半乳糖酰基鞘氨醇(α-GalCer)体外扩增的NKT细胞的细胞因子生成的影响.方法:每份正常人外周血单个核细胞(MNC)标本分为3～4组:a[IL-2加IL-15,n=6]、b[IL-2加IL-15加IL-12加γ干扰素(IFN-γ),n=6]、c[IL-2加IL-15加IL-7,n=6]、d[IL-2加IL-15加IL-7加粒细胞集落刺激因子(G-CSF),n=4].培养中加入α-GalCer和相应细胞因子,12 d后用流式细胞计数法测定NKT细胞及其亚群数量,并用细胞胞内染色法测定细胞因子生成.结果:①扩增的NKT细胞CD4 亚群中IL-4 细胞比例高于CD4-亚群(P<0.01);2亚群中IFN-γ 细胞比例相当(P＞0.05).②各组NKT细胞中,b组IL-4 比例低于a组(P＜0.01),c和d组均高于a组(均P＜0.05),d和c组结果相当(P＞0.05);而b组IFN-γ 比例略高于a组,但P＞0.05,d组低于a组(P＜0.05),c组与a组的结果相近(P＞0.05).③各组CD4 NKT细胞亚群中,b组IL-4 细胞比例低于a组(P＜0.01),c和d组高于a组(均P＜0.01),而c和d组之间差异无统计学意义(P＞0.05);各组CD4-NKT细胞中,IL-4 细胞比例的差异无统计学意义(P＞0.05);各组CD4 NKT细胞中,IFN-γ 细胞比例的差异无统计学意义(P＞0.05);各组CD4-NKT 细胞中,IFN-γ 细胞比例的差异无统计学意义(P＞0.05).结论:不同细胞因子组合的培养体系,能调节经α-GalCer扩增的Vα24NKT细胞IL-4和IFN-γ的生成,IL-7和G-CSF有助于IL-4的生成,而IL-12和IFN-γ有助于IFN-γ的生成.