低分子量肝细胞生长素理化性质的研究

通过链霉蛋白酶P、N-糖苷酸F、O-糖苷酶、唾液酸酶水解低分子量肝细生长素,以探讨低分子量肝细胞生长素(HPN)的理化性质与生物活性。 一、材料与方法 1.材料:(1)低分子量肝细胞生长素(HPN):以乳猪肝脏为原料制备、纯化出的分子量约为6.54×10~3的耐热、促进肝细胞生长物质的纯品(研究所自行纯化)。(2)链霉蛋白酶P、NP40购自美国Sigma公司;N-糖苷酸F、唾液酸酶、O 糖苷酶购自美国Roche公司;~3H-TdR:购于北京中国原子能研究院,浓度为37×10~6Bq/ml,用前以RPMI1640培养基稀释,每10μl培养墓含37×10~3Bq~H-TdR。其余试剂购自北方同正公司和重庆医药有限公司试剂部。(3)QGY细胞由重庆医科大学病毒性肝炎研究所提供。     

食物过敏儿童肠道通透性研究

目的通过双糖吸收试验评价食物过敏儿童肠粘膜屏障功能.方法研究对象食物过敏患儿及正常儿童各19例,平均年龄(8.1±1.7)个月.用高效液相色谱分析法(high performance liquid chromatography,HPLC)测定各研究对象口服测试液2 ml/kg(每100 ml测试液含5 g乳果糖(L)和2 g甘露醇(M))后,5 h内尿中甘露醇和乳果糖的浓度,并计算乳果糖和甘露醇尿中排出率及其比值(L/M).结果食物过敏儿童5 h尿中L/M(0.18±0.06)较正常儿童(0.05±0.03)显著增高(P＜0.001).其原因可能是患儿乳果糖透过肠粘膜被吸收入血增加,而甘露醇透过肠粘膜被吸收入血正常或略有下降.结论HPLC检测肠道通透性的准确性高,重复性好,是临床评价小肠粘膜屏障功能的实用方法.食物过敏儿童肠道屏障功能发生改变.     

链霉蛋白酶P、糖苷酶对低分子量肝细胞生长素生物活性的影响

目的研究链霉蛋白酶P、糖苷酶对低分子量肝细胞生长素生物活性的影响。方法用链霉蛋白酶P、N-糖苷酶F、O-糖苷酶分别对低分子量肝细胞生长素消化,观察消化后低分子量肝细胞生长素以及未经消化的低分子量肝细胞生长素和促肝细胞生长素对人肝癌细胞株QGY、HepG2、原代大鼠肝细胞的增殖作用,用3H-胸腺嘧啶核苷掺入法测定这些细胞的增殖情况。结果低分子量肝细胞生长素与促肝细胞生长素对人肝癌细胞株QGY、HepG2、原代大鼠肝细胞均有明显增殖作用（P〈0.01）;低分子量肝细胞生长素与促肝细胞生长素均对人肝癌细胞株QGY增殖作用最明显（P〈0.01）;低分子量肝细胞生长素增殖作用较促肝细胞生长素明显（P〈0.01）。低分子量肝细胞生长素经链霉蛋白酶P、O-糖苷酶消化前后对人肝癌细胞株QGY、HepG2、原代大鼠肝细胞增殖作用无影响（P〉0.05）;低分子量肝细胞生长素经N-糖苷酶F消化后对人肝癌细胞株QGY、HepG2、原代大鼠肝细胞增殖作用明显减弱,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论低分子量肝细胞生长素促进人肝癌细胞株QGY、HepG2、原代大鼠肝细胞增殖作用比促肝细胞生长素更显著。     

谷胱甘肽的快速荧光检测法

目的建立一种灵敏、特异、稳定、快速的谷胱甘肽（ＧＳＨ）检测方法。方法用二硫苏糖醇还原,邻苯二醛柱前衍生,用长（１５０ｍｍ ）或短（３０ ｍｍ）反相Ｃ１８柱色谱分离,再用荧光检测器测定血浆ＧＳＨ。结果用 Ｃ１８反相长柱和Ｃ１８反相短柱进行ＧＳＨ色谱分析结果基本一致,两组标准曲线的相关系数为 ０．９９８４。用短柱分析的时间为长柱的 １／７,灵敏度为＜ ２μｇ／Ｌ,在 ２～２００ｍｇ／Ｌ范围内,日内变异系数和日间变异系数均小于 １０％。正常人血浆ＧＳＨ水平为 １１．１６±４．２２ ｍｇ／Ｌ。结论用 Ｃ１８反相短柱进行ＧＳＨ色谱分析,用荧光分光光度计定量是一种灵敏、特异、快速并易于临床开展的检测方法,可用于血浆或器官组织ＧＳＨ水平的研究。     

采用高效液相色谱法检测儿童肠道通透性的方法学研究

【目的】建立通过双糖吸收试验评价儿童肠粘膜屏障功能的高效液相色谱法(highperformanceliquidchromatography,HPLC)。【方法】采用HPLC法检测研究对象尿液标本中甘露醇(mannitol,M)和乳果糖(lactulose,L)排出率比值。以Sugar-Pak1(300×6.5mm,Waters)为色谱柱;柱温:85℃;流动相:超纯水;流速:O.5ml／min;示差折射检测器。【结果】在上述色谱条件下,尿液中甘露醇和乳果糖能得到良好分离。该法检测甘露醇和乳果糖排出量的平均日内变异系数分别为2.51％和3.03％(n=4);日间变异系数分别为3.53％和5.52％;甘露醇的加样回收率在93％~98％之间,乳果糖的加样回收率在91％~97％之间。本方法测定甘露醇的最大检出限为25mg／L,乳果糖为12.5mg／L。食物过敏儿童肠道通透性(L／M:0.18±0.06)较正常儿童(L／M:0.05±0.03)显著增高(P<0.001)。【结论】HPLC检测肠道通透性的准确性高、重复性好,是临床评价小肠粘膜屏障功能的实用方法。     

脉冲电磁场治疗骨质疏松症的临床研究

目的观察脉冲电磁场(PEMFs)对老年妇女骨质疏松症的作用。 方法对36例原发性骨质疏松症老年女性患者进行脉冲电磁场治疗，20 min/次，1次/d，连续30 d，同时每日补充元素钙500 mg和维生素D 800 U以上。于治疗前、治疗结束时及治疗后3个月用疼痛数字评价量表（NRS）测定疼痛值；用放射免疫法（RIA）检测血清骨钙素（OC）；用酶联免疫法（ELISA）检测血清I型胶原C末端肽（CTX-1）浓度；并于治疗前和治疗后3个月用双能X射线骨密度仪(DXA)检测骨密度(BMD)。 结果治疗后NRS评分较治疗前降低，差异有统计学意义(P<0.05)。OC浓度治疗前、后没有明显变化（P&rt;0．05)；CTX-1浓度治疗结束时较治疗前降低(P<0.05)，治疗后3个月较治疗结束时亦明显降低(P<0.05)。治疗后3个月，Wards三角区骨密度平均提高0.021 g/cm2，差异有统计学意义(P<0.05)；股骨颈骨密度和大转子骨密度有所提高，但差异无统计学意义(P&rt;0．05)。 结论PEMFs能改善老年女性原发性骨质疏松症患者疼痛症状，使骨密度增加，其机制主要为抑制骨吸收，且在治疗结束后仍能维持其作用。      

多巴酚丁胺负荷乳酸/羟基乙酸共聚物心肌造影下二维应变定量评价犬存活心肌的研究

目的探讨乳酸/羟基乙酸共聚物(PLGA)经主动脉心肌造影联合多巴酚丁胺负荷条件下,二维应变评价犬节段心肌存活性的准确性。方法 30只犬成功建立急性心肌缺血再灌注模型,经主动脉根部行PLGA心肌造影,通过多巴酚丁胺负荷试验,获取心肌节段二维应变参数:收缩期峰值纵向应变(LS)、径向应变(RS)及圆周应变(CS)。结果共计24只犬完成实验。多巴酚丁胺负荷实验后,非存活心肌节段的收缩期二维峰值应变较静息时无明显升高;存活心肌节段的二维应变值随多巴酚丁胺剂量增加而升高,与非存活心肌节段比较差异有统计学意义(P<0.05)。以心肌标本染色结果作为金标准,分别以收缩期峰值LS、RS及CS作为评价参数,其检测存活心肌的敏感性分别为81.03%、77.59%及72.41%,特异性分别为81.30%、84.00%及78.00%。结论 PLGA心肌造影联合多巴酚丁胺负荷实验可以提高超声图像质量,获取二维应变参数,提高评价犬心肌存活的准确性。     

45家医疗机构后勤保洁人员感控认知现状调查

目的 通过调查医疗机构后勤保洁人员对医院内感染防控(感控)认知的现状，为构建后勤保洁人员感控培训和管理方案提供参考依据。方法 2023年3月1-9日采用自行设计的后勤保洁人员调查问卷，通过目的抽样法，应用问卷星对重庆市45家医疗机构541名后勤保洁人员进行问卷调查。有效问卷回收率为100%。结果 541名后勤保洁人员中女性占89.83%(486/541);初中学历者占50.65%(274/541);工作年限大于5年者占21.44%(116/541);通过媒体或学校获取感控知识者占12.20%(66/541)。结论 提升后勤保洁人员感控认知、树立劳动模范、构建感控文化、加强人文关怀、稳定人才队伍是预防医院内感染的方法之一，助推医疗机构高质量发展。     

化学发光免疫分析在T3、T4测定中的应用

化学发光免疫分析法(ChemiluminesentImmunoassayAssay,CLIA)是一种微量生物活性物质定量测定技术,具有灵敏度高、特异性强、重复性好、测定范围较宽、试剂稳定性好、操作简单以及易于自动化等优点。CLIA是取代放射免疫分析法(RIA)的首选方法之一。用CLIA取代RIA时,应建立本实验室CLIA检查项目的正常参考值范围。长期以来,各实验室已对RIA检查项目建立了自已的正常参考值范围。我们对35例T3、T4 (三碘甲腺原氨酸、甲状腺素)检查样本同时进行RIA测定和CLIA测定[1],以了解CLIA是否可引用RIA的正常参考值范围及在CLIA操作…     

辛伐他汀对糖尿病大鼠骨组织BMP-2基因表达的影响

目的 观察糖尿病大鼠应用辛伐他汀干预治疗后骨组织中骨形态发生蛋白-2(BMP-2)基因、骨密度(BMD)及骨代谢的变化.方法 4月龄雄性SD大鼠30只,随机分为对照组,糖尿病组,辛伐他汀组,每组10只.糖尿病组和辛伐他汀组大鼠经腹腔注射链脲佐菌素造成糖尿病大鼠模型后,辛伐他汀组给予辛伐他汀5 mg·kg-1·d-1灌服,对照组、糖尿病两组大鼠灌服生理盐水1.5 ml·只-1·d-1.14 w后处死大鼠,测定各组大鼠骨BMP-2 mRNA的表达、骨密度及骨代谢.结果 辛伐他汀组BMP-2 mRNA的表达水平及血清碱性磷酸酶(ALP)均明显高于糖尿病组(P＜0.05);糖尿病组骨密度显著低于对照组(P＜0.01);辛伐他汀组骨密度明显高于糖尿病组(P＜0.05);辛伐他汀组抗酒石酸酸性磷酸酶(TRACP)显著低于糖尿病组(P＜0.01).结论 辛伐他汀能使糖尿病大鼠骨组织BMP-2基因表达增强,骨密度增加,改善了骨代谢.