氢质子磁共振波谱分析在儿童癫痫诊断中的应用

目的：探讨氢质子磁共振波谱分析对儿童癫痫诊断中的应用价值。方法将34例经24 h动态脑电图确诊的癫痫患儿设为患者组,20例无神经系统症状和体征、无脑实质病变的非癫痫患儿设为对照组,采用3．0T M R扫描仪,先行常规T1WI、T2WI扫描,氢质子磁共振波谱检查采用多体素解析波谱采集序列,分析双侧海马区代谢产物乙酰‐天门冬氨酸、复合胆碱、肌酸的波峰特点,计算乙酰‐天门冬氨酸／（复合胆碱＋肌酸）和乙酰‐天门冬氨酸／肌酸的比值,并与动态脑电图进行比较。结果两组常规磁共振检查均未见脑结构及信号异常。患者组病灶侧乙酰‐天门冬氨酸峰可见不同程度降低,复合胆碱、肌酸峰可见不同程度增高;患者组病灶侧乙酰‐天门冬氨酸／（复合胆碱＋肌酸）和乙酰‐天门冬氨酸／肌酸的比值较病灶对侧、对照组明显减小（P＜0．01）,病灶对侧与对照组比较差异无显著性（P＞0．05）。氢质子磁共振波谱诊断准确率为85．2％、敏感度为94．1％。结论氢质子磁共振波谱能够定量反映患儿海马代谢异常,有助于癫痫的早期诊断。     

凋亡抑制因子c-IAP1和促凋亡因子Smac在儿童急性白血病患者骨髓中的表达及临床意义

目的探讨凋亡抑制蛋白c-IAP1和促凋亡蛋白Smac在儿童急性白血病(AL)患者中的表达情况,分析二者之间的关系及临床意义。方法 AL患儿72例,其中初诊组32例,缓解组30例,复发组10例;另取同期12例非恶性血液病患儿作为对照组。应用免疫组织化学过氧化物酶标记链霉卵白素染色法分别检测患儿骨髓中c-IAP1、Smac蛋白表达情况;对其中45例患儿采用半定量反转录聚合酶链反应检测其骨髓单个核细胞中c-IAP1、Smac mRNA表达水平。结果 c-IAP1、Smac蛋白在初诊组AL患儿骨髓中表达水平均高于缓解组和对照组(H=19.345、16.621,P<0.008);复发组AL患儿c-IAP1、Smac蛋白表达水平高于对照组(H=8.324、8.324,P<0.008)。c-IAP1、Smac mRNA在初诊组AL患儿骨髓中表达水平均高于缓解组和对照组(H=7.973、5.942,P<0.017)。初诊组AL患儿骨髓中c-IAP1、Smac蛋白和mRNA水平在急性淋巴细胞白血病和急性髓细胞白血病间比较差异无统计学意义(t=-0.482、0.818,P>0.05)。初诊组AL患儿骨髓中c-IAP1、Smac蛋白及mRNA水平呈正相关(r=0.541、0.668,P<0.01)。结论c-IAP1、Smac蛋白参与了儿童AL的发生和发展,并且二者相互影响,但在初诊患儿中二者表达水平与白血病临床类型可能无关。     

靶向大鼠gnas基因shRNA真核表达载体的构建与鉴定

目的:构建并鉴定靶向大鼠gnas基因的小干扰RNA(short hairpin RNA,shRNA)真核表达载体.方法:根据大鼠gnas基因mRNA序列设计并合成3条shRNA特异性寡核苷酸片段,退火形成双链后克隆进入线性化pGenesil-1.1载体,并进行酶切鉴定和测序,同时构建针对大鼠GAPDH基因的阳性对照质粒和不具有基因同源性的非特异性基因的质粒做阴性对照.结果:经酶切和测序鉴定分析,构建的shRNA已成功插入载体,并且与设计序列完全相符.结论:成功构建了靶向大鼠gnas基因的shRNA真核表达载体,为后续研究Gs a 蛋白在心力衰竭中作用的体内外实验奠定了基础.     

Nesprin-1在C2C12肌原细胞系分化过程中的作用

 目的 探讨Nesprin-1在肌细胞分化过程中的作用。方法 将C₂C₁₂肌原细胞分化成肌小管,采用Western blot和免疫荧光技术检测Nesprin-1蛋白表达水平和亚细胞定位在肌小管分化成熟过程中的改变;同时利用RNA干扰技术抑制Nesprin-1蛋白的表达,观察其对C₂C₁₂肌原细胞分化的影响。结果 Nesprin-1各亚型在C₂C₁₂肌原细胞系分化过程中表达水平以及在细胞中的定位有明显改变。Nesprin-1 siRNA组与对照组相比,分化前后C₂C₁₂细胞中Nesprin-1蛋白表达明显降低,同时分化后肌组织分化成熟的蛋白标志肌球蛋白（myosin）的表达量以及肌小节的数量比对照组均明显减少（P<0.001）。结论 本文证实Nesprin-1了对骨胳肌细胞分化至关重要,不同分子大小Nesprin-1亚型在C₂C₁₂肌原细胞分化过程中发挥各自的特殊作用,在该细胞质与细胞核中的也有不同的作用。     

儿童免疫性血小板减少症360例临床特征分析

目的按目前国内外免疫性血小板减少症(ITP)诊疗建议分析ITP患儿各型临床特征。方法回顾性分析本院2008年1月1日-2013年12月30日住院治疗的360例资料完整并有随访记录的ITP患儿临床资料,统计各型临床特征等相关数据。结果 (1)360例ITP患儿中新诊断ITP、持续性ITP及慢性ITP分别占60.8%、26.9%、12.3%,男女比例为1.6∶1,各型男女比例无显著性差异(P>0.05);发病年龄以婴幼儿为主,慢性型以学龄儿为主(56.8%),各型年龄分布有显著性差异(P<0.05);发病季节春夏为主,各型无显著性差异(P>0.05)。(2)各型有诱因者分别为64.5%、53.6%、34.1%,慢性ITP诱因不明显(P<0.05);各型初诊病程分别为(11.49±7.50)d、(41.55±10.55)d、(402.83±28.26)d,慢性ITP病程较其他两型长(P<0.05);各型出血以轻度为主,重度出血有差异(P<0.05)。结论 (1)儿童ITP新诊断型多见,慢性型少见;发病年龄婴幼儿为主,慢性ITP以年长儿为主;多数患儿起病前有诱因,尤其新诊断ITP及持续性ITP。(2)各型ITP患儿临床以轻度出血为主,重度出血少见,但慢性ITP重度出血明显。     

RNAi选择性下调大鼠心肌细胞上Gsα蛋白的体外实验

目的:用RNA干扰技术(RNA interference, RNAi)选择性下调大鼠心肌细胞上乌苷酸结合蛋白(Gs)α亚基(Gs protein alphala subunit, Gsα)的表达,筛选出抑制Gsα蛋白效果最明显的特异短发夹RNA(short hairpin RNA, shRNA)表达质粒.方法:构建3条靶向gnas基因的特异与RNA质粒载体(shRNA1-3),以含非特异性shRNA编码序列的质粒载体为阴性对照(HK),用脂质体LipofectamineTM LTX & PLUS转染原代培养的大鼠心肌细胞,并设空白对照组,转染后通过半定量RT-PCR和Western blot法检测Gsα mRNA和蛋白的表达情况,以内参照三磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)进行标化.结果:shRNA1-3均使Gsα的mRNA和蛋白质表达明显降低,差异有统计学意义(P<0.01),且shRNA3的抑制效果最显著,阴性对照质粒组与空白对照组Gsα表达差异无统计学意义.结论:利用RNAi技术成功下调了原代培养的心肌细胞中Gsα的表达,并筛选出沉默效果最明显的shRNA真核表达质粒,为心肌细胞的转染提供了可行的方法.     

川崎病合并中小型冠状动脉瘤持续时间危险因素分析北大核心CSCD

目的分析川崎病(KD)患儿合并中小型冠状动脉瘤(CAA)持续时间的高危因素, 为早期、足疗程治疗提供临床指导。方法回顾性分析2018年1月至2021年1月在新乡医学院第一附属医院儿科确诊为KD的68例患儿临床资料, 根据CAA持续时间分为CAA持续时间≥8周组及CAA持续时间<8周组, 采用单因素分析筛选出与CAA持续时间相关危险因素, 进而采用多因素Logistic回归分析KD患儿CAA持续时间的独立危险因素。结果 68例住院KD患儿中, 男45例(66.18%), 女23例(33.82%);发病年龄3个月~10岁, 中位发病年龄1.59(1.02~3.19)岁。CAA持续时间≥8周组31例, CAA持续时间<8周组37例。单因素分析发现, CAA持续时间≥8周组总热程>10 d[45.16%(14/31例)比21.62%(8/37例)]、静脉注射免疫球蛋白(IVIG)前病程>10 d[54.84%(17/31例)比16.22%(6/37例)]、血小板计数>600×109/L[32.26%(10/31例)比10.81%(4/37例)]、超敏C反应蛋白>100 mg/L[38.71%(12/31例)比13.51%(5/37例)]者显著多于CAA持续时间<8周组, 2组比较差异均有统计学意义(均P<0.05);2组间性别、年龄、KD类型、病原学证据、激素应用情况、IVIG应用前热程、IVIG敏感情况、IVIG应用方式、尿白细胞情况、白细胞计数、血红蛋白、中性粒细胞比例、红细胞沉降率、谷丙转氨酶比较, 差异均无统计学意义(均P>0.05)。多因素Logistic回归分析提示IVIG应用前病程>10 d(OR=6.589, 95%CI:1.678~25.867, P=0.007)、超敏C反应蛋白>100 mg/L(OR=7.949, 95%CI:1.947~32.461, P=0.004)分别为预测KD合并中小型CAA持续时间≥8周的独立危险因素。结论 IVIG应用前病程>10 d及超敏C反应蛋白>100 mg/L是KD合并中小型CAA持续时间≥8周的独立危险因素。