rDNA ITS2区段基因序列分析技术用于江苏省疟疾疫情不稳定地区传疟媒介的鉴定

目的了解江苏省近年来疟疾疫情回升地区媒介按蚊种类。方法采用rDNA ITS2区段基因序列分析技术，对半通宵室外人饵诱捕法和清晨蚊帐内捕蚊法捕获的现场按蚊进行蚊种鉴定。结果经形态学鉴定和PCR基因扩增，并与实验室模式种中华按蚊、嗜人按蚊、八代按蚊、雷氏按蚊DNA基因比较，现场捕获的按蚊均为中华按蚊。结论中华按蚊仍是目前江苏省疟疾疫情回升地区的主要传疟媒介。     

江苏省2008-2009年疟疾媒介按蚊监测结果分析

目的了解江苏省疟区中华按蚊种群数量、密度的发展变化趋势和对杀虫剂的敏感性。方法在疟疾流行季节,采用人饵诱捕法、猪舍捕蚊法和WHO推荐的接触筒强迫接触法,观察接触10、15、20、30、40、50、60min时蚊虫对杀虫剂的击倒率和24h时死亡率。结果 2008年6月下旬至10月上旬半通宵帐内人饵共捕获按蚊322只,经鉴定均为中华按蚊,平均叮人率为1.61只/(人.h);猪舍内共捕获按蚊886只,经鉴定均为中华按蚊,平均密度为147.66只/人工小时;中华按蚊对溴氰菊酯已达到抗性(R)水平;对氟氯氰菊酯为初步抗性(M)水平。2009年6月下旬至10月上旬半通宵帐内人饵共捕获按蚊349只,经鉴定均为中华按蚊,平均叮人率为1.25只/(人.h);猪舍内共捕获按蚊652只,经鉴定也均为中华按蚊,平均密度为108.67只/人工小时。中华按蚊对溴氰菊酯抗性为R级水平;对马拉硫磷抗性也为R级水平。结论江苏省部分疟区中华按蚊已对溴氰菊酯产生抗性,对氟氯氰菊酯已产生初步抗性。今后,在采用杀虫剂浸泡蚊帐或室内滞留喷洒等方法对暴发点或疫情不稳定地区进行处理时,应选择适合的杀虫剂,以达到防制效果;同时为控制疟疾发病,应加强对当地居民的健康教育,提高防蚊意识,减少人蚊接触机会。     

2019年江苏省疟疾疫情分析

目的　分析2019年江苏省疟疾疫情,为制订防止疟疾输入再传播监测策略和措施提供科学依据。方法　收集2019年江苏省疟疾病例报告信息、流行病学个案调查、疫点调查与处置结案报告等疟疾疫情资料,并采用描述性方法进行分析。结果　2019年江苏省累计报告疟疾病例244例,均为实验室确诊的境外感染输入性病例,其中间日疟4例、恶性疟206例、三日疟12例、卵形疟22例;11例发展为重症病例,1例死亡。全省13个设区市报告病例数居前5位的依次为南京、南通、连云港、泰州、常州,报告的疟疾病例数占全省报告病例总数的59.84%。2019年报告的244例疟疾病例中,2例感染地为大洋洲巴布亚新几内亚、1例为亚洲巴基斯坦,其他241例均为非洲的27个国家或地区,其中输入来源较多的国家为安哥拉、刚果民主共和国、尼日利亚、赤道几内亚和科特迪瓦。244例疟疾病例中,在发病当天和发病后1～3 d就诊分别有77例（31.55%）和146例（59.84%）,首次就诊和就诊后1～3 d确诊分别有149例（61.06%）和77例（31.55%）,从就诊到确诊平均时间为（0.80 ± 1.59）d,较2018年的（1.34 ± 2.59）d显著缩短（U = 2.53,P < 0.05）。结论　江苏省应继续加强输入性疟疾监测和管理,提高输入性疟疾诊断能力和危重疟疾病例救治能力,以巩固消除疟疾成果。     

复式PCR检测间日疟原虫和恶性疟原虫的现场应用

目的探讨复式PCR方法在疟疾诊断中的现场应用价值。方法根据疟原虫18 S rRNA基因序列,合成疟原虫属特异性上游引物和间日疟原虫、恶性疟原虫种特异性下游引物,优化PCR反应体系,建立在同一PCR反应体系中同时检测间日疟原虫、恶性疟原虫基因组特异性DNA片段的疟疾诊断方法,并评价其现场应用价值。结果间日疟原虫和恶性疟原虫基因组DNA经过复式PCR后,分别扩增出1 451 bp和833 bp的特异性条带,而伯氏疟原虫、食蟹猴疟原虫及健康人血样均无扩增带出现,用该反应体系可检出原虫血症为1.1×10-6和5.6×10-7的间日疟原虫和恶性疟原虫感染。与镜检法相比,复式PCR检测119份现场样本,112份与镜检结果相同,阳性率为54%,漏诊率为0.8%,误诊率为0,而镜检法依次分别为53%、1.7%和3.4%。结论复式PCR方法检测疟原虫具有简便、快速、特异、敏感等优点,在疑似病例的鉴别诊断和分子流行病学调查中具有良好的应用价值。     

我国不同地区嗜人按蚊发育时间观察

目的观察我国不同地区嗜人按蚊在发育时间上的差异。方法在实验室条件下,采用相同的饲养方法,分别观察不同地区嗜人按蚊的孵化率、蛹化率和羽化率。结果江苏、四川、广东嗜人按蚊卵期平均为2.22、3.11、3.28d,卵孵化率分别为72.0%、56.0%、81.0%(P<0.01);幼虫期平均为8.44、6.76d和10.75d(P<0.05),蛹化率分别为94.4%、98.2%和90.1%;蛹期平均为1.78、1.78d和1.77d,羽化率均为100.0%。结论我国不同地区嗜人按蚊在发育时间上有差异,而这种差异是否会导致生态学上的改变有待进一步观察。     

江苏省2008年疟疾监测分析

[目的]了解江苏省疟疾的流行现状及其影响因素.掌握疟疾流行规律和趋势.[方法]根据疟疾发瘸情况.选择近年来发病率较高的睢宁县官山镇、铜山县棠张镇、泗洪县天岗潮镇、盱眙县仇集镇和宜兴市张渚镇作为疟疾监测点调查居民疟疾发病情况、疟疾症状及防蚊措施、按蚊密度及叮人率等相关影响因素.[结果]2008年共调查5 677户,19 142人,蚊帐拥有率为33.95%;蚊帐使用率为50.35%.血检10 049人,平均血检率为4.48%,检出疟原虫阳性17人,平均阳性率为0.17%.[鲒论]中华按蚊密度明显增高及对菊酯类灭蚊剂产生抗性,是江苏省淮北地区出现疟疾疫情反复的因素之一.     

2015年江苏省疟疾疫情流行病学分析

目的 掌握江苏省2015年疟疾疫情及流行特征,为如期实现本省的消除疟疾目标提供依据。方法 对2015年全省网络报告疟疾疫情和专报系统的流行病学调查资料进行统计分析。结果 2015年江苏省共报告疟疾405例,较2014年（355例）上升14.08%。均为境外输入病例,5例（1.23%）来自东南亚,400例（98.77%）来自25个非洲国家或地区。全省13个市均有输入性疟疾病例报告,其中泰州市、连云港、南通市、淮安市和扬州市报告病例数占全省总数的68.64%（278/405）。省疟疾诊断参比实验室对405份样本进行复核,发现恶性疟299例、间日疟13例、三日疟18例、卵形疟71例、混合感染4例。结论 江苏省已连续4年无本地感染疟疾病例,但境外输入性疟疾病例仍呈上升趋势,且输入性间日疟病例较2014年明显增加。加强境外输入性疟疾监测,提高各级医疗机构相关人员对疟疾的诊断和治疗能力、提升疾控机构专业人员病原复核、疫点调查和处置能力是本省疟疾防控工作的重点。     

中华按蚊细胞色素P450基因表达特征分析

目的 探讨6种溴氰菊酯抗性候选细胞色素P450（CYP）基因（CYP6M3、CYP6Y1、CYP6P5、CYP4H14、CYP4G17、CYP12F16）在中华按蚊体内的表达特征。方法 收集中华按蚊不同发育时期（卵、幼虫、蛹、雌性成蚊和雄性成蚊）和组织（唾液腺、马氏管、中肠、卵巢以及脂肪体）样本,以及雌性成蚊在暴露于不同溴氰菊酯剂量（0、1.25、3.75、6.25、12.5 μg/瓶）和时间（0,5、15、30、60 min）后的样本.提取总RNA,利用反转录实时定量PCR（qPCR）技术分析CYP6M3、CYP6Y1、CYP6P5、CYP4H14、CYP4G17、CYP12F16基因在中华按蚊不同发育时期、组织以及不同溴氰菊酯接触剂量和时间下的相对表达量。结果 CYP6M3与CYP6Y1基因在雄性中华按蚊成蚊体内的表达量最高,CYP6M3基因在雄性成蚊体内的表达量是雌性成蚊的35.1倍,CYP6Y1基因在雄性成蚊体内的表达量是雌性成蚊的61.4倍;CYP4H14基因在幼虫期表达量最低,且在雌性成蚊体内表达量是四龄幼虫体内表达量的22.5倍。候选CYP基因在中华按蚊不同组织内的表达量差异具有统计学意义,CYP6M3基因在马氏管内的表达量是在卵巢中的38.9倍,CYP6Y1基因在脂肪体内的表达量是在卵巢中的9.1倍,CYP6P5基因在中肠内的表达量是在卵巢中的30.3倍,CYP4G17基因在脂肪体内的表达量是在卵巢中的4.6倍,CYP12F16基因在马氏管内的表达量是在卵巢中的4.4倍。接触不同溴氰菊酯剂量和时间对候选CYP基因的表达水平表现出一定的诱导效应,影响候选CYP基因在中华按蚊体内的表达。结论 候选CYP基因在不同发育期中华按蚊体内和不同组织中差异表达,暴露于不同溴氰菊酯剂量和时间影响CYP基因在中华按蚊体内表达。     

疟疾生物样本库的构建与应用

目的 探索建立具有流行病学资料的疟疾生物样本库,实现疟疾样本管理信息化,为消除疟疾提供保障,并为相关研究提供资源。方法 以江苏省寄生虫病防治研究所为依托,自2011年起持续收集江苏省内疟疾病例（包括本地和输入性疟疾病例）资料,按照标准化操作流程收集入选患者的末梢血涂片、滤纸血、静脉血样本及分离培养虫株,并进行处理、分装和存储。应用样本库管理软件录入病例流行病学资料,并进行样本入库,定期对样本进行质量控制。结果 建立了疟疾生物样本库,实现从样本入库、保存,到出库的全程信息化管理。2011-2017年样本库共收集了江苏省报告疟疾病例中99.42%（2 223/2 236）的血涂片、92.58%（2 070/2 236）的滤纸血,94.50%（2 113/2 236）的静脉全血及2.06%（46/2 236）的恶性疟原虫培养株。依托样本库,对全省99.42%（2 223/2 236）的疟疾病例样本进行了镜检复核及82.74%（1 850/2 236）的病例样本进行了核酸检测复核。此外,还利用样本库开展了疟原虫抗药性监测、疟疾分子流行病学及疟疾诊断技术等相关研究。结论 疟疾生物样本库的建立不仅为消除疟疾工作提供了保障,同时也为疟疾相关研究提供了资源。     

江苏省巩固消除疟疾成果面临的挑战

目的 分析江苏省当前消除疟疾形势,明确该省巩固消除疟疾成果面临的主要挑战和困难,并寻找可行的解决方案。方法 召集江苏省13个设区市疾病预防控制中心疟疾防治负责人和江苏省寄生虫病防治研究所疟疾团队成员,随机分组后围绕“管理保障、病例诊治、现场流行病学调查（流调）和其他”等主题进行讨论;通过问卷调查的方式搜集相关信息,并对研讨会效果进行评估。结果 专家组27人分为3个小组进行讨论,参与问卷调查者27人,回收有效问卷24份。问卷调查有效参与者中79.1%（19/24）为中高级职称,66.7%（16/24）有10年以上工作经验。讨论前,仅有16.7%（4/24）的参与者非常了解当前全省疟疾防控面临的挑战和困难;讨论后,有87.5%（21/24）的参与者认为此次研讨会增进了对消除疟疾后面临挑战和困难的了解。通过主题讨论,专家组对疟防工作的管理保障、病例诊治、现场流调、其他等4个方面所存在的困难或挑战及解决方案进行了归纳总结,并形成框架。结论 当前江苏省巩固消除疟疾成果在管理保障、病例诊治、现场流调和疫点处置、消除后监测工作的可持续性等方面仍面临许多挑战和困难,探索可行的解决方案可为正在进行疟疾消除或已达到疟疾消除的地区提供借鉴。