槟榔碱促结肠平滑肌细胞收缩及对胞内钙离子浓度的影响

目的:观察氢溴酸槟榔碱(Ah)促进培养的结肠平滑肌细胞收缩作用及对胞内游离Ca2 浓度的影响．方法:培养大鼠结肠平滑肌细胞,分为4组:正常对照组、Ah刺激组、乙酰胆碱(Ach)刺激组、阿托品预处理组．应用特异性Ca2 荧光批示剂Fluo-3／AM负载细胞,激光共聚焦显微镜检测游离Ca2 浓度和细胞收缩率．结果:正常对照组细胞未发生自主性收缩,因指示剂的衰减,荧光强度(FI)有递减的趋势; Ah刺激组在加药后短时间内胞内钙离子浓度迅速升高,出现一个波峰,FI平均基础值与峰值有差异(P<0．05),而后胞内钙离子浓度再缓慢攀升,在484．0±47．6 s达到高峰,而后有一个较长时间的平台期,在1 400 s左右恢复至静息水平,FI基础值与峰值有显著差异 (P<0．01),细胞收缩百分数为20．70％±0．07％; Ach刺激组在加药后胞内钙离子浓度升高,形成一个小波峰,FI基础值和峰值差异有显著性(P<0．01)．随后胞内钙离子浓度缓慢攀升, 在600 s左右达到高峰,而后有一个较长时间的平台期．FI基础值与峰值差异有显著性 (P<0．001);经阿托品预孵育处理后的细胞,加入Ah后,其收缩效应被完全抑制．结论:Ah可引起结肠平滑肌细胞收缩,升高细胞内游离Ca2 浓度．其收缩效应可以被M受体阻断剂阿托品所抑制．     

中医教学研究新思路探索

21世纪的医学教育将更加注重质量和人才素质的提高。中医学教学要改革,必须更新传统教学观念,促进现代教学理念的形成。我们在中医教学研究中就提高教学和学习效率、培养学生自主学习能力、发展学生高层次思维能力、培养创新型人才、加强实践教学环节探索了几点新思路。     

鼠结肠平滑肌细胞的分离、培养与鉴定

目的建立体外培养鼠结肠平滑肌细胞的方法。方法应用酶解法分离大鼠的结肠平滑肌细胞,用含10％胎牛血清的DMEM液进行鼠结肠平滑肌细胞的原代培养及传代,并以免疫细胞化学对其进行鉴定。结果新鲜分离的结肠平滑肌细胞呈梭形,核居中。培养24h后细胞开始贴壁,3～5d后开始增殖,14d后细胞密集,呈峰谷样生长。细胞经平滑肌特异性肌动蛋白a-actin鉴定,确定为平滑肌细胞。结论应用酶解法可得到急性分离的鼠结肠平滑肌细胞,用含10％胎牛血清的DMEM液重悬分离得到的结肠平滑肌细胞,经过10d左右的培养可以获得结肠平滑肌细胞。该方法重复性好,效果稳定。     

血塞通对急性冠脉综合征C-反应蛋白水平的影响

急性冠脉综合征（acute coronary syndrome，ACS）是冠状动脉粥样硬化斑块不稳定、破裂、出血及血栓形成所致冠状动脉管腔完全或不完全闭塞引起的临床上以急性心肌梗死和不稳定心绞痛为表现的综合征。越来越多ACS的研究证实，动脉粥样硬化不是简单的脂质沉积过程，局部或全身慢性炎症在粥样硬化斑块的发生、发展中也起重要作用。     

不同浓度氢溴酸槟榔碱对结肠平滑肌细胞钙离子移动和收缩力的影响

[目的]观察不同浓度的氢溴酸槟榔碱(Ah)对结肠平滑肌细胞钙离子(Ca2+)移动的影响,以探讨其对平滑肌收缩力的作用。[方法]取培养大鼠结肠平滑肌细胞,以荧光指示剂Fluo-3/AM负载,通过激光共聚焦显微镜(LSCM)动态观察不同浓度Ah对培养的结肠平滑肌细胞Ca2+移动的作用。[结果]Ah在1×10-10、1×10-9、1×10-8、1×10-7、1×10-6、1×10-5、1×10-4mol/L浓度刺激下可使结肠平滑肌细胞[Ca2+]i荧光强度(FI)逐渐升高(P<0.05),而在未加药以及1×10-13、1×10-12、1×10-11mol/L浓度刺激下对[Ca2+]iFI无影响(P>0.05);在1×10-3mol/L浓度刺激下细胞膜迅速发生破裂;应用阿托品预处理,则FI从4.28±1.51降至3.83±1.40(P>0.05)。[结论]Ah可使结肠平滑肌细胞内[Ca2+]i逐渐升高,阿托品可阻断Ah对平滑肌的收缩作用。     

大腹皮等七味中药对豚鼠离体胃纵行肌条的作用影响

目的观察大腹皮、蒲公英、莱菔子、白术、小茴香、莪术、香附等七味中药对豚鼠离体胃纵行肌条的收缩作用，以探讨归脾、胃经的不同性效中药的作用规律。方法制备豚鼠胃底胃体平滑肌条，以生理盐水（NS）和乙酰胆碱（Ach）作对照，观察中药大腹皮、蒲公英、莱菔子、白术、小茴香、莪术、香附对离体胃纵行平滑肌的收缩效应。结果七味中药对胃底胃体纵行肌条均有不同程度的兴奋作用？与生理盐水组比较，有显著性差异（P〈0．01）。以Ach标化实验数据，莱菔子的收缩作用最强，与其他五味中药比较，有统计学差异（P〈0．05），但与大腹皮无统计学差异（P〉0．05）。白术、蒲公英、小茴香的作用次之，无论在胃体还是胃底，莪术和香附的收缩作用均稍弱，与其他五味药比较挚有差异（P〈0.05）。结论在促进胃平滑肌收缩方面从性味看辛温药物较强，其次是苦甘味药物。将性味归经理论用于促胃动力研究是一个中西医结合药物研究的有效途径。     

参麦注射液对老年充血性心力衰竭患者血浆B型钠尿肽的影响

心力衰竭是各种心血管疾病的终末阶段，慢性充血性心力衰竭（CHF）的发病率在逐年增加，在我国，〉65岁人群CHF的患病率为4％～6％，研究表明，CHF患者血浆BNP浓度可迅速升高。本研究通过测定参麦注射液治疗前后血浆BNP水平，评价其在心力衰竭治疗中的作用。     

促结肠动力中药筛选及其机制

目的:探讨中药生白术、小茴香、蒲公英、莱菔子、大腹皮、莪术的促结肠动力作用,以筛选出具有开发价值的促结肠动力药物,并探讨其初步机制.方法:制备豚鼠结肠纵肌,以9g/L氯化钠溶液和乙酰胆碱为对照,观察6味中药对离体结肠肌条收缩活性的效应.实验结果以振幅(g)、时间(s)和曲线下面积(g·s)表示.分析对象为加药后5min内出现的最大波形.结果:该6味中药对肌条均有不同程度的兴奋效应,中药组(依次为大腹皮、莱菔子、蒲公英、小茴香、莪术、生白术)与生理盐水组相比,振幅峰值(0.97±0.40,0.95±0.26,0.87±0.49,0.85±0.26,0.78±0.39,0.60±0.25vs0.03±0.04,P<0.01)和曲线下面积(1.40±1.00,0.75±0.79,0.62±0.54,0.64±0.59,0.40±0.37,0.29±0.15vs0.11±0.06,P<0.05或P<0.01)均有显著性差异,以大腹皮作用最强,时间长达175±238.07s.在阿托品和维拉帕米分别预孵育情况下,加入各中药后与单独中药组的肌条收缩幅度增强的幅度明显减弱,两组间差异有显著性(中药 拮抗剂组vs中药组,P<0.05).结论:该6味中药对结肠平滑肌均有不同程度的兴奋效应,引起的收缩效应可被M受体阻断剂阿托品部分阻断,通过细胞外Ca2 内流介导.