突变特异性扩增系统方法检测葡萄糖-6-磷酸脱氢酶基因C1024T及G392T

突变特异性扩增系统 (Ａｍｐｌｉｆｉｅｄｒｅｆｒａｃｔｏｒｙｍｕｔａｔｉｏｎｓｙｓｔｅｍ ,ＡＲＭＳ)法是用来检测葡萄糖 6 磷酸脱氢酶 (Ｇ6ＰＤ)基因已知点突变的简便、快速、准确的方法[1 ,2 ] 。杜传书等发现的中国人中的 6种点突变中 ,占比例较高的Ｇ1388Ａ ( 2 7.8%)、Ｇ1376Ｔ( 2 5 .0 %) [3 ] 及Ａ95Ｇ[4] 的ＡＲＭＳ方法已经建立[1 ,2 ] ,而占比例较低的Ｃ10 2 4Ｔ( 5 .6 %)的ＡＲＭＳ方法还未建立 ,Ｇ392Ｔ( 8.3%)的ＡＲＭＳ方法虽已建立 ,但未经测序证实。我们建立了这两种方法 ,并经测序证实 ,现报道如下。病例和方法1　病…     

应用DMD基因内含子49上STR-PCR分析进行DMD／BMD杂合子携带者的诊断

DMD基因内含子49上的STR-PCR产物经8％中性PAGE电泳银染显色。我们获得满意的DMD／BMD杂合子携带者的诊断。这样不但避免了同位素的应用，而且摆脱了变性PAGE中脲素对银染显色的影响，从而使DMD基因的STR—PCR技术更加简便易行，结果易于分析，利于通过STR—PCR风险单体型的分析达到快速诊断DMD／BMD患者和携带者的目的．     

琼脂糖凝胶电泳检测尿粘多糖方法的建立

目的 建立一种简便、快速、准确、易于推广应用的粘多糖贮积症的诊断方法。方法 采用琼脂糖凝胶电泳，以硫酸皮肤素（ＤＳ）及硫酸软骨素（ＣＳ）为标准对照，检出患者尿中的粘多糖。结果 在３２３名疑诊病人中检出阳性者９６例，与临床相符合。结论 本法可作为临床上粘多贮积症的初步诊断及初步分型的方法。     

非小细胞肺癌淋巴结转移与nm23-H_1基因突变及mRNA表达异常关系研究

目的观察非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）组织中ｎｍ２３－Ｈ１基因的存在状况及其转录表达水平，分析肺癌恶性转移与该基因异常的关系。方法采用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ和半定量ＲＴ－ＰＣＲ方法，以正常癌旁组织及正常肺组织为对照，观察了３１例原发性ＮＳＣＬＣ中ｎｍ２３－Ｈ１基因的突变和ｍＲＮＡ表达情况。结果３１例肺癌中未发现１例存在ｎｍ２３－Ｈ１基因突变。在２０例具淋巴结转移的ＮＳＣＬＣ中ｎｍ２３－Ｈ１基因ｍＲＮＡ表达降低１４例（１４／２０），明显高于未发生淋巴转移的非小细胞肺癌（３／１１）（Ｐ＜０．０５）。结论以上结果显示，ｎｍ２３－Ｈ１为一种可在肺癌转移过程中发挥负调节作用的转移抑制基因，该基因表达水平可望作为一个肺癌转移的预测因子。     

利用体外定点诱变技术构建人突变型α-L-艾杜糖醛酸酶基因

【目的】构建突变型α L 艾杜糖醛酸酶基因 (IDUA)cDNA ,为体外表达、鉴定突变的性质提供物质基础。【方法】以野生型pcDNA3 IDUA为基础质粒 ,采用双引物法体外定点诱变技术 ,引入突变E40 4X。【结果】突变区域经PCR SSCP和测序证实诱导突变成功。【结论】本研究成功构建了突变型IDUAcDNA ,可用于下游的体外表达 ;此定点突变技术具有简便、诱变效率高等优点 ,是体外构建突变型基因的一种有效方法。     

DMD基因转录与逆转录PCR研究的历史与现状

由７９个外显子与７８个内含子构成的ＤＭＤ基因在基因组ＤＮＡ上跨越２４００ｋｂ，其中９８％的内含子ＤＮＡ序列大部分尚属未知，导致在基因组水平上全面系统地研究ＤＭＤ基因的结构及其突变存在重重无法克服的困难。而７９个外显子构成的ｍＲＮＡ只有１４ｋｂ，对其加以详细的研究则成为可能。正是由于对ＤＭＤ基因转录子及其逆转录子（ｍＲＮＡ与ｃＤＮＡ）的研究，我们才知：（１）正常ＤＭＤ基因跨越２４００ｋｂ，拥有３个启     

中国人粘多糖贮积症Ⅰ型IDUA基因突变的检测

[目的]检测中国人粘多糖贮积症Ⅰ型患者IDUA基因(IDUA)突变.[方法]采用PCR-SSCP、PCR产物直接测序等技术对35例粘多糖贮积症Ⅰ型患者的IDUA第2、6、7、8、9和10外显子及其相邻区域进行突变筛查.[结果]本研究筛查出7种突变,均为单碱基置换.一内含子区突变nt1486C→T;一中性突变nt1945G→C;1种无义突变E404X;4种错义突变F198L、L218V、A361T和V454I.[结论]中国人IDUA在第2、6、7、8、9和10外显子区存在突变.在上述检测到的7种突变中,A361T国外已确定为多态性,E404X国外已报道为重型突变.而nt1486C→T、F198L和L218V和V454I为我们首次发现和报道,可能为新突变,但其突变性质还有待于进一步鉴定.     

云南省四个少数民族中所见的G6PD基因突变型

目的 通过鉴定云南省白族、傣族等少数民族中的Ｇ６ＰＤ基因突变型,统计大理市白族Ｇ６ＰＤ缺乏症发生率及基因频率,以了解分子进化和民族起源,并为Ｇ６ＰＤ缺乏症的防治提供理论依据。方法 用错配碱基ＰＣＲ／ＲＥ、ＰＣＲ－ＳＳＣＰ、ＡＲＭＳ法和ＤＮＡ序列分析等检测Ｇ６ＰＤ基因点突变。结果 经ＤＮＡ序列分析确认,首次在白族人群中发现Ｇ６ＰＤ Ｇ１３８８Ａ,发生率４２％、Ｇ１３７６Ｔ发生率２１％、Ａ９５Ｇ发生率     

葡萄糖-6-磷酸脱氢酶cDNA C1311T的多态性

目的 将突变特异性扩增系统法引入葡萄糖－６－磷酸脱氢酶Ｃ１３１１Ｔ突变型的检测,并利用它调查Ｃ１３１１Ｔ在正常人群中的发生频率,探讨此突变伴发的ＩＶＳ－１１ Ｃ９３５是否与酶活性降低有关。方法 测序检测Ｇ６ＰＤ缺乏症患者中的Ｃ１３１１Ｔ突变,利用已证实为Ｃ１３１１Ｔ标本探索Ｃ１３１１Ｔ的ＡＲＭＳ检测法最佳条件,用此法来确定中国人中Ｃ１３１１Ｔ的发生频率。