MEBO对糖尿病大鼠创面自噬信号因子Beclin1、LC3、p62的调控作用

目的分析湿润烧伤膏(MEBO)对创面组织自噬信号因子Beclin1、LC3、p62的调控作用及其促进创面愈合的机制。方法选取SPF级Wistar雄性大鼠250只,随机分为空白组、对照组、模型组、康复新组、MEBO组各50只。对照组建立常规创面模型,模型组、康复新组、MEBO组建立糖尿病创面模型,对照组、模型组大鼠创面予生理盐水外敷治疗,康复新组、MEBO组分别予康复新和MEBO外敷治疗。分别于干预第1、5、11、18、25天观察创面愈合情况、苏木素-伊红(HE)染色病理及自噬体的变化;免疫荧光法及Western印迹检测创面组织Beclin1、LC3、p62的变化;qRT-PCR分析Beclin1、LC3、p62 mRNA的表达。结果治疗过程中,对照组愈合最快,模型组愈合最慢,早期各组创面愈合率无显著差异(P>0.05),晚期各组创面愈合率:对照组>MEBO组>康复新组>模型组(P<0.05)。对照组、康复新组、MEBO组创面组织病理形态改善优于模型组。对照组、模型组、康复新组、MEBO组创面组织中Beclin1、LC3平均光密度(OD)值上升后下降,p62 OD值下降后上升;细胞内自噬体数目升高后下降;创面组织Beclin1、p-Beclin1表达量及LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值上升后下降,p62表达下降后上升;Beclin1、LC3 mRNA表达上升后下降,p62表达下降后上升差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论MEBT/MEBO可有效促进糖尿病创面愈合,细胞自噬激活可能是其作用机制之一。     

高压氧对糖尿病足创面组织中 VEGF、EGF 表达水平的影响

【摘要】 目的 探讨高压氧对糖尿病足创面组织中血管内皮生长因子 (VEGF)、表皮生长因子 (EGF) 表 达水平的影响? 方法 选取2016 年 3月至 2019 年6月右江民族医学院附属医院收治的48例Wagner 1 ~ 2级糖尿病足患者作为研究对象, 并按照随机区组设计方法将其随机分为研究组和对照组, 每组24例,对照组患者行常规清创换药治疗, 研究组患者在对照组治疗的基础上联合应用高压氧治疗,对比观察两组患者治疗后创面组织形态学及 VEGF、EGF表达水平变化情况? 结果 治疗第 3、7、12 天,对照组患者创面组织水肿逐渐消退、炎症细胞逐渐减少、新生血管逐渐增多但排列紊乱,研究组患者创面组织水肿消退及炎症细胞减少速度明显快于对照组,治疗第3天即可见排列整齐的新生血管及层状分布的肉芽组织;免疫组化检测结果显示,VEGF表达于血管内皮细胞及成纤维细胞胞浆内,EGF表达于血管内皮细胞、成纤维细胞及炎症细胞胞浆内;治疗第 3、7、12天,两组患者创面组织内 VEGF? EGF 表达水平均逐渐升高,除治疗第3天两组患者创面组织内 VEGF 表达水平无显著差异 (t = 1.49, P = 0.33) 外,治疗第 7、12天研究组患者创面组织内VEGF表达水平及各时间点EGF表达水平均明显高于对照组 (VEGF: t = 4.10、4.36,P均< 0.001;EGF: t = 2.63,3.21,4.509, P= 0.048、P = 0.001、P < 0.001)? 结论 高压氧可通过上调创面组织内 VEGF、EGF 的表达水平,促进糖尿病足面组织内新生血管的生成,加快创面愈合。     

2型糖尿病合并阻塞性睡眠呼吸暂停综合征病情严重程度与糖脂代谢、炎症因子及肾功能的相关性研究*

目的 探讨2型糖尿病合并阻塞性睡眠呼吸暂停综合征（OSAS）病情严重程度与糖脂代谢、炎症因子及肾功能的相关性。方法 按照每小时睡眠呼吸暂停次数（AHI）将2016年3月—2018年6月右江民族医学院附属医院收治的123例2型糖尿病患者分为单纯糖尿病组（39例,AHI<5次/h）、OSAS轻度组（32例,AHI 5～15次/h）、OSAS中度组（28例,AHI 16～30次/h）和OSAS重度组（24例,AHI>30次/h）,同期随机选取40例健康体检者为对照组。比较各组睡眠呼吸指标：AHI、最低动脉血氧饱和度（LSaO2）、夜间动脉平均血氧饱和度（MSaO2）,血糖指标：空腹血糖（FBG）、餐后2?h血糖（2?h PBG）、糖化血红蛋白（HbA1c）,血脂指标：总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白（HDL）、低密度脂蛋白（LDL）、甘油三酯（TG）,炎症因子指标：白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-8（IL-8）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、高敏C反应蛋白（hs-CRP）、胞间黏附分子-1（ICAM-1）,以及肾功能：血清肌酐（Scr）、肾小球滤过率（eGFR）,并分析睡眠呼吸指标与糖脂代谢指标、炎症因子指标及肾功能指标的相关性。结果 2型糖尿病患者体重指数（BMI）、FBG、HbA1c、TC、LDL、TG高于对照组,HDL低于对照组（P?<0.05）,OSAS轻、中、重度组患者FBG、HbA1c、TC、LDL、TG高于单纯糖尿病组,HDL低于单纯糖尿病组（P?<0.05）。2型糖尿病患者血清IL-6、IL-8、TNF-α、hs-CRP、ICAM-1水平均高于对照组（P?<0.05）,OSAS轻、中、重度组患者上述指标高于单纯糖尿病组（P?<0.05）。2型糖尿病患者eGFR水平低于对照组（P?<0.05）,OSAS轻、中、重度患者eGFR水平低于单纯糖尿病组（P?<0.05）。糖尿病肾脏疾病（DKD）组患者AHI高于非DKD组,LSaO2、MSaO2低于非DKD组（P?<0.05）。经Pearson相关分析,AHI与BMI、FBG、HbA1c、TC、LDL、TG、IL-6、IL-8、TNF-α、hs-CRP、ICAM-1呈正相关（P?<0.05）,LSaO2、MSaO2与上述指标呈负相关（P?<0.05）;AHI与HDL、eGFR呈负相关（P?<0.05）,LSaO2、MSaO2与HDL、eGFR呈正相关（P?<0.05）。结论 OSAS可致2型糖尿病患者糖脂代谢异常、炎症反应加剧及肾功能损伤,并且OSAS病情越严重,患者糖脂代谢异常越明显,炎症反应越重,肾功能损伤越严重。     

颈动脉内膜中层厚度对糖尿病足溃疡创面的影响

目的探讨颈动脉内膜中层厚度(IMT)对糖尿病足溃疡创面的影响。方法选取糖尿病足患者181例,未合并糖尿病足2型糖尿病患者62例(非糖尿病足组)为研究对象,测定IMT值,糖尿病足溃疡患者按IMT值分三组:颈动脉内膜厚度正常组(IMT<0.9 mm),颈动脉内膜增厚组(IMT≥0.9 mm)及颈动脉斑块组,回顾性分析患者空腹血糖(FBG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、血压、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、肌酐(Cr)、踝肱指数(ABI)、糖尿病足Wagner分级等资料。结果颈动脉内膜厚度正常组、颈动脉内膜增厚组、颈动脉斑块组糖尿病足Wagner分级依次升高,差异有统计学意义(P<0.05);随着IMT升高,患者的FBG、HbA1c、LDL-C、Cr、ABI、血压等水平均逐渐增高,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);相关性分析显示IMT值与FBG、HbA1c、LDL-C、Cr、ABI、收缩压呈正相关(r分别为0.183、0.149、0.304、0.421、0.840、0.161,P均<0.05);多元回归分析显示HbA1c、收缩压、ABI为血管内膜增厚的危险因素。结论颈动脉IMT值与糖尿病足创面严重程度密切相关,IMT值越高,糖尿病足创面情况越严重,IMT值可能可作为糖尿病足创面严重程度及预后的判断指标之一。     

MEBT/MEBO对糖尿病大鼠创面组织中ULK1表达的影响

目的观察皮肤再生医疗技术(moist exposed burn therapy/moist exposed burn ointment,MEBT/MEBO)对糖尿病大鼠创面组织中丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶-失调51样激酶1(uncoordinated 51 like kinase-1,ULK1)表达的影响,探讨MEBT/MEBO促进糖尿病创面愈合的可能机制。方法选取SPF级Wistar雄性大鼠90只,随机分为对照组、模型组和MEBO组,每组30只,其中对照组大鼠建立常规创面模型,模型组和MEBO组大鼠建立糖尿病创面模型。模型建立后,对照组及模型组大鼠创面予以生理盐水纱布外敷治疗,MEBO组大鼠创面予以湿润烧伤膏(moist exposed burn ointment,MEBO)药纱外敷治疗。分别于治疗第1、11、18天采用Western blotting法检测ULK1蛋白及qRT-PCR技术检测ULK1 mRNA的表达水平,并对比观察3组大鼠创面愈合情况。结果(1)治疗第1天,3组大鼠创面均淤血水肿,无肉芽组织形成;治疗第11天,对照组大鼠创面干燥,可见大片肉芽组织形成,模型组大鼠创面高度水肿,无肉芽组织形成,MEBO组大鼠创面轻微水肿,可见散在肉芽组织形成;治疗第18天,对照组大鼠创面完全愈合,模型组大鼠创面轻微水肿,可见散在肉芽组织形成,MEBO组大鼠创面干燥,可见大片肉芽组织形成。(2)治疗第11、18天,3组大鼠创面愈合率对比,对照组>MEBO组>模型组,组间两两对比,P均<0.05,差异具有统计学意义。(3)治疗第1天,3组大鼠创面组织中ULK1蛋白及ULK1 mRNA表达水平对比,对照组>MEBO组=模型组,对照组与MEBO组及对照组与模型组对比,P均<0.05,差异具有统计学意义;治疗第11天,3组大鼠创面组织中ULK1蛋白及ULK1 mRNA表达水平对比,对照组>MEBO组>模型组,组间两两对比,P均<0.05,差异具有统计学意义;治疗第18天,3组大鼠创面组织中ULK1蛋白及ULK1 mRNA表达水平对比,对照组=MEBO组<模型组,对照组与模型组及MEBO组与模型组对比,P均<0.05,差异具有统计学意义。结论MEBT/MEBO可有效促进糖尿病大鼠创面愈合,提高创面组织中ULK1表达水平,诱导细胞自噬可能是其作用机制之一。     

Beclin1在大鼠糖尿病溃疡创面组织中表达变化

目的 观察自噬相关蛋白(Beclin)1在糖尿病大鼠溃疡创面愈合中的变化，初步探讨Beclin1与糖尿病慢性创面愈合的关系。方法 SPF级Wistar雄性大鼠18只，随机分为对照组、模型组各9只。对照组建立常规创面模型，模型组建立糖尿病创面模型。两组分别于模型建立后第1天、第11天、第18天观察创面愈合情况、组织苏木素-伊红(HE)染色病理改变、Beclin1蛋白及其磷酸化水平、Beclin1基因表达。结果 对照组创面愈合效率、组织病理改善均优于模型组(P<0.05);对照组Beclin1、p-Beclin1蛋白及Beclin1 mRNA在创面愈合早期的表达高于模型组，而在愈合晚期的表达低于模型组，差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 Beclin1在糖尿病慢性创面组织中低表达，可能是糖尿病溃疡创面愈合不良的机制之一。