维生素C对病毒灭活中血浆蛋白活性的保护效应

本研究探测在亚甲蓝（methyrlene blue，MB）光化学法处理单份血浆过程中，加入维生素C（vitamine C，Vitc）是否影响病毒的灭活效果，是否对血浆蛋白活性成分具有保护作用。用水泡性口炎病毒（vesicular stomatitis virus，VSV）作为指示病毒，在人血浆中加入不同浓度Vit C和终浓度为1μmol／L的亚甲蓝，应用40000lx荧光强度照射并于不同时间取样检测。以细胞病变效应评价对VSV的灭活效果，用RT-PCR检测病毒核酸的变化，并采用Clauss法、一期法和微量免疫电泳等方法对亚甲蓝光化学法处理前后的血浆蛋白含量和活性进行分析。结果发现，VSV血浆在加入240μmol／LVitC并经MB-光照60分钟后，病毒滴度下降〉8 lg TCID50／ml；RT-PCR法也检测不到病毒核酸；血浆中的纤维蛋白原和凝血因子Ⅷ的回收率分别为83.55％和81、67％，与不加Vit C进行亚甲蓝光化学法处理结果相比有显著提高（P〈0.05）；微量免疫电泳显示，血浆中的大部分蛋白成分含量没有明显改变，免疫原性也未受到明显影响。结论：血浆中加入一定量的Vit C不仅不影响亚甲蓝光化学法对病毒的灭活效果，而且有效地保护了血浆蛋白活性成分，因此Vit C可作为亚甲蓝光化学法处理血浆时的保护剂，能有效地提高单份新鲜冷冻血浆的质量。     

用虚拟实验软件进行医学免疫学和病原生物学实验考试的实践

随着信息科学技术的迅猛发展,计算机、虚拟现实等技术已进入社会的各个领域,产生了巨大的影响。在教育领域,多媒体、虚拟现实等技术已逐渐成为有效的教学媒体和工具,成为实验教学的新手段,使教学模式发生了巨大变化。     

结核分枝杆菌RpfA蛋白的原核表达、鉴定和纯化

目的:构建结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)复活促进因子A(Resuscitation-promoting factor,ARpfA)的原核表达质粒,并在大肠杆菌中表达和纯化.方法:采用聚合酶链反应(PCR)方法从结核分枝杆菌H37Rv基因组DNA中扩增出RpfA基因(1 224bp),然后用双内切酶消化后,与同样酶消化的pET32aα( )载体连接,转入大肠杆菌Top10;阳性克隆用酶切和DNA测序鉴定.测序正确后,将重组质粒转化到的大肠杆菌BL21中,经IPTG诱导,由盯启动子调控表达了RpfA蛋白;利用His-tag in-gel Stain对表达蛋白进行鉴定,最后对目的蛋白进行纯化.结果:双酶切鉴定所切下的片段大小与理论值相符,测序结果与文献报道一致.经SDS-PAGE分析和His-tag in-gel Stain鉴定均发现66ku处有特异性蛋白条带.结论:成功克隆并构建了RpfA基因的重组表达质粒pET32 α( )-RpfA,并获得了高纯度的重组蛋白,为以后的深入研究奠定了基础.     

病原生物学与免疫学实验教学改革探索

为使学生更好地掌握病原生物学与免疫学实验教学的基本技能,并充分利用实验教学的特点,培养其科学素质和创新意识,教研室对病原生物学与免疫学实验教学改革进行探索。将微生物学、寄生虫学与免疫学实验整合为一门实验课程,成立相应的实验室,独立承担实验教学。通过更新实验教学理念,将教学内容进行模块化、个性化设置,建立完整的管理制度,编写匹配的新实验教程,改进教学手段,以及大力开展学生创新实验等措施,提高了学生对实验课的学习积极性和兴趣,增强了其创新能力。     

重庆地区产妇乳汁分泌型IgA含量的分析

目的研究不同状态的产妇乳汁中分泌型IgA(SIgA)含量,为预防新生儿感染提供实验依据。方法ELISA(双抗体夹心法)定量检测乳汁中SIgA含量。结果在42例产妇中,初乳中SIgA含量最低值为0.86,最高值为8.01;成熟乳中SIgA含量最低值为0.23,最高值为7.23。初乳和成熟乳中SIgA含量比较差异有统计学意义(P<0.05);33例不同营养状况产妇初乳中SIgA含量差异有统计学意义(P<0.05);42例产妇按农村产妇和城市产妇、高龄产妇和年轻产妇、足月产妇与早产产妇、顺产与剖宫产等分析,初乳中SIgA含量差异均无统计学意义(P>0.05)。结论新生儿期以母乳喂养为佳,影响初乳中SIgA含量的因素主要是营养状况,与产妇的年龄、妊期、分娩方式无关。     

五年制临床医学专业《医学微生物学》教学改革探索

《医学微生物学》是高等医学院校基础医学教育的骨干课程之一,随着现代科学技术的飞速发展,《医学微生物学》的理论和技术等亦随之而深入发展,新理论、新技术、新知识也不断更新。面对一门基础医学教育的重点课程,《医学微生物学》的教学应如何去适应新形势发展的需要?近几年来     

"挑战杯"竞赛是大学生素质教育的新平台

为大力实施“科教兴国”战略,努力培养广大青年的创新、创业意识,造就一代符合未来挑战要求的高素质人才,共青团中央、中国科协、教育部和全国学联决定共同主办“挑战杯”中国大学生课外学术科技作品竞赛和中国大学生创业计划竞赛(以下简称“挑战杯”)。首届全国“挑战杯”大学     

亚甲蓝光化学法灭活病毒的研究--抗坏血酸对血浆凝血因子的保护作用

目的探讨抗坏血酸对亚甲蓝光化学法处理血浆时指示病毒灭活的效果,以及对部分凝血因子的保护作用.方法采用CPE法评价病毒的灭活效果,用Clauss法测定纤维蛋白原的含量和一期法判定FⅧC的凝血活性.结果在单采人血浆中加入1 μmol·L-1亚甲蓝和240 μmol·L-1抗坏血酸,再给以40000 lx荧光强度照射60 min,VSV滴度下降＞8lgTCID50·ml-1,并且纤维蛋白原和FⅧC的回收率分别为83.55%和81.67%,比常规亚甲蓝/荧光光化学法显著提高(P＜0.01),而且凝血酶原时间延长值在正常允许值范围,活化部分凝血酶时间延长值也接近正常允许值范围.加入抗坏血酸和色氨酸可灭活病毒,而甘露醇不能.结论在亚甲蓝光化学法中,抗坏血酸不影响病毒的灭活,而且对部分凝血因子有保护作用.因此,抗坏血酸可以有效提高单份冷冻新鲜人血浆的质量.     

麻疹疫苗工作种子批培养条件的优化

目的　了解麻疹疫苗工作种子批培养的主要影响因素 ,确定培养条件的优化组合。方法　采用正交试验对各影响因素进行筛选 ,制订麻疹疫苗工作种子批制备对策 ,按照对策以可控制因素的优化组合制备 5批麻疹疫苗工作种子批 ,并分别用于试生产。结果　 5批麻疹疫苗工作种子批比随机选择的 5批近期凭经验制备的传统麻疹疫苗工作种子批病毒滴度明显提高 (≥ 0 .69± 0 .3 5 L g CCID5 0 / 1.0 m l,P<0 .0 5 ) ,用该毒种试生产的冻干成品疫苗滴度合格 ,并通过疫苗稳定性试验。结论　经正交试验优化的麻疹疫苗工作种子批培养条件 ,能提高麻疹疫苗工作种子批病毒滴度和稳定性     

青年教师如何上好留学生微生物学实验课的探索

经济全球化和综合国力的提高,使我国同其它国家间的文化交流日益普遍,大量的国外学生进入我国高校。作为高校教学主力军的青年教师,如何上好留学生教学课,是教师面临的一个崭新的研究课题。本文就青年教师在医学微生物学实验教学过程中,如何针对留学生的特点、选择合适教材、作好教学准备、保证教学实施和课后辅导与反馈进行思考,并就青年教师如何上好实验课进行初步探索。