两种超广谱β-内酰胺酶法检测174株肠杆菌科细菌的结果分析

目的 了解全自动微生物分析仪Vitek-32革兰阴性杆菌药敏卡检测肠杆菌科细菌超广谱β-内酰胺酶(extended-spectrum β-laetamases，ESBLs)的准确性，探讨Vitek-32在肠杆菌科细菌ESBLs检测中出现的一些问题。方法 用Vitek-32仪器法中的革兰阴性杆菌药敏卡(GNS—120)和NCCLS推荐的双纸片扩散ESBLs确证法对174株肠杆菌科细菌同时检测其ESBLs。结果 174株肠杆菌科菌Vitek-32仪器法检出产ESBLs菌39株，ESBLs检出率为22．4％，其中大肠埃希菌ESBLs检出率为27．9％，肺炎(产酸)克雷伯菌21．6％，阴沟肠杆菌21．5％；双纸片扩散ESBLs确证法检出产ESBLs菌47株，ESBLs检出率为27．1％。大肠埃希菌ESBLs检出率26．5％，肺炎(产酸)克雷伯菌27％，阴沟肠杆菌36．8％。结论 Vitek-32仪器法对大肠埃希菌、肺炎(产酸)克雷伯菌产生的ESBLs检测结果-s双纸片扩散法ESBLs确证法结果符合率高；阴沟肠杆菌不宜用Vitek-32仪器法检测。当肠杆菌科细菌对三代头孢菌素、四代头孢菌素出现中介、耐药或头孢西丁耐药，而Vitek-32仪器法ESBLs检测ESBLs为阴性时，应用NCCLS推荐的双纸片扩散法重新检测ESBLs，或进一步用三维试验法检测超超广谱β-内酰胺酶。     

260株念珠菌分离鉴定及耐药性分析

目的探讨引起医院感染常见酵母样真菌种类及其耐药性特点,为临床感染性疾病提供病原学诊断和合理使用抗真菌药物的依据. 方法采集2 680份住院患者标本分离培养,分离出酵母样真菌260株,采用科码嘉念珠菌显色培养基(CHRO-Magar)培养,API-20CAUX酵母样真菌鉴定试条进行鉴定;念珠菌药敏试条(ATB-Fungus)进行念珠菌药敏试验. 结果 260株酵母样真菌以念珠菌为主,其中白色念珠菌155株(59.6%),热带念珠菌51株(19.6%),克柔念珠菌27株(10.3%),光滑念珠菌11株(4.2%);白色念珠菌对两性霉素B(AMB)、5-氟胞嘧啶(5-FC)、制霉菌素(NYS)、酮康唑(KTC)、益康唑(ECO)、咪康唑(MTC)、氟康唑(FLC)的耐药率分别为9.0%、5.8%、10.3%、43.0%、40.9%、43.7%、9.0%;热带念珠菌分别为3.9%、9.8%、19.0%、 61.9%、57.1%、61.9%、21.4%;克柔念珠菌为14.8%、14.8%、14.8%、14.8%、25.0%、25.0%、16.6%;光滑念珠菌为0.0、0.0、36.6%、18.1%、36.6%、36.3%、66.6%. 结论目前引起我院患者真菌感染的念珠菌仍以白色念珠菌为主,其次是热带念珠菌及克柔念珠菌,这些念珠菌对两性霉素B、5-氟胞嘧啶、氟康唑、制霉菌素较敏感,对酮康唑、益康唑、咪康唑产生了较强的耐药性.     

耐亚胺培南铜绿假单胞菌CARB-3基因的发现

目的分析我院2005年1~12月临床样本中分离的34株耐亚胺培南铜绿假单胞菌CARB基因携带情况,并对CARB基因分型。方法应用BD phoenix 100全自动微生物分析仪鉴定临床分离的铜绿假单胞菌并筛选耐亚胺培南的铜绿假单胞菌。采用PCR方法筛查耐亚胺培南铜绿假单胞菌的CARB基因,用DNA测序法对阳性扩增产物进行分型。结果34株耐亚胺培南的铜绿假单胞菌中,有32.4%携带CARB基因,测得DNA序列进行BLASTn比对,基因型为CARB-3型。结论我院临床样本中分离的耐亚胺培南的铜绿假单胞菌携带CARB-3型基因,携带率较高,医务工作者应重视和加强耐亚胺培南的铜绿假单胞菌的防治和耐药监测。     

高亲和力IgE受体β链基因与儿童哮喘的相关性研究

目的研究FcεRⅠ-β的I181L、V183L和E237G突变在四川地区11岁以下汉族儿童中的存在和频率,判断这些突变与儿童哮喘的相关性。方法利用扩增阻滞突变系统聚合酶链技术(ARMS-PCR)对四川地区的48例汉族哮喘儿童进行FcεRⅠ-β的1811、83、237三个位点的突变进行检测和分析,并与40例健康儿童进行对照。结果在哮喘组中检测到I 181L突变5例(10.4%),V 183L突变2例(4.2%),E 237G突变6例(12.5%),在对照组中未发现I 181L、V 183L、E 237G突变子。结论四川地区汉族儿童中存在I 181L、E 237G突变,不存在V 183L突变或突变率极低。I 181L突变与哮喘存在相关性(P<0.05),E 237G突变和哮喘有相关性(P<0.025),而V 183L与哮喘不存在相关性(P>0.05)。     

医院内非发酵革兰阴性杆菌类型分布抗菌耐药特征分析

目的总结临床送检标本中分离到的非发酵革兰阴性杆菌（NFGNB）的类型分布及对常用抗菌药物的耐药特征，指导临床合理使用抗生素。方法根据《全国临床检验操作规程》，应用Vitek-32全自动微生物分析仪和ATB半自动细菌鉴定和药敏系统对细菌进行鉴定和药物敏感试验。结果共分离到NFGNB836株，分属7个菌属，未分离到无色杆菌属和金氏杆菌属；分离率前3位为铜绿假单胞菌（47．25％）、鲍曼不动杆菌（17．34％）和嗜麦芽窄食单胞菌（14．11％）；铜绿假单胞菌对SCF、COL、TZP、IMP较敏感，敏感率为75．0％～89．0％；鲍曼不动杆菌对IMP、COL、TZP、TIC／CA、SCF较敏感，敏感率为72．0％～90．0％；嗜麦芽窄食单胞菌对IMP天然耐药，除了对TZP、SMZ、SCF、TIC／CA较敏感，敏感率为50．0％～71．0％，对其它抗生素耐药严重。铜绿假单胞菌对IMP和SCF敏感率有下降趋势；不动杆菌对IMP较稳定，但对SCF有下降趋势。结论我院NFGNB耐药情况严峻，应密切监测细菌耐药特点和耐药趋势，严格控制和合理使用抗生素，避免医院感染爆发流行。     

耐亚胺培南铜绿假单胞菌耐药特征及其耐药机制的研究

目的分析临床分离耐亚胺培南铜绿假单胞菌对常用抗菌药物的耐药特征及其对亚胺培南耐药机制。方法应用BD Phoenix100全自动微生物分析仪进行细菌鉴定和药物敏感试验,头孢哌酮/舒巴坦采用K-B法;应用聚合酶链反应（PCR）方法检测碳青酶烯酶相关基因（IMP、VIM、GIM、SPM、OXA、GES）、膜微孔蛋白基因oprD2,采用Etest试验观察氰氯苯腙（CCCP）对亚胺培南最低抑菌浓度（MIC）的影响,以研究细胞内主动外排机制。结果耐亚胺培南铜绿假单胞菌除对阿米卡星100%敏感外,对哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦敏感率为48.0%~54.0%,对三代、四代头孢菌素、氨曲南、喹诺酮类等抗菌药物抗菌活性差,敏感率为3.0%~29.0%;对美罗培南29.0%敏感,对氨苄西林/舒巴坦、氯霉素、四环素、复方新诺明全部耐药;检测到IMP阳性率17.6%,oprD2阳性率2.9%,其余耐药基因未检测到;当CCCP存在时,亚胺培南的MIC值下降4个浓度梯度,提示存在主动外排机制的菌株占11.8%。结论耐亚胺培南铜绿假单胞菌除阿米卡星外,对其他常用抗菌药物耐药严重;产IMP型金属β-内酰胺酶、细胞内主动外排机制以及膜微孔蛋白基因oprD2缺失,是铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药的原因,但膜微孔蛋白基因oprD2缺失,不是铜绿假单胞对亚胺培南耐药的主要机制。     

三种筛查氨基糖甙类高度耐药肠球菌的方法评价

肠球菌为条件致病菌 ,自 1979年首例报道对高浓度庆大霉素耐药以来 ,耐庆大霉素肠球菌引起的医院感染发生率迅速增加 ,近年来已成为医院感染中重要的病原菌[1] 。由于这类肠球菌所引起的感染治疗难度大 ,因此筛查氨基糖甙类高水平耐药肠球菌 (ＨＬＡＲ)对于指导临床用药非常重要。我们将临床分离的 74株肠球菌用纸片扩散法、ＶｉｔｅｋＧＰＳ 10 1药敏卡筛查 ,并以脑心浸液琼脂稀释筛选平板法 (ＡＤＳＰ)为标准 ,评价其准确性。1　材料和方法1 1　菌株来源　 74株肠球菌均获自临床病人的痰、尿、血、脓液、分泌物及胆汁等标本。在 10天内从…     

蛋白质凝胶电泳银染色法的改进

目的探索一种快速、灵敏的蛋白质凝胶电泳银染色方法。方法对蛋白质凝胶电泳银染色过程中的多种因素进行了实验探索。在此基础上探索出一种改良的蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳银染色法。结果改进方法灵敏度为Coomassie Brilliant Blue R-250法的100倍以上，对牛血清白蛋白的检测限在0．5ng以下，整个染色过程不超过60min，染色重复性好。结论改进后的方法比以前使用的方法简便、快速、灵敏、成本相对低廉。     

蛋白质凝胶电泳银染色法的改进

目的探索一种快速、灵敏的蛋白质凝胶电泳银染色方法.方法对蛋白质凝胶电泳银染色过程中的多种因素进行了实验探索,在此基础上探索出一种改良的蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳银染色法.结果改进方法灵敏度为Coomassie Brilliant Blue R-250法的100倍以上,对牛血清白蛋白的检测限在0.5ng以下,整个染色过程不超过60min,染色重复性好.结论改进后的方法比以前使用的方法简便、快速、灵敏、成本相对低廉.     

2007年某医院病原菌流行特征及耐药性分析

目的研究分析引起医院感染的主要病原菌及耐药性,为感染性疾病诊治、合理使用抗菌药物、有效控制医院感染提供依据。方法对2007年临床标本培养出7381株病原菌及药敏试验结果进行统计分析。结果病原菌以大肠埃希菌、念珠菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、不动杆菌、阴沟肠杆菌、嗜麦芽窄食单胞菌、肠球菌为主。革兰阴性杆菌占59．0％,革兰阳性球菌占30．0％,念珠菌11．0％。阳性球菌（除屎肠球菌外）对万古霉素、链阳霉素（奎奴普丁／达福普定）、替考拉宁、呋喃妥因抗菌药物非常敏感,敏感率达90％以上。但对青霉素类、头孢类、大环类脂类很耐药。阴性杆菌（除嗜麦芽假单胞菌外）对亚胺培南、哌拉西林／他唑巴坦、头孢吡肟、头孢他啶、左氧氟沙星比较敏感;白色念珠菌对氟康唑、两性霉素B、伊曲康唑、伏立康唑和5-氟胞嘧啶很敏感,但热带念珠菌、克柔念珠菌、光滑念珠菌有不同程度的耐药性,结论病原菌主要以耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、产超广谱β-内先胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌、耐青霉素肺炎链球菌、鲍曼不动杆菌、嗜麦芽窄食单胞菌和铜绿假单胞菌为主,且多数病原菌对常用抗菌药物耐药。