对乳腺导管内增生性病变临床病理的评估

目的 探讨乳腺导管内增生性病变的临床病理特点，评价其应用的可行性。方法 依据WHO（2003）乳腺导管内增生性病变的分类标准，应用HE、免疫组化染色技术对894例乳腺导管内增生性病变重新诊断、分类及与原病理诊断进行对比分析，并观察各级导管内增生性病变与浸润性癌的关系。结果 894例乳腺导管内增生性病变中普通导管增生（UDH）650例，导管上皮内瘤变（DIN）1A36例、1B46例、1C57例，DIN254例、DIN351例。随着DIN级别的增高，其细胞形态和组织结构的异型性逐渐明显，乳腺浸润性癌的危险性逐渐增高，部分免疫标记逐渐丢失；达到DIN 1C时，CK5和CK34 βE12几乎完全丢失。根据细胞和组织学形态特点，结合免疫组化染色，重新诊断与原病理诊断的符合率达82％以上。结论 WHO（2003）乳腺导管内增生性病变的分类同时采用DIN分类和传统分类系统。分类主要根据细胞核的间变程度，同时考虑病变大小、有，无微灶钙化、坏死、组织结构和免疫表型等。它的诊断标准明确，比较容易掌握，具有较强的实用性，而且对临床预后和治疗具有指导意义。     

热电厂锅炉灰粉尘对大鼠肺组织的早期毒效应

[目的 ]探讨某热电厂锅炉灰粉对染尘早期大鼠肺组织的毒性作用及其机制。 [方法 ]分别对石英组、灰粉尘组及对照组Wistar大鼠一次性气管内注入浓度为 5 0mg/ml的石英尘、锅炉灰粉悬浮液及生理盐水各 1ml ,染尘后 10d ,用 2 ,4 二硝基苯肼比色法、Folin 酚试剂法和钼蓝法测定支气管肺泡灌洗液 (BALF)中乳酸脱氢酶活性及总蛋白和磷酯含量 ,免疫组织化学染色法直接检测肺组织中的肿瘤坏死因子 α(TNF α)和转化生长因子 α(TGF α)的表达。 [结果 ]与生理盐水组相比 ,石英组和锅炉灰粉组大鼠BALF乳酸脱氢酶活性增高和总蛋白明显增加 (P <0 0 1) ,且石英组大于锅炉灰粉组 (P <0 0 1) ;锅炉灰粉组磷脂含量未见增高 (P >0 0 5 ) ,且明显低于石英组。生理盐水组未见TNF α表达 ,石英组和锅炉灰粉组均引起TNF α阳性表达 [(4 1 2 4± 3 2 6) %、(16 97± 1 85 ) % ] (P <0 0 1)。生理盐水组和锅炉灰粉组偶见肺泡上皮细胞表达TGF α[(2 19± 0 2 2 ) % ,(2 75± 0 2 7) % ] ,而石英组TGF α呈表达增多 (79 5 7± 5 0 9) % (P <0 0 1)。 [结论 ]染尘大鼠早期 ,锅炉灰粉能够引起大鼠肺组织损害 ,但毒性明显弱于石英尘。     

锅炉灰粉对大鼠支气管肺泡灌洗液成分的影响

目的：探讨石英尘和二热电厂（甲厂、乙厂）锅炉灰粉对大鼠支气管泡灌洗液（BALF）中乳酸脱氢酶活性、总蛋白和磷脂含量的影响。方法：Wistar大鼠生分生理盐水组（对照组）、石英组、甲厂组和乙厂组，一次性气管内注和染尘，取BALF，分别用2，4－二硝基苯肼比色法、Folin-酚式剂法和钼蓝法测定乳酸脱氢酶活性、总蛋白和磷脂注和染尘，取BALF，分别用2，4－二硝基苯肼比色法、Folin－酚试剂法和钼蓝法测定乳酸脱氢酶活性、总蛋白和磷脂含量。结果：与对照组相比，石英组、甲厂组和乙厂组大鼠BALF乳酸脱氢酶活性和总蛋白含量明显增加（P＜0．01），石英组、甲厂组磷脂的含量高于对照组（P＜0．01），而乙厂组与对照组相比差异无显著性（P＞0．05）。甲厂组大鼠BALF乳酸脱氢酶活性和总蛋白、磷脂含量明显高于乙厂组（P＜0．01或P＜0．05）。结论：在动物染尘早期，大鼠BALF中乳酸脱氢酶活性有总蛋白和磷脂含量的变化号粉尘的致病潜力一致。     

中药814对吸烟加肺炎克雷伯杆菌感染诱发大鼠COPD的防治

应用吸烟加反复肺炎克雷伯杆菌感染法建立大鼠慢性阻塞性肺疾病 (COPD)模型。大鼠分为对照组 (C) ,吸烟加感染组 (SI)和治疗组 (T)。T组于吸烟感染前 3d开始用中药 814灌胃治疗 ,动物分别于第 4、 8、 16周处死。结果表明 ,与 SI组相比 ,第 16周 T组大鼠肺组织细支气管壁增厚程度 ,细支气管狭窄程度以及肺气肿面积均明显减轻(P<0 .0 5 ) ,维多利亚蓝染色显示 ,T组大鼠肺腺泡动脉肌化程度明显小于 SI组 (P<0 .0 5 ) ,与 C组相比无显著差异(P>0 .0 5 )。T组大鼠第 16周 Pa O2 比 SI组增高 (P<0 .0 5 ) ,右心室收缩压 (RVSP)降低 (P<0 .0 5 ) ,两指标接近正常水平。结果提示 ,中药 814对吸烟加肺炎克雷伯杆菌感染诱发的大鼠 COPD有较明显的防治作用     

TGF-β1在低氧诱导肺动脉内皮细胞向平滑肌样细胞转分化中的作用

目的研究低氧条件下肺动脉内皮细胞（PAEC）向平滑肌样细胞的转分化及转化生长因子β1（TGF—β1）在此转分化过程中的作用。方法将经免疫磁珠法（用血小板内皮细胞粘附分子1做免疫分选标记）纯化后的原代肺动脉内皮细胞分别在常氧（含21％O2、5％CO2、74％N2）和低氧（含1％O2、5％CO2、94％N2）条件下培养1、4、7d，用核酸干扰法（RNAi）阻断TGF—β1的表达，用逆转录-聚合酶链式反应法（RT—PCR）和Western blot分别检测各组细胞TGF—β1 mRNA和蛋白的表达，并用免疫细胞化学法检测平滑肌细胞标志蛋白α-平滑肌肌动蛋白（α—SM—actin）的表达，结合形态学观察从而判定有无平滑肌样细胞的转分化。结果低氧可增加肺动脉内皮细胞TGF—β1 mRNA和蛋白的表达（P〈0．05），RNAi沉默TGF—β1基因表达后可明显降低其mRNA和蛋白含量（P〈0．05），随着低氧培养时间的延长，肺动脉内皮细胞转分化为平滑肌样细胞的比率逐渐增加（P〈0．05）；阻断TGF—β1表达后，平滑肌样细胞的转化率明显降低（P〈0．05）。结论肺动脉内皮中存在具有转分化为平滑肌样细胞潜能的细胞；低氧可明显促进转分化，TGF-β1在此转分化过程中起重要作用。     

两热电厂粉尘引起大鼠肺组织损害及纤维化因子释放的比较研究

目的观察两个热电厂粉尘引起肺组织损害及纤维化因子释放等生物学反应的差异,探讨二者致尘肺患病率不同的机制。方法收集尘肺患病率不同的甲、乙两个热电厂粉尘(甲厂尘肺患病率大于乙厂尘肺患病率),对大鼠进行一次性气管内注入染尘,石英尘作为阳性对照组。染尘后10 d处死动物,检测其支气管肺泡灌洗液(BALF)中乳酸脱氢酶(LDH)、总蛋白和磷脂的含量,免疫组织化学检测其肺组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β1(TGF-β1)和转化生长因子-α(TGF-α)的表达。结果石英尘、甲厂和乙厂粉尘组大鼠BALF中LDH活力分别为(9.62±0.28)×103,(6.18±0.24)×103和(4.68±0.30)×103U/L,与对照组[(3.62±0.21)×103U/L]比较,差异有显著性(P<0.05),总蛋白含量分别为(0.96±0.03),(0.67±0.02)和(0.49±0.03)g/L,与对照组[(0.28±0.02)g/L]比较,差异有显著性(P<0.05),甲厂粉尘引起LDH和总蛋白含量增高均大于乙厂粉尘(P<0.05)。石英尘和甲厂粉尘组大鼠BALF中磷脂含量分别为(0.84±0.02)和(0.48±0.02)mmol/L,与对照组[(0.23±0.01)mmol/L]比较,差异有显著性(P<0.05),乙厂粉尘BALF中磷脂含量与对照组比较,差异无显著性(P>0.05)。3种粉尘均引起肺组织TNFα-和TGFβ-1表达增强(P<0.05),高倍镜视野中TNF-α阳性细胞数分别为(41.24±2.26),(30.33±1.86)和(16.97±1.85),(TGFβ-1)阳性细胞数分别为(58.66±5.73),(40.02±4.20)和(19.48±4.98)。其中,甲厂粉尘组大鼠肺组织TNF-α和TGFβ-1阳性表达增强均大于乙厂粉尘组大鼠(P<0.05)。仅石英尘引起TGF-α表达增强(P<0.05)。结论甲厂粉尘引起大鼠肺组织损害及纤维化因子TNF-α和TGFβ-1表达增强作用大于乙厂粉尘,这可能是二者致尘肺患病率不同的重要原因。     

煤灰粉致大鼠肺损害及纤维化因子的释放

目的观察煤灰粉对大鼠肺组织损害及纤维化因子释放的影响,探讨其致尘肺作用机制。方法收集某热电厂煤灰粉,以石英尘作为阳性对照,生理盐水作为阴性对照,对大鼠进行一次性气管内注入染尘。染尘后10d处死动物,立即行支气管肺泡灌洗,检测支气管肺泡灌洗液(BAIF)中乳酸脱氢酶(LDH)、总蛋白和磷脂的含量,免疫组织化学检测肺组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β1(TGF-β1)和转化生长因子-α(TGF-α)的表达。结果煤灰粉引起大鼠肺BALF中LDH、总蛋白和磷脂的含量分别为(6.18±0.24)×103u/L,(0.67±0.02)g/L和(0.48±0.02)mmol/L,比对照组[分别为(3.62±0.21)×103u/L,(0.28±0,02)g/L和(0.23±0.01)mmol/L]明显增加(P<0.05)。对照织大鼠肺组织不表达TNF-α和TGF-α,煤灰粉引起大鼠肺组织TNF-α和TGF-β1表达增强(P<0.05),每高倍镜视野阳性细胞数分别为(30.33±1.86)和(40.02±4.20)。结论煤灰粉引起一定程度的肺组织损害及纤维化因子TNF-α和TGF-β1的释放可能与其致尘肺作用有关。     

香烟提取物和脂多糖对人胚肺成纤维细胞TGF-β1 mRNA及蛋白表达的影响

目的:探讨香烟提取物(CSE)和脂多糖(LPS)对体外培养的人胚肺成纤维细胞(HELF)转化生长因子-β₁(TGF-β₁)mRNA及其蛋白表达的影响。方法:应用不同浓度的CSE(1∶50、1∶25和1∶10)、LPS(0.1 mg/L、1 mg/L和10 mg/L)及CSE(1∶25)与LPS(1 mg/L)联合作用于HELF, 37℃作用24 h后, 提取细胞总RNA, 应用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)及免疫细胞化学技术检测TGF-β₁ mRNA和蛋白表达的变化。结果:CSE低浓度(1∶50和1∶25)时可增加HELF TGF-β₁ mRNA及蛋白的表达(Ｐ＜0.05), 高浓度(1∶10)时未引起TGF-β₁ mRNA及蛋白表达增强(Ｐ＞0.05)。不同浓度的LPS均引起HELF TGF-β₁ mRNA及蛋白表达增强(Ｐ＜0.05)。CSE与LPS联合作用也可增加HELF TGF-β₁ mRNA及蛋白的表达(Ｐ＜0.05)。结论：一定浓度的CSE和LPS可上调肺成纤维细胞TGF-β₁ mRNA及蛋白表达。     

热电厂粉尘对大鼠支气管肺泡灌洗液成分及肺组织细胞因子释放的研究

目的　探讨尘肺的生物学标志物及不同粉尘致病力不同的机制。方法　收集尘肺患病率明显不同的甲、乙两热电厂粉尘 ,以生理盐水作为阴性对照 ,石英尘作为阳性对照 ,分别对大鼠行一次性气管内注入染尘。染尘后 10d ,观察不同粉尘引起大鼠早期支气管肺泡灌洗液 (BALF)中乳酸脱氢酶 (LDH )、总蛋白、磷脂及肿瘤坏死因子 α(TNF α)含量的变化 ,免疫组织化学染色观察肺组织TNF α的表达。结果　石英尘、甲、乙两厂粉尘均引起大鼠BALF中LDH、总蛋白含量增加 ,与对照组比较差异具有显著性 ,按大小顺序排列为石英组 >甲厂组 >乙厂组 (P <0 0 5 )。石英尘和甲厂粉尘导致大鼠BALF中磷脂含量比对照组明显增加 ,石英组高于甲厂组 (P <0 0 5 ) ,乙厂粉尘BALF中磷脂含量与对照组比差异无显著性 (P >0 0 5 )。三种粉尘均引起BALF中TNF α免疫活性增强 ,按大小顺序排列为石英组 >甲厂组 >乙厂组 (P<0 0 5 )。从乙厂粉尘到甲厂粉尘到石英尘 ,引起大鼠肺组织TNF α阳性表达逐渐增强 (P <0 0 5 )。结论　染尘大鼠早期BALF中增高的LDH活性、总蛋白和磷脂的含量及肺组织中TNF α的表达量与粉尘的致病潜力一致。