滋养层细胞与原代白血病细胞共培养体系的建立及其意义

目的:建立一套体外培养前B急性淋巴细胞白血病(ALL)原代细胞的方法,并尝试进行难治性白血病克隆的鉴定。方法:采用来源于骨髓的基质细胞HS-5作为滋养层细胞与原代白血病细胞进行双相培养,并通过药敏和凋亡检测进行双相培养体系生物动力学评估。结果:双相滋养层培养体系能够耐受细胞毒药物的毒性;8例前B急淋白血病原代细胞标本在基质滋养层支持下离体72 h存活率20.4%~68.3%不等,与无滋养层支持或基质细胞上清液支持的标本相比存活率有显著性提高;其中1例标本的体外生长与有否滋养层支持无关,怀疑为难治性白血病克隆。结论:骨髓基质细胞来源的滋养层具有一定的体外支持白血病细胞存活的能力,但存在个体差异,与肿瘤细胞本身生物学特征有关;利用双相培养体系可以在体外早期初步鉴别出难治性白血病克隆并早期制定干预措施。     

FA方案巩固强化治疗急性髓系白血病的临床观察

目的探讨氟达拉滨联合中剂量阿糖胞苷即FA方案巩固强化治疗急性髓系白血病（acute myeloidleukemia,AML）的临床疗效及副作用。方法观察组28例AML患者采用FA方案进行巩固强化治疗,氟达拉滨30 mg/m2（1～3 d）,静脉滴注,阿糖胞苷2 g/m2,（1～3 d）,静脉滴注,阿糖胞苷在氟达拉滨结束后4 h应用。同期对照组10例AML患者采用大剂量阿糖胞苷进行巩固强化治疗,即Ara-C 3 g/m2,q12 h×3 d。结果 FA组28例AML患者CR时间为109～1 735 d,14例患者持续完全缓解（continuous complete remission,CCR）2年以上,（3年）生存率为21.4%,1 300 d（〉3年）的生存率为14.3%,与大剂量阿糖胞苷组没有统计学差异。7例患者于CCR后3～47个月复发,复发患者均存在各种不良预后因素,至少处于中高危分级。不良反应主要为骨髓抑制和继发感染,但总体而言骨髓抑制时间较短,非血液毒性较轻,住院时间在3周左右。结论氟达拉滨能提升胞内Ara-CTP浓度,增强抗白血病作用。FA方案多疗程巩固治疗低中危AML,能减少AML复发,提高总体生存率和无病生存率,临床疗效肯定,不良反应较少,值得进一步深入研究。     

中性粒细胞缺乏伴发热骨髓衰竭患者的病原菌分布及药敏情况分析

目的探讨中性粒细胞缺乏(粒缺)伴发热骨髓衰竭患者标本中病原菌分布及其耐药性情况。方法回顾性分析2012年1月至2015年1月上海市12家医院血液科1 260例粒缺伴发热骨髓衰竭患者标本中的病原菌分布特点及其药敏结果。采用纸片扩散法(K-B)检测分离菌株的药敏情况。采用WHONET5.6软件分析菌株的构成及药敏特点。结果共检出阳性菌174株,其中革兰阴性菌102株(58.6%),革兰阳性菌72株(41.4%)。排名前5位的病原菌分别为肺炎克雷伯菌(13.8%)、大肠埃希菌(9.2%)、铜绿假单胞菌(6.9%)、缓症链球菌(6.9%)、嗜麦芽窄食单胞菌(6.9%)。肠杆菌对氨苄西林、头孢呋辛、复方磺胺甲噁唑-甲氧苄啶等耐药率高(60.0%);非发酵菌除对氨苄西林耐药率高(88.2%)以外,对其他药物的耐药率均低于50.0%。检出2株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌及24株耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌;肠球菌对氨苄西林和左氧氟沙星耐药率较高(≥60.0%);未检出对利奈唑胺耐药的葡萄球菌和肠球菌。结论粒缺伴发热的骨髓衰竭患者致病菌以革兰阴性菌为主,肠杆菌和非发酵菌常见,且肠杆菌耐药情况较严重。葡萄球菌、肠球菌及肠杆菌的耐药情况均值得重视。     

静脉血栓栓塞症患者血小板相关因子mRNA显著性差异表达的意义

目的：研究血小板在静脉血栓形成过程中的作用。方法：通过基因表达谱芯片检测20例静脉血栓栓塞症（VTE）患者和20名健康对照者的血小板相关功能基因的mRNA表达水平，并比较2组间的差异。结果：VTE组血小板相关因子的mRNA表达与对照组相比有显著差异（P〈0．05）者只占所测基因的23．53％，其中黏附功能有3个基因mRNA表达升高（42．86％，P〈0．05）；聚集功能有4个基因mRNA表达升高（26．67％，P〈0．05）；释放功能有2个基因mRNA表达升高（12．50％，P〈0．05）。结论：血小板相关因子mRNA表达的差异性提示，在VTE过程中血小板仅发挥少部分功能，支持临床大规模试验所述的不提倡单独应用抗血小板药物治疗和预防VTE的结论，同时也提示静脉血栓形成的特殊性。     

感染性休克的诊治进展

感染性休克目前仍然是威胁人类健康的大问题,尽管医疗及护理技术在不断地进步,但其总体死亡率仍在不断增长.2008年国际专家们应用循证医学系统方法对近年来相关证据的质量以及建议等级进行再评价,对2004年指南的内容进行了更新和补充,以进一步改善感染性休克的预后.本文针对目前感染性休克的诊断和治疗进展进行综述.     

地西他滨联合CAG方案治疗老年急性髓系白血病疗效观察

目的比较地西他滨联合CAG方案与标准IA方案治疗老年急性髓系白血病患者的临床疗效及安全性。方法 回顾性分析20例接受地西他滨联合CAG方案、23例接受IA方案治疗的初发老年AML患者的临床资料,分别比较两组患者的总反应率(ORR)、总生存率(OS)及不良反应发生率。结果 43例患者的ORR为58.14%,地西他滨联合CAG组及IA组的ORR分别为65%、52.2%,两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。截至2015年8月31日,16例存活,25例死亡,2例失访,中位随访时间10(1～34)个月,2年OS率为11.63%,两组1年OS率分别为50%、39.13%,差异无统计学意义(P>0.05)。39例患者出现感染,25例有出血,两组患者在感染发生率、出血发生率差异无统计学意义。两组的红细胞输注量分别为5.35U、8.30U,单采血小板输注量分别为1.85U、3.48U,差异有统计学意义(P＜0.05)。结论 地西他滨联合CAG方案和IA方案治疗老年AML患者均有较好的疗效,地西他滨联合CAG方案CR率及OR率相对较高。两组治疗副反应相当,但地西他滨联合CAG组骨髓造血恢复较快。     

急性淋巴细胞白血病患儿血管内皮生长因子及其受体的表达与临床相关性的初步研究

目的观察不同危险程度分组的急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿血管内皮生长因子(VEGF)及其受体F lt-1和KDR的表达及与临床表现、疗效的关系。方法采用ELISA、RT-PCR方法检测正常儿童志愿者(20名)及ALL低危组(29例)、难治组(10例)、缓解组(20例)患儿VEGF及其受体表达,同时对不同分组ALL患儿的临床特点和指标进行参照对比分析。结果难治组患儿VEGF表达[(574.37±208.45)ng/L]高于低危组[(387.93±175.86)ng/L],后者又高于缓解组[(135.80±111.28)ng/L]和正常对照组[(91.16±41.34)ng/L],缓解组与正常对照组比较,差异无统计学意义;VEGF受体mRNA的RT-PCR检测结果从高至低依次为难治组、低危组、缓解组、正常对照组;不同分组VEGF及其受体表达结果与临床表现相吻合。结论高表达VEGF及其受体的患儿往往肿瘤负荷增高,尤其是在难治性ALL患儿中尤为明显,因此VEGF及其受体表达检测可能成为疾病预后的指标之一。     

嘌呤类药物作用及巯基嘌呤甲基转移酶遗传多态性的研究进展

嘌呤类药物作用及巯基嘌呤甲基转移酶遗传多态性的研究进展梁爱斌综述顾龙君审校目前研究结果表明，治疗急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）的抗嘌呤代谢药物——６－巯基嘌呤（６－ＭＰ）和６－巯代鸟嘌呤（６－ＴＧ）均是无内在生物活性的药物，必须通过体内一系列代谢后才能...     

2种CCK-8试剂最佳实验条件比较

正在细胞学实验中,MTT(噻唑蓝)比色法常用于细胞毒性、细胞活性和细胞增殖的检测。因MTT法具有简便、经济、安全等特点,而被广泛使用,但其操作较繁琐,需加入二甲基亚砜(DMSO)溶解甲臜颗粒,且往往因溶解不全而对实验结果造成影响,为克服MTT法的不足,近年来出现了另外一些检测试剂,如XTT试剂[1]、MTS试剂[2],国外研发出了1种新型的检测方法CCK-8(cell counting kit-8)[3],其原理为活细胞线粒体脱氢酶转化的黄色结晶为高度水溶性,不需要裂解细胞,可直接进行比色。     

特发性血小板减少性紫癜血小板生成素的测定及其临床意义

目的研究特发性血小板减少性紫癜(idiopathic thrombocytopenic purpura,ITP)患者血清血小板生成素(thrombopoientin,TPO)水平改变与疗效的关系。方法选取我院45例ITP患者(ITP组)和25例体检正常者(对照组),应用酶联免疫吸附法定量检测2组患者治疗前后TPO浓度,同时分别采用血细胞分析仪及骨髓涂片法检测治疗前后ITP患者外周血血小板和骨髓巨核细胞的数量,并根据治疗1个月后患者的疗效情况,将ITP患者分为治疗有效组和治疗无效组。结果 ITP组与对照组相比,血小板计数及巨核细胞计数差异显著,具有统计学意义(P<0.05),而TPO浓间差异无显著性,不具有统计学意义(P>0.05);治疗前,ITP组中治疗无效组的TPO浓度明显高于治疗有效组和对照组(P>0.05),而巨核细胞计数明显低于治疗有效组和对照组。结论血清TPO水平在ITP患者预后判断中具有重要意义。