钙敏感受体在创伤性颅脑损伤大鼠神经元凋亡中的作用

目的 探讨钙敏感受体（CaSR）在创伤性颅脑损伤（TBI）大鼠神经元凋亡中的作用.方法 健康成年雄性SD大鼠54只,按随机数字表方法随机分为对照组、TBI组、抑制剂组,每组18只,每组再分为损伤后6、24、72 h3个亚组,每个亚组6只大鼠.TBI组和抑制剂组采用改良自由落体硬脑膜撞击法建立TBI模型,抑制剂组在模型建立前连续2d尾静脉注射CaSR阻滞剂NPS2390（1次/d,每次10 μmol/kg）,对照组只开骨窗不予打击.采用改良神经行为学评分（mNSS）评估各组大鼠的神经行为,实时定量PCR法检测损伤脑组织CaSR、Caspase-3 mRNA的表达,Westem blot法检测CaSR、Caspase-3蛋白的表达,TUNEL法检测皮质神经元的凋亡.结果 建模后6、24、72 h,（1）神经行为学评分显示,TBI组与对照组和抑制剂组比较,各时间点mNSS评分均增高,差异均有统计学意义（均P〈0.01）,而抑制剂组各时间点评分均高于对照组（均P〈0.01）.（2）TBI组和抑制剂组不同时间点CaSR、Caspase-3的mRNA和其蛋白的表达,均为24 h达高峰（均P〈0.01）.与对照组和抑制剂组比较,TBI组各时间点CaSR mRNA及其蛋白的表达均增高（均P〈0.01）,Caspase-3的蛋白表达仅在24 h高于对照组和抑制剂组（P〈0.05）.（3）TUNEL法检测结果显示,TBI模型制作后24 h凋亡细胞达到峰值.各时间点TBI组比对照组和抑制剂组神经元凋亡细胞指数均增高（均P〈0.01）,而抑制剂组与对照组比较,各时间点凋亡细胞指数仍高（均P〈0.01）.（4）CaSR、Caspase-3蛋白的表达均与细胞凋亡指数存在正相关（r =0.300,P 〈0.05;r =0.371,P〈0.01）,CaSR蛋白的表达与Caspase-3蛋白的表达存在正相关（r=0.434,P〈0.01）.结论 大鼠TBI后,CaSR在抑制神经元凋亡中起着重要的作用.