应用MALDI-TOF-MS筛选紫杉醇耐药乳腺癌组织蛋白标志物

目的:应用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）系统分析紫杉醇耐药MMTV-PyMT乳腺癌小鼠组织蛋白差异谱,筛选具有潜在诊断意义的组织蛋白标志物。方法:取8只雌性MMTV-PyMT转基因小鼠,10周龄时给予紫杉醇（10 mg/kg）治疗,每周给药2次,给药4周后处死。测量肿瘤体积,分别取肿瘤体积较小和较大的4只小鼠作为紫杉醇药物敏感组和非敏感组（耐药组）。采用免疫组织化学法（IHC）检测两组肿瘤组织增殖相关因子表达情况,细胞凋亡检测法（TUNEL）检测两组肿瘤中细胞凋亡情况,苏木精-伊红（HE）染色法观察两组肿瘤组织细胞损伤程度,蛋白质印迹法（Western blot）检测两组肿瘤组织凋亡相关蛋白的表达。采用MALDI-TOF-MS系统对两组组织中的蛋白或多肽表达谱进行检测,运用ClinProTools分析软件进行分析,筛选出12个差异分子峰,建立诊断预测模型。结果:相对于紫杉醇敏感乳腺癌组织,紫杉醇耐药组乳腺癌组织细胞增殖数目明显增加,细胞凋亡明显减少。耐药组凋亡蛋白BAX和Cleaved Caspase-3表达明显减少,肿瘤细胞无明显损伤。紫杉醇敏感与耐药乳腺癌组织,共筛选出12个差异明显的分子峰值,其中耐药组有9个上调,有3个下调,筛选出5个差异最大的分子峰建立紫杉醇耐药预测模型。结论:应用MALDI-TOF-MS系统可检测乳腺癌紫杉醇敏感组与耐药组肿瘤组织蛋白差异,筛选的差异组织蛋白可能成为诊断紫杉醇耐药乳腺癌的分子标志物。     

牵拉应力在5-氮杂胞苷诱导骨髓间充质干细胞成肌过程中的动态效应

背景:国内外研究发现在一定力学环境下,体外培养的间充质干细胞其增殖分化等一系列生物学特性会发生相应变化.目的:体外观察5-氮杂胞苷与牵拉应力对大鼠骨髓间充质干细胞向肌细胞分化的调控作用.设计、时间及地点:2006-01/2007-06在上海交通大学牛物力学实验室完成的细胞观察实验.材料:清洁级3-4周龄雄性SD大鼠30只用于分离培养骨髓间充质干细胞,1～3d龄SD新生鼠4只用于建立骨骼肌阳性细胞株.化学诱导剂5-氮杂胞苷为Sigma公司产品,牵拉设备Fx-4000 Flexercell由美国Flexcell Int公司生产.方法:将传至第4代的骨髓间充质干细胞接种于Flex 6孔板.[1]设立5组行成肌家族因子表达Western-Blot检测:第1组细胞单纯经10μmol/L 5-氮杂胞苷诱导1周;第2～4组细胞以10μmol/L 5-氮杂胞苷诱导1周后,在1Hz频率、15%幅度应力条件下分别牵拉12,24,36h;第5组以新生鼠骨骼肌细胞作为阳性对照.[2]设立5组行诱导剂及牵拉应力作用的RT-PCR检测:第1组细胞给予1Hz频率、15%幅度应力牵拉24h;第2、3组分别经10μmol/L 5-氮杂胞苷诱导1,2周;第4组细胞经10μmol/L 5-氮杂胞苷诱导2周后,给与同等应力牵拉24h;第5组以新生鼠骨骼肌细胞作为阳性对照.主要观察指标:不同诱导条件及应力牵拉状态下骨髓间充质干细胞成肌家族因子的表达.结果:[1]第1组表达成肌因子MyoD与Myf5,成熟肌细胞标志MHC表达不显著;第2～4组MyoD与Myf5的表达明显增强(P<0.05),且随牵拉时间延长因子的表达逐步增强,MHC表达不显著.[2]第1组不表达成肌家族因子;第2组表达MyoD、 Myf5,第3组表达MyoD、 Myf5、 desmin,第4组几乎表达所有检測的肌细胞特异性标记.结论:经5-氮杂胞苷诱导可启动骨髓间充质干细胞向肌细胞分化,单独的牵拉应力不能诱导成肌.牵拉应力可调控5-氮杂胞苷对骨髓间充质干细胞的诱导分化进程,并且与牵拉作用时间成正性相关.     

壮骨胶囊及碳酸钙和维生素D治疗老年性骨质疏松的效果比较

目的：筛选与评价安全、有效、可长期口服的防治骨质疏松(OP)药物。方法：分别用中药壮骨胶囊及西药碳酸钙和维生素D治疗45例老年性OP患者，选择骨密度(BMD)及被测骨密度与同性别年轻人峰值骨之差别(T值)、血清骨钙素(BGP)、降钙素(CT)、雌二醇(E2)、碱性磷酸酶(AKP)、钙(Ca)、磷(P)等为观察指标。结果：中药治疗前29例老年性OP患者的BMD及血清cT，Ez分别为(0．79&;#177;0．13)g／cm^2．(10．91&;#177;10．28)pmol／L及(28.16&;#177;16．70)pmol／L；而治疗后则分别为(0.84&;#177;0．13)g／cm^2，(29．41&;#177;36．45)pmol／L及(48．28&;#177;18．85)pmol／L，治疗后均升高，较治疗前差异均有非常显著性意义(P&;lt;0．01)。西药治疗前16例老年性OP患者的BMD，BGP分别为(0．74&;#177;0．18)g／cm^2及(5．05&;#177;2．60)μg／L，而治疗后则分别为(0．77&;#177;0．14)g／cm^2及(6.29&;#177;2．42)μg／L，治疗后亦升高，较治疗前差异均有显著性意义(P&;lt;0．05)。其中中药治疗后较治疗前BMD平均上升6，6％，T平均上升0．44，OP的分度明显改善；而西药治疗后较治疗前升高5，O％，T平均上升0．27，OP的分度轻微改善。血AKP，Ca，P两组治疗前后差异无显著性意义。治疗前Ⅲ度OP患者的BMD明显低于Ⅰ，Ⅱ度。中药治疗后Ⅱ，Ⅲ度OP患者的BMD低于Ⅰ度。结论：中药壮骨胶囊及西药碳酸钙和维生素D对老年性OP治疗均有效，前者疗效似更好。     

经皮微创三枚空心钉内固定治疗青壮年股骨颈骨折

目的:探讨在X线透视下经皮微创技术三枚空心钉内固定治疗青壮年股骨颈骨折的临床应用效果。方法:对16例青壮年股骨颈骨折应用微创技术采用三枚空心钉内固定治疗。结果:16例患者均愈合,愈合率100﹪。时间短,创伤小,无髋内翻及短缩、外旋畸形。结论:X线透视下经皮微创三枚空心钉内固定治疗青壮年股骨颈骨折,操作简单,时间短,创伤小,适宜于基层医院推广。     

影像核医学多媒体教学的应用

影像核医学是以核科学技术和手段,研究医学影像学的应用及其理论的学科,是医学影像学和核科学的重要组成部分,是现代医学的重要内容.影像核医学作为影像医学专业本科教学计划中的一门必修课越来越得到重视.把握学科特点,提高影像核医学教学质量,始终是摆在我们面前的重要课题.本文结合在临床教学中实践,就如何应用多媒体来提高影像核医学教学质量进行探讨.     

窒息新生儿心肌酶测定的意义

我院具体的对30例新生儿窒息血清心肌酶的活性进行了监测，以观察其与窒息严重程度之间的关系。结果重度窒息组的心肌酶活性各项指标均高于对照组和轻度窒息组(P<0.01)，有非常显性差异。轻度窒息组心肌酶括性并项指标与对照纽有所不同。具体报告如下。     

经皮微创锁定加压接骨板内固定治疗复杂性股骨远端骨折

目的 探讨经皮微创锁定加压接骨板（LCP）内固定治疗复杂性股骨远端骨折的临床疗效。方法应用经皮微创LCP内固定治疗20例股骨远端复杂性骨折患者。结果全部获得随访,时间12～24个月,所有患者均达骨性愈合,愈合时间12～24周。根据HSS评分：优14例,良4例,可2例。结论经皮微创LCP内固定治疗股骨远端复杂性骨折具有固定稳定,血运破坏少,恢复快等优点,是一种疗效较好的生物学固定方法。     

血小板膜糖蛋白Ⅱb HPA-3多态性与天津地区汉族人群缺血性卒中风险和转归的相关性

目的 探讨血小板膜糖蛋白(glycoprotein,GP)ⅡbHPA-3基因多态性与天津地区汉族人群缺血性卒中发病风险和转归的相关性.方法 连续纳入急性缺血性卒中患者和性别、年龄相匹配的健康体检者.采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法检测GPⅡbHPA-3基因多态性.转归不良定义为6个月时改良Rankin量表评分＞2分.结果 共纳入224例急性缺血性卒中患者和98例性别、年龄相匹配的健康体检者.急性缺血性卒中组bb基因型(45.09％对15.06％;x2=40.618,P＜0.001)和b等位基因(63.84％对33.67％;x2 =50.064,P＜0.001)频率显著高于对照组;多变量logistic回归分析显示,bb基因型是缺血性卒中的独立危险因素(优势比5.838,95％可信区间2.653～ 12.843;P＜0.001).在各TOAST亚型中,大动脉粥样硬化型组bb基因型(x2=10.912,P=0.028)和b等位基因(x2 =11.801,P=0.019)频率显著高于其他各组.转归不良组大动脉粥样硬化性卒中的患者构成比(64.52％对29.63％;x2=29.456,P＜0.001)以及bb基因型(66.13％对37.04％;x2=17.422,P＜0.001)和b等位基因(75.00％对59.57％;x2=9.252,P=0.002)频率显著高于转归良好组;多变量logistic回归分析显示,bb基因型是缺血性卒中患者转归不良的独立危险因素(优势比3.842,95％可信区间1.782～8.283;P =0.001).结论 bb基因型可能是天津地区汉族人群缺血性卒中发病和转归不良的独立危险因素.     

快速鉴定幽门螺杆菌与宿主基因型的方法学研究

目的探索采用焦磷酸测序技术进行幽门螺杆菌(Hp)鉴定与耐药以及宿主胃癌易感相关基因多态性分析的可行性,为临床提供一种快速的分析手段和诊疗依据。方法提取60例胃黏膜活检标本DNA(Hp阳性、阴性各30例),PCR扩增Hp 16S rDNA,23S rDNA以及人白细胞介素1B(IL-1B)基因特异性片段,对3个片段同时进行焦磷酸测序分析。结果 30例Hp阳性标本16S rDNA测序结果一致,均为5-′CGCGCAATCAGCGT-CAGTAATG-3′,该序列可作为标志性序列来鉴定Hp;对Hp阳性标本23S rDNA 2142及2143位点的多态性分析发现2142A→G突变,该突变通常会导致Hp对克拉霉素的耐药;对60例标本IL-1B基因-31和-511位点的多态性检测表明,-31位点有两种基因型,其中A/G基因型占80.0%,G/G 20.0%;-511位点有3种基因型,其中T/C基因型占60.0%,T/T基因型占26.7%,C/C基因型占13.3%。结论运用焦磷酸测序技术进行Hp鉴定、耐药性分析以及宿主胃癌易感性分析,具有准确、快速、操作方便、通量高等优势;除了胃黏膜活检标本,该方法亦可应用于其他标本如粪便、唾液、胃液等的Hp检测,同时可推广至其他菌种的鉴定和耐药分析,在弥补甚至替代传统的病原菌检测方面具有广阔的应用前景。