可注射GelMA水凝胶搭载CD271与PDGF修复骨缺损的实验研究

目的：探讨负载CD271与血小板衍生生长因子(PDGF)的可注射甲基丙烯酸明胶(GelMA)水凝胶支架在SD大鼠颅骨缺损修复中的效果。方法：利用5%的GelMA水凝胶与PDGF共同构建得到GelMA/PDGF支架,然后将CD271抗体对支架进行修饰。实验共分为GelMA、GelMA/PDGF、GelMA/CD271、GelMA/PDGF/CD271 4组。通过水凝胶支架与雄性SD大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)在体外共同培养,检测细胞的生物相容性及成骨相关蛋白的表达情况;颅骨缺损模型使用的动物为质量约350 g的SD雄性大鼠,并在骨缺损处植入水凝胶支架;大鼠颅骨在术后8周接受Micro-CT检测以评估修复效果。结果：BMSCs与负载CD271与PDGF的GelMA水凝胶支架具有良好的生物相容性,可提高成骨相关蛋白(碱性磷酸酶、Ⅰ型胶原蛋白、骨钙素和骨桥蛋白)的表达(P<0.05),并可促进修复体内颅骨的缺损。结论：负载CD271与PDGF的混合水凝胶支架具有良好的生物相容性,在骨组织工程中极具应用潜力,能促进BMSCs的成骨分化。     

峡部甲状腺乳头状癌颈部淋巴结转移的危险因素研究

目的通过分析峡部甲状腺乳头状癌（PTC）患者的结节超声特征探讨颈部淋巴结转移的危险因素。方法回顾性分析2014年6月至2017年3月浙江大学医学院附属杭州市第一人民医院手术证实为峡部PTC86例患者的结节超声特征,根据病理结果有无颈部淋巴结转移分为转移组24例和无转移组62例,比较两组患者的结节超声特征,采用logistic回归分析其与颈部淋巴结转移的相关性,应用ROC曲线分析结节平均内径对峡部PTC诊断的灵敏度和特异度。结果转移组突破甲状腺包膜的颈部淋巴结转移发生率高于无转移组,差异有统计学意义（P＜0.01）。logistic回归分析表明,结节平均内径是峡部PTC颈部中央区淋巴结转移的危险因素（OR=0.814,P＜0.01）。以结节平均内径预测峡部PTC患者发生颈部中央区淋巴结转移的AUC为0.788,最佳截断值为7.9mm,灵敏度为80.6%,特异度为75.0%。结论结节平均内径以及甲状腺是否突破背膜是峡部PTC发生颈部淋巴结转移的主要危险因素。     

经会阴前列腺穿刺活检医院感染原因分析

目的探讨直肠超声引导下经会阴前列腺穿刺活检发生医院感染等并发症的原因和防治措施,从而减少前列腺穿刺感染率。方法回顾性分析1995年6月-2012年12月在医院超声介入科行直肠超声引导下经会阴部前列腺穿刺活检患者1 568例临床资料,分析引发感染等并发症的相关因素及防治措施。结果发生感染98例,感染率6.25%,出现肉眼血尿294例、尿潴留65例、血管迷走神经反射、血尿合并血精19例、发热12例、会阴部肿胀伴出血9例,发生率分别为18.75%、4.15%、1.66%、1.21%、0.77%、0.57%;发生并发症患者的穿刺次数多于无并发症患者,穿刺针外径大于无并发症患者,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论经直肠超声引导下经会阴部前列腺穿刺活检是早期诊断前列腺癌的安全有效的方法,穿刺后出现感染等并发症与穿刺次数及穿刺针粗细有很大的关系,合理的穿刺次数和穿刺针外径是降低这些并发症发生的重要因素。     

经直肠超声引导下经会阴前列腺改良穿刺法的价值

目的评价经直肠超声（transrectal ultrasonography，TRUS）引导下经会阴前列腺改良穿刺法在前列腺穿刺活检中的作用，以期寻找有助于提高前列腺癌（Prostatic Cancer PCa）检出率的手段或方法。方法对151例前列腺特异性抗原（prostate specific antigenPSA）升高（〉4ug／L）和（或）TRUS发现有结节的患者在经直肠超声引导下经会阴行前列腺改良穿刺活检，穿刺标本送病理检查。结果151例患者中，共检出PCa49例（32％），上皮内瘤12例（8％），慢性炎症48例（32％），良性增生42例（28％）。与标准系统穿刺法相比，改良穿刺法可将PCa的检出率提高18％。本组资料有25例（17％）的患者术后出现血尿，无其它并发症发生。结论经直肠超声引导下经会阴前列腺改良穿刺法，有助于提高PCa的检出率。     

超声与MRI融合导航穿刺在前列腺癌Gleason分级中的应用研究

目的采用MRI与经直肠超声（TRUS）影像融合靶向穿刺方法进行前列腺癌筛查,探讨融合导航穿刺在前列腺癌Gleason分级中的应用价值。 方法选取2016年12月至2019年3月于浙江大学医学院附属杭州市第一人民医院因可疑前列腺癌行穿刺活检的患者150例,所有患者均先行MRI/TRUS融合导航穿刺,再行常规10针系统穿刺。所有穿刺阳性患者均行腹腔镜下前列腺癌根治术,并取得手术病理结果。比较融合导航穿刺与系统穿刺2种方法对前列腺癌的检出率,将2种方法分别与根治手术标本的Gleason评分情况进行对比分析。 结果150例患者中,共检出前列腺癌72例,其中导航穿刺方法前列腺癌检出率为45.3%（68/150）,系统穿刺方法检出率为40.7%（61/150）,2者比较差异无统计学意义（χ²=0.666,P=0.414）。导航穿刺方法对于Gleason评分≥8分的高危前列腺癌患者的检出率高于系统穿刺（33.8% vs 18.0%）,2者比较差异有统计学意义（χ²=4.131,P=0.042）。导航穿刺与根治术标本Gleason评分符合率为72.1%（49/68）,系统穿刺为54.1%（33/61）,导航穿刺Gleason评分符合率高于系统穿刺法（χ²=4.479,P=0.034）。 结论MRI/TRUS融合导航穿刺获得的前列腺组织标本Gleason分级准确性高,可以增加高危前列腺癌的检出率,为临床治疗决策的制定提供客观依据,其对于前列腺癌的准确诊断和合理治疗具有重要的临床应用价值。     

肝豆汤联合青霉胺对Wilson病模型肝脏铜死亡抑制作用

目的 观察肝豆汤联合青霉胺对Wilson病（WD）模型肝脏铜死亡的抑制作用。方法 以淡化致死基因（DL）小鼠为正常组,将毒牛奶（TX）小鼠随机分为模型组、肝豆汤组、青霉胺组和肝豆汤联合青霉胺组,每组8只。正常组及模型组予以0.9%氯化钠溶液0.2 mL/（10 g·d）,肝豆汤组、青霉胺组和肝豆汤联合青霉胺组分别予以肝豆汤浓缩液0.2 mL/（10 g·d）,青霉胺0.1 g/（kg·d）,肝豆汤浓缩液 0.2 mL/（10 g·d）联合青霉胺0.1 g/（kg·d）,连续灌胃30天。采用生化法、电感耦合等离子体-质谱法（ICP-MS）、HE染色、透射电镜、实时荧光定量PCR、Western Blot法和免疫组织化学法检测各组小鼠血清学指标和肝脏铜含量、病理改变、线粒体超微结构、铜死亡相关基因和蛋白以及硫辛酸（LA）的表达水平。结果 与正常组比较,模型组血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）水平,乳酸脱氢酶（LDH）、超氧化物歧化酶（SOD）活性和肝组织铜含量升高（P＜0.05）,肝脏局部碎片状坏死,炎性细胞数升高（P＜0.01）,线粒体损伤显著,铜死亡相关基因mRNA,铁硫簇蛋白、硫辛酰化蛋白、LA表达水平下降（P＜0.05）,二氢硫辛酸转乙酰基酶（DLAT）二聚体和热休克蛋白70（HSP70）表达水平升高（P＜0.01）。与模型组比较,各治疗组血清ALT、AST水平,LDH、SOD活性及肝组织铜含量下降（P＜0.05）,肝脏病理损伤减轻,炎性细胞数降低（P＜0.01）,线粒体结构恢复,铜死亡相关基因mRNA、铁硫簇蛋白、lipDLAT、 lipDBT、 lipDLST、LA表达水平升高（P＜0.05）,DLAT二聚体下降（P＜0.05）。与青霉胺组比较,肝豆汤联合青霉胺组 ALT、 AST 水平下降（P＜0.05）,肝组织铜含量降低（P＜0.01）,PDHB mRNA 表达、铁硫簇蛋白、硫辛酰化蛋白表达升高（P＜0.01,P＜0.05）,DLAT二聚体、HSP70 表达下降（P＜0.01）。结论 肝豆汤联合青霉胺可促进铜排出并上调LA途径相关蛋白的表达,减轻WD模型肝脏铜死亡。肝豆汤对青霉胺治疗WD具有辅助增效作用。     

肝豆汤对Wilson病模型铜负荷大鼠肝脏Wnt/β-catenin信号通路的调控作用

目的：探讨肝豆汤对铜负荷大鼠肝脏中分泌型糖蛋白（Wnt）/β-连环蛋白（β-catenin）信号通路的调控作用及机制。方法：SD大鼠115只随机分为正常组（20只）、造模组。造模组予以1 g·kg^-1·d^-1的硫酸铜饲料及0.02 mL·g^-1·d^-1的0.185%硫酸铜溶液连续喂养12周;造模成功大鼠随机分为模型组（45只）,肝豆汤组（25只）和青霉胺（PCA）组（25只）;模型组、肝豆汤组和PCA组分别予以0.02 mL·g^-1·d^-1生理盐水,0.4 g·kg^-1·d^-1的中药肝豆汤和0.09 g·kg^-1·d^-1青霉胺灌胃,连续4周,末次灌胃后取各组大鼠肝脏组织检测：电感耦合等离子体原子发射光谱法（ICP-AES）检测各组大鼠肝铜含量;苏木素-伊红（HE）染色观察各组大鼠肝脏组织病理改变,免疫组织化学法检测肝脏组织氧化应激相关蛋白的表达,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测肝组织中Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白的表达水平。结果：ICP-AES法结果显示,与正常组比较,模型组大鼠肝脏铜含量显著升高（P<0.01）;肝豆汤可降低铜负荷大鼠肝脏铜含量（P<0.05）,PCA可显著降低模型组大鼠肝脏铜含量（P<0.01）;HE染色结果显示,与正常组比较,模型组大鼠肝脏组织镜下可见肝细胞大小不一、排列紊乱,部分肝索丧失;肝豆汤组和PCA组细胞损伤程度较模型组明显降低;免疫组化结果显示：肝豆汤和PCA可显著降低模型组8-羟基脱氧鸟苷（8-Hydroxyguanosine）,硝基酪氨酸（Nitrotyrosine）蛋白表达量（P<0.01）;Western blot结果显示,肝豆汤和PCA可使铜负荷大鼠肝脏内Wnt通路相关蛋白β-连环蛋白（β-catenin）,磷酸化糖原合成激酶3β（glycogen synthase kinase-3,p-GSK3β）,原癌基因（cellular myelocytomatosis oncogene,c-Myc）蛋白表达量显著增加（P<0.01）。结论：肝豆汤可通过促进过量铜排出减轻高铜诱导的肝脏损伤,并通过激活肝脏Wnt/β-catenin信号通路促进损伤的肝组织代偿性自愈以达到减轻高铜诱导氧化应激损伤的治疗效果。     

青少年抑郁症述情障碍和家庭功能及其与抑郁的相关性研究

目的 探索青少年抑郁症患儿述情障碍和家庭功能特征及其与抑郁的相关性。方法 选取2020年12月至2023年5月于杭州市第一人民医院就诊的131例青少年抑郁症患儿作为研究组,另选取280例健康青少年作为对照组,采用儿童抑郁量表(CDI)评定抑郁严重程度、多伦多述情障碍20条目量表中文版(TAS-20)评定述情障碍、中文版儿童用家庭功能评估量表(FFAS-C)评估家庭功能。比较两组儿童的CDI、TAS-20和FFAS-C量表评分,并采用Pearson相关分析法分析研究组CDI评分与TAS-20和FFAS-C量表评分的相关性。结果 研究组儿童的CDI总分及各因子分、TAS-20总分及各因子分、FFAS-C总分及各因子分明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);研究组儿童的TAS-20和FFAS-C总分异常比例分别为88.3%和48.3%,明显高于对照组的26.1%和13.3%,差异均有统计学意义(P<0.05);经Pearson相关分析结果显示,研究组患者的抑郁症严重程度与述情障碍严重程度和家庭功能异常严重程度均呈正相关(P<0.05)。结论 青少年抑郁症存在述情...     

有精神症状的功能性消化不良患者血浆obestatin、ghrelin水平的变化及其与精神症状的相关性

[目的]探讨有精神症状的功能性消化不良(functional dyspepsia,FD)患者的肥胖抑制素(obestatin)及胃促生长素(ghrelin)的水平变化及其与焦虑/抑郁状态的相关性。[方法]采用ELISA法测定41例伴有精神症状的FD患者(FD组)和40例健康体检者(对照组)的血浆obestatin和ghrelin水平。[结果]FD组血浆obestatin水平较对照组明显升高(P0.05);FD组血浆ghrelin水平较对照组明显降低(P0.01);血浆obestatin水平与HAMA及HAMD评分均呈正相关(r=0.131,P0.05;r=0.106,P0.05);血浆ghrelin水平与HAMA及HAMD评分均呈负相关(r=-0.428,P0.01;r=-0.462,P0.01)。[结论]有精神症状的FD患者的血浆obestatin水平高于对照组,且与焦虑/抑郁状态呈正相关;ghrelin水平低于对照组,且与焦虑/抑郁状态呈负相关。     

肝豆汤改良方对Wilson's病模型TX乳鼠神经元内Cyt C/Caspase信号通路的分子调控机制

目的:探讨肝豆汤改良方调控TX乳鼠神经元内细胞色素C(Cyt C)/半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)信号通路的分子靶点并观察其相应的调控机制。方法:本实验乳鼠神经元通过原代方法分离培养所得,分为正常组、模型组、肝豆汤改良方组、丁苯酞组,正常组为正常DL乳鼠神经元,用完全培养基培养,模型组为TX乳鼠神经元,用10%空白兔血清培养,肝豆汤改良方组为TX乳鼠神经元,加入含体积浓度(5%,10%,15%,20%)肝豆汤改良方兔血清的培养基继续培养,丁苯酞组为TX乳鼠神经元,用10%含丁苯酞兔血清培养。采用原子吸收分光光度法检测不同浓度含肝豆汤改良方兔血清作用24 h后,对TX乳鼠神经元内微量元素的影响;流式细胞仪检测经肝豆汤改良方兔血清作用后活性氧(ROS)释放量的变化;蛋白质免疫印迹(Western blot)法检测经含肝豆汤改良方兔血清作用后Cyt C,Caspase-9,Caspase-3蛋白的表达。结果:与模型组比较,含肝豆汤改良方兔血清可显著降低TX乳鼠神经元内铜、铁含量,增加锌含量(P0.01)。流式细胞仪检测发现,含肝豆汤改良方兔血清较模型组可显著降低TX乳鼠神经元内ROS的释放量(P0.01)。Western blot检测结果显示与模型组比较,含肝豆汤改良方兔血清可显著降低TX乳鼠神经元内Cyt C,Caspase-9,Caspase-3蛋白表达(P0.01)。结论:肝豆汤改良方可能是通过促进过量铜排出而抑制神经元内Cyt C,Caspase-9,Caspase-3表达,从而减轻高铜对神经元的损伤作用。肝豆汤改良方可通过减少脑内铜含量,进而调控Cyt C/Caspase信号通路达到减轻高铜诱导的神经元损伤的治疗效果。