某煤矿职工血脂检测结果分析

随着生活水平的不断提高,高血脂的患者越来越多,严重威胁人类的健康.血脂增高与饮食习惯、生活方式或工作性质等因素密切相关.本研究旨在了解煤矿职工脂类代谢状况,对铁法能源公司参加2010年度健康体检的259例男性矿工的总胆固醇和甘油三酯水平进行了检测和相关分析.     

乙型肝炎病毒全基因组研究的新方法

目的为从全基因水平研究乙型肝炎病毒变异与致病性的关系，建立血清标本经聚合酶链反应（ＰＣＲ）加酶切方法扩增及克隆ＨＢＶ全基因组的新方法。方法设计了含ＳｐｅⅠ，ＳａｌⅠ及ＳａｐⅠ酶切点的引物，分别扩增１．１５ｋｂ和２．０５ｋｂ的单链及双链ＤＮＡ区。经酶切及连接后获得ＨＢＶ全基因克隆。结果用新建立的方法直接从少量血清中克隆了ＨＢＶ全基因，转染ＨｅｐＧ２细胞可表达抗原并有胞内复制。结论该法可用于对临床上ＨＢＶ毒株的基因结构和功能的研究     

CNVplex技术在自然流产检测中的应用

目的:研究分析运用CNVplex高通量多重基因拷贝数检测技术对早期自然流产患者胚胎绒毛组织的染色体数目检测的临床价值。方法:在早期自然流产患者中随机抽取20例为研究对象,用CNVplex高通量多重基因拷贝数检测技术对患者胚胎绒毛组织的13号染色体、18号染色体、21号染色体及性染色体数目进行快速检测。结果:通过CNVplex技术与染色体核型分析技术的对比,20例中有2例由于细胞培养失败而无法进行核型分析,其他18例用两种方法检测出的结果一致;其中检测出染色体数目异常的有12例,占总比的60%。结论:CNVplex技术在自然流产胚胎绒毛组织的染色体数目异常诊断中具重要价值,为产前筛查及流产儿病因确认提供临床参考。     

1747例非淋菌性尿道(宫颈)炎病原体检测及支原体药物敏感分析

我科于2004年7月～2007年7月对门诊支原体、衣原体检测阳性的1747例NGU患者进行了认真的登记与统计.检测内容包括沙眼衣原体(CT)、解脲支原体(UU)和人型支原体(MH)并对支原体进行药敏试验,为临床抗生素选择提供参考依据.     

慢性乙型肝炎患者外周血中HBV特异性CD3+ T细胞的研究

目的：研究慢性乙型肝炎患者外周血中可作用于病毒感染靶细胞的特异性CD3^ T细胞比率，方法：筛选HLA－A2患者：将MHC：Ig双体融合蛋白试剂，加入HBV核心蛋白（C），聚合酶蛋白（P）及表面抗原蛋白（S）中HLA－A2限制性合成肽，与患者CD3^ 细胞作用，采用双重荧光抗体染色，用FACS检测各患者的特异性T细胞比率，同时设立各种对照管，结果：23／54例（42．6％）患者为HLA－A2，其中15例经用HBV C，P，S肽染色后，5例患者的特异性CD3^ 阳性细胞比率高于对照管，4例患者有结合S肽的特异性CDs^3 细胞，其中1例同时可结合P肽，1例仅与P肽结合，结论：慢性乙型肝炎患者外周血中与特异性肽结合的CD3^ T细胞比率较少，MHC：Ig双体融合蛋白技术使用方便，但非特异性染色率偏高，本技术可用于随访治疗中的慢性乙型肝炎患者免疫状态的变化。     

外周血单个核细胞中乙型肝炎病毒前S/S基因变异的研究

目的研究外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）中乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）包膜抗原基因变异的意义。方法收集１９例慢性乙肝患者的ＰＢＭＣ和配对血清,用ＰＣＲ扩增ＰＢＭＣ及血清中ＨＢＶ包膜基因片段（Ｓ,ｐｒｅＳ１,ｐｒｅＳ２）,并对其中各５例ＰＢＭＣ及配对血清中的ｐｒｅＳ１和ｐｒｅＳ２基因片段,分别进行核苷酸序列分析。结果Ｓ、ｐｒｅＳ１和ｐｒｅＳ２片段在血清和ＰＢＭＣ中的检出率,分别为１００％、９４７％、１００％和０、２６３％、２６３％。与ＨＢＶＡＤＲ序列比较,１０份标本ＨＢＶＤＮＡ核苷酸序列分析,发现２份ｐｒｅＳ１和３份ｐｒｅＳ２的核苷酸序列,没有发生改变;８份ｐｒｅＳ１和７份ｐｒｅＳ２的核苷酸序列,均发生了一个至多个位点的点突变。结论ＰＢＭＣ中存在的包膜基因不完整,因而不会形成完整的ＨＢＶ病毒颗粒,故不支持ＨＢＶ可潜伏于ＰＢＭＣ并发展成为体内ＨＢＶ再感染的来源。ｐｒｅＳ１点突变编码的氨基酸位点,集中在ａａ２１～４７区域,可能会影响ＨＢＶ的吸附和穿入,及组织亲嗜性的改变。ＨＢＶ亚基因片段在ＰＢＭＣ中,是否会影响细胞的功能,有待进一步研究。     

免疫途径及载体对乙肝病毒DNA疫苗免疫效果影响的研究

目的探讨ＤＮＡ载体结构及接种途径对ＤＮＡ疫苗免疫效果的影响。方法分别构建插入ＨＢＶ表面抗原编码基因的表达载体ｐｃＤＮＡ１．１／ＳＡ（无抗性基因）和ｐｃＤＮＡＩ／Ａｍｐ／ＳＡ（含氨苄青霉素抗性基因）,肌注小鼠后比较其诱生特异性免疫应答的能力;同时比较不同接种途径（肌内、皮内、皮肤划痕）及ＣｐＧ免疫刺激元件（ＩＳＳ）对ＤＮＡ疫苗诱生免疫效果的影响。结果ｐｃＤＮＡＩ／Ａｍｐ／ＳＡ的免疫效果优于ｐｃＤＮＡ１．１／ＳＡ。ｐｃＤＮＡ１．１／ＳＡ的免疫效果可被ＩＳＳ增强,而ｐｃＤＮＡＩ／Ａｍｐ／ＳＡ诱生特异性免疫应答的能力则可被ＩＳＳ抑制;诱生免疫应答的能力以肌内注射最强,皮内注射免疫其次,皮下划痕法较弱。结论不同ＨＢｓＡｇ表达载体诱生免疫应答的能力不尽相同;ＣｐＧ免疫刺激元件在决定ＤＮＡ疫苗免疫原性中起重要作用,可增强不含相应结构ＤＮＡ疫苗的免疫效果;皮内注射可诱发与肌内接种相似的免疫应答,是一种简便、有效的免疫接种途径     

抗原-抗体复合物型治疗性乙型肝炎疫苗的研究历程及进展

乙型肝炎(简称乙肝)是我国感染病中最常见的疾病.虽然核苷类(核昔酸类)抗病毒药物对慢性乙肝治疗已取得较大成果,但调动患者的免疫应答也是控制和治疗慢性乙肝不可缺少的治疗措施.抗原一抗体复合物型(IC)治疗性乙肝疫苗自1988年获同家高技术研究发展计划(863计划)资助以来,已经历20年的历程,现将研究历程及进展综述如下.     

克隆乙型肝炎病毒DNA在肝与肾细胞中复制与表达的研究

对比研究在外细胞培养系统中乙型肝炎病毒在肝,紧名的复制与表达。方法髟克隆ＨＢＶＤＮＡ分别转染ＨｅｐＧ２与２９３细胞系;ｐ１７７ｔｎ与ｐ３．８Ⅱ还转染了原代人胚肾细胞。培养后收集转染细胞培养上清液,用ＥＬＩＳＡ法检测ＨＢｓＡｇ与ＨＢｅＡｇ;提取转染细胞的ＤＮＡ与ＲＮＡ,进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ与Ｎｏｒｈｅｒｎ印迹杂交检测细胞内ＨＢＶＤＮＡ与ＨＢＶＲＮＡ。结果转染ＨｅｐＧ２细胞,ＨＢｓＡｇ与ＨＢｅＡｇ均有