脯氨酰寡肽酶抑制剂体外对肝星状细胞凋亡、增殖和肝纤维化相关基因表达的影响*

目的 体外探讨肝星状细胞（HSC）脯氨酰寡肽酶（POP）的生物学功能,以进一步阐述其在肝脏炎症和纤维化发生发展中的作用。方法 取HSC-T6细胞,经不同浓度的POP抑制剂（S17092）处理,采用ELISA法检测HSC-T6细胞N-乙酰基-丝氨酸-天冬氨酸-赖氨酸-脯氨酸（Ac-SDKP）水平,使用流式细胞术和CCK8检测HSC-T6凋亡和增殖水平,采用实时定量-PCR法检测相关炎症和肝纤维化基因转化生长因子-β1（TGF-β1）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、Ⅰ型胶原（Col I）水平,采用Western blot法检测相关蛋白（POP、TGF-β1、α-SMA、Smad7、p-Smad2/3、PPAR-γ）表达。结果 与对照组比,POP抑制剂干预组细胞内Ac-SDKP水平显著下降（P<0.05）;POP被抑制后对HSC-T6凋亡没有显著的影响（P>0.05）,但可抑制其增殖（P<0.05）;与对照组比,抑制剂组HSC内α-SMA蛋白表达显著升高（P<0.05）,而Smad7和PPAR-γ蛋白表达显著下降（P均<0.05）;抑制剂组HSC内MCP-1和α-SMA mRNA水平显著上调（P均<0.05）。结论 POP在肝星状细胞内可能发挥重要的抗炎抗纤维化作用,其机制可能与其调节Ac-SDKP及Smad7和PPAR-γ的表达有关。