广州番禺地区开展核酸血液筛查的应用情况

目的分析广州番禺地区开展核酸血液筛查以来情况,探讨核酸检测技术(NAT)在血液筛查中的应用价值。方法采用罗氏诊断Cobas S201系统对两遍酶免4项(ELISA)及ALT筛查阴性的献血者标本进行HIV-RNA、HCV-RNA和HBV-DNA 3项联合、6样本混样检测,对混样阳性的样本进行拆分实验,并对拆分阳性的标本进行分项确证实验,对确证实验HBV-DNA阳性的样本进行乙肝两对半血清学标志物的酶免检测。结果共完成40 107例标本的核酸混样检测,拆分阳性的标本60例,阳性率为0.150%(60/40 107)。对这60例样本做分项鉴别实验,结果HBV-DNA阳性47例,阳性率为0.117%(47/40 107),其余13例确认阴性。对47例分项鉴别实验HBV-DNA阳性的样的进行乙肝两对半血清学标志物检测,结果显示:单独HBc Ab阳性15例(31.9%),HBc Ab阳性伴HBs Ab弱阳性15例(31.9%)(其中有2例HBs Ab较强阳性S/CO分别达到14.6、22.3),HBe Ab、HBc Ab阳性8例(17.0%),单独HBs Ab阳性4例(8.5%),两对半全部阴性4例(8.5%),HBs Ab、HBe Ab、HBc Ab 3项阳性的1例(2.1%)。结论血站酶免4项及ALT筛查阴性的血液仍然存在一定的输血传染残余风险,HBs Ag阴性HBV-DNA阳性样本的两对半抗体阳性组合模式有6种,以单独HBc Ab阳性和HBc Ab阳性伴HBs Ab弱阳性占比最大。应用ELISA联合NAT进行血站血液筛查能更有效保障血液安全。     

单核单层检测的研究与应用

目的 探讨单核单层检测(MMA)方法 预判新生儿溶血病发生的可行性.方法 对30例ABO系统产前检查标本进行MMA法实验,以及追踪新生儿溶血病(HDN)的发生.并对结果 进行分析.结果 30例ABO系统产前标本MMA法实验阳性19例,产后17例发生新生儿溶血病,2例未发生新生儿溶血病;阴性11例,2例发生新生儿溶血病,9例未发生新生儿溶血病.该方法 灵敏度为89.4%,特异性为81.8%.阴性预示值为84.6%,阳性预示值为90.4%,总有效率为86.7%.结论 单核单层检测(MMA)方法 可用于预判新生儿溶血病的发生.     

献血人群Mur血型的筛查研究

目的对广州番禺地区的献血人群开展Mur抗原与抗-Mur抗体的筛查,了解该血型的分布频率和特征。方法采用96孔微量板法使用单克隆抗-Mur试剂对献血者样本进行Mur抗原检测;使用已知Mur抗原阳性试剂红细胞对献血者血浆样本进行抗-mur抗体筛查,并对筛查阳性的标本进行抗体特异性鉴定。结果在3 000份无偿献血者标本中,检出Mur抗原阳性215例,发生率约为7.17%;在15 000份献血者标本中筛选并鉴定出抗-Mur 30例,发生率为0.20%。结论本地区献血人群中存在相对较高的Mur抗原分布频率以及抗-Mur发生频率,有必要在配制不规则抗体筛选试剂细胞时增加含有Mur抗原的红细胞,防止抗-Mur抗体漏检,进一步降低临床血浆输注不良反应的风险。     

s、Fy~a、OK~a阴性稀有血型的多重PCR筛选技术应用

目的采用多重PCR筛选技术(PCR-ssp反应体系)同时扩增s、Fya、OKa阴性稀有血型。方法根据s、Fya、OKa血型基因核心序列设计相应引物,采用序列特异引物引导的PCR反应(PCR-SSP)体系对模版DNA进行扩增,对扩增产物进行电泳分析,根据扩增出目标片段图谱判断该稀有血型基因的存在与否,以此判断是否阴性稀有血型。结果随机抽取本站2010年6～8月参加献血的650名献血者进行筛选鉴定,未发现s、Fya、OKa阴性的稀有血型。结论该方法能在一个反应体系内同时扩增3个稀有血型,具有准确、高效的优点,可以用来进行献血人群s、Fya、OKa阴性稀有血型的筛选与建库工作。     

不同保存条件对ELISA检测结果影响的观察

严格的血液检测是保证输血安全的重要手段．在日常的检测工作中常会遇到阳性或可疑标本、质控品、试剂开封后放置不同温度和时间时出现测定值明显差异现象．严重影响血液标本检测结果的正确性．导致室内质控图曲线的失控．为此．笔者对ELISA法试剂和质控品开封后分别在不同保存条件下和不同保存时间对检测结果的影响进行观察．报道如下。     

温度与时间对HBsAg、抗HCV、抗HIV、抗梅毒抗体的影响

严格的血液检测是保证输血安全的重要手段，日常的检测工作中常会遇到阳性或可疑标本、质控品放置不同温度和时间时出现测定值明显差异现象，严重影响血液标本检测结果的正确性，导致室内质控图曲线的失控。为此，笔者对12份阳性标本、4份质控品分别在室温、2～6℃冰箱及-20℃冰箱中贮存，在不同时间用ELISA法分别进行HBsAg、抗HCV、抗HIV、抗梅毒抗体检测，结果如下。     

番禺地区RhD阴性孕妇基因分型对输血安全的影响及对策研究

目的对番禺地区RhD阴性的孕妇进行RHD基因分型以及产后追踪,为临床制订科学、合理的预防策略提供科学依据。方法收集2016年1月至2018年6月番禺地区RhD阴性孕产妇标本40例,用间接抗人球蛋白试管法进行RhD阴性确认,用吸收放散试验进行放散D筛查,用PCR-SSP方法进行RHD基因分型。结果经鉴定40例均为RhD阴性,吸收放散试验鉴定9例为放散D表型(Del),占比22.5%。对40例标本进行基因分型检测,24例为RHD基因全缺失型,占比60.0%;9例为RHD1227A DEL型,与血清学放散D(Del)一致,占比22.5%;5例RHD-CE(2-9)-D型占比12.5%;2例10外显子全阳性,经进一步测序分析确定均为RHD 711del C型,占比5.0%。结论该地区RhD阴性孕产妇中存在较高比例的RHD1227A DEL(放散D),临床医生适当结合吸收放散试验和基因分型结果,能更精准判断孕妇RhD血型,从而更加科学地制订产前抗-D筛查和预防RHD-HDN发生的管理策略。     

番禺地区RhD阴性献血者部分D频率调查发简

目的 分析番禺地区RhD阴性献血者部分D（partial D）基因分型特征.方法 采用微量板法对献血者进行RhD阴性筛查;采用抗人球蛋白法对初筛RhD阴性的样本进行确认;采用PCR-SSP法（RH基因变异体分型检测试剂盒）对献血者基因组DNA进行扩增,对扩增产物进行电泳分析,根据电泳图谱判断部分D基因分型.结果 初筛检出60例RhD阴性,经抗人球蛋白法确认59例为RhD阴性,阴性频率约为0.23％.59例RhD血清学筛选阴性的基因分型检测发现2例部分D,血清学筛选RhD阴性中出现部分D的频率约为3.4％.结论 本地区血清学RhD阴性献血者中,存在RHD-CE （5）-D、RHD-CE（6-9）-D等位基因型,采用PCR-SSP法对RhD阴性表型献血者进行基因分型,可以准确鉴定RHD基因型.     

多重PCR技术筛选Co^a、Lu^b、Yt^a、Kp^b阴性稀有血型方法的建立

目的采用多重PCR筛选技术建立一个PCR反应体系,同时扩增Co^a、Lu^b、Yt^a、Kp^b阴性稀有血型,并应用于无偿献血人群稀有血型的筛选与建库。方法根据Co^a、Lu^b、Yt^a、Kp^b血型基因核心序列设计相应引物,采用多重PCR体系对献血者模版DNA进行扩增,对扩增产物进行电泳分析,根据是否扩增出对应片段图谱判断该稀有血型基因的存在。结果随机抽取500名献血者进行筛选鉴定,没有发现Co^a、Lu^b、Yt^a、Kp^b阴性的稀有血型。结论该方法能在一个反应体系内同时扩增4个稀有血型,具有准确、高效的优点,可在无偿献血人群稀有血型的筛选与建库工作中应用。     

番禺地区无偿献血检验结果不合格原因分析

目的：通过对无偿献血人群的血液检验结果不合格原因进行分析,探索加强血液检测质量的方法,保证临床输血安全有效。方法：对2009年6月至2010年12月,在我站参加无偿献血的48094名献血者的ALT、HBsAg、抗-HcV、抗-HIV、抗-TP五项传染病筛查指标不合格原因进行分析。结果：在48094名献血者检验结果中,不合格标本3649例,不合格率约为7．6％。其中AI．T升高2314例,不合格率约为4．81％;HBsAg项目报废365例,不合格率约为O．76％;抗-HCV项目报废348例,不合格率约为O．72％;抗-HIV项目报废163例,不合格率约为O．34％;抗-TP项目报废459例,不合格率约为O．95％。男女多项检验指标的报废率比较存在较大差异。结论：本地区献血者血液检验结果报废率以ALT为主,抗-TP、HBsAg、抗-HCV次之,同时存在一定的HIV阳性献血者。建议加强献血者采血前AI.T筛查和问诊,排除高危人群参加献血,以保证临床输血安全。