分子技术在流感病毒诊断中的应用

流感病毒(influenza virus)属于正黏病毒科,根据病毒内部蛋白抗原性的不同分为甲(A)、乙(B)、丙(C)三型.根据病毒表面结构蛋白血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)抗原性的不同,又将A型流感分为不同的血清亚型,已发现有15种HA亚型(H1～H15)和9种NA亚型(N1～N9)     

AT1R基因多态性与湖南汉族人群原发性高血压的关系

目的：探讨湖南地区汉族人群血管紧张素Ⅱ-1型受体（AT1R）基因A1166C多态性与原发性高血压（EH）的相关性。方法：利用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）对湖南地区汉族EH患者和健康对照者各100例的AT1R/A1166C等位基因进行检测,统计分析两组间基因型和等位基因的频率分布。结果：EH组AT1R基因型频率分布为AA 66%（66/100）、AC 31%（31/100）、CC 3%(3/100),其中EH组AC基因型频率和C1166等位基因频率高于正常对照组（0.31:0.14,P＜0.05;0.19:0.08,P＜0.05）,EH组AA基因型频率低于正常对照组（0.66:0.88,P＜0.05）。结论：AT1R基因A1166点突变等位基因C与湖南地区汉族人群患EH具有一定的关系,可能增加EH的遗传易感性。     

隐血与蛋白对尿HIV-1抗体检测的影响

目的 研究尿液中蛋白含量和隐血程度对尿液中HIV-1抗体检测结果的影响.方法 平行采集受检者的血液与尿液标本,分别用血液和尿液酶联免疫吸附法检测HIV-1抗体,检测尿液HIV-1抗体结果为假阳性与真阴性的尿标本中免疫球蛋白、转铁蛋白、尿微量清蛋白与尿α1微球蛋白的含量,且检测其隐血情况.结果 真阴性组与假阳性组尿液中各种相应的蛋白含量差异有显著性(P＜0.001),假阳性组尿液中所含的蛋白均高于真阴性组相应的蛋白含量(P＜0.001).结论 当尿液中蛋白含量高或存在隐血阳性时,用HIV-1型尿液抗体诊断试剂盒检测尿液HIV-1抗体易出现假阳性.     

隐血与蛋白对尿HIV-1抗体检测影响的研究与分析

[ 摘要 ] 目的 评价一种尿液HIV-1抗体检测试剂的特异性,研究尿液中蛋白含量和隐血程度对尿液中HIV-1抗体检测结果的影响。方法 平行采集受检者的血液与尿液标本,分别用血液和尿液酶联免疫吸附法检测HIV-1抗体,检测尿液HIV-1抗体结果为假阳性与真阴性的尿标本中免疫球蛋白、转铁蛋白、尿微量清蛋白与尿α1微球蛋白的含量,且检测其隐血情况。 结果 真阴性组与假阳性组尿液中各种相应的蛋白含量差异具有显著性(P<0.001),假阳性组尿液中所含的蛋白均高于真阴性组相应的蛋白含量(P<0.001)。结论 当尿液中蛋白含量高或存在隐血阳性时,用HIV-1型尿液抗体诊断试剂盒检测尿液HIV-1抗体易出现假阳性。     

SCNN1A基因多态性与土家族、苗族及汉族人群原发性高血压相关性的研究

目的:探讨上皮细胞钠通道α亚基(SCNN1A)基因单核苷酸多态性位点rs2228576与湘西土家族、苗族和汉族人群原发性高血压(EH)的相关性。方法:用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术分析土家族(120例)、苗族(117例)和汉族(125例)人群EH患者(EH组)与正常人群[正常对照组(土家族119例、苗族125例、汉族122例)]SCNN1A等位基因频率分布状况。结果:土家族、苗族和汉族均存在3种AA、AG及GG基因型;土家族、苗族和汉族正常对照组基因型频率分别为(0.109,0.538,0.353;0.152,0.472,0.376;0.164,0.541,0.295);各族EH组与正常对照组基因型频率差异均无统计学意义(χ2=5.662,P>0.843);等位基因频率差异均无统计学意义(χ2=3.538,P>0.618)。结论:3个民族均存在SCNN1A基因rs2228576多态性位点,但该多态性位点与3个民族EH无明显相关性。     

SYBR GreenⅠ实时PCR检测甲型H1N1与季节性流感病毒方法的建立

目的：建立一种检测甲型H1N1、季节性H1N1、H3N2与乙型流感病毒的SYBR GreenⅠ实时荧光PCR方法。方法：设计针对甲型H1N1、季节性H1N1、H3N2与乙型流感病毒HA基因的引物,分别进行SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR反应,同时进行熔解曲线和Tm值分析,并作灵敏度和重复性试验。 结果：结果表明该方法与H5、H7、H9亚型流感病毒及副流感病毒1、2、3型均无交叉反应。构建的荧光定量标准曲线循环阈值与模板浓度呈良好的线性关系,扩增效率为：95.588%,检测灵敏度为101copies/反应体系,结果重现性好。成功地验证性检验了32份盲样标本。结论：本研究建立的SYBR GreenⅠ实时荧光PCR方法敏感、不需荧光标记探针、成本低及高通量,能用于人类流感病毒的分型检测。     

医学检验本科分子诊断学实验教学方法改革的体会

实验教学是医学教学体系中相当重要的组成部分,在培养学生创新与动手能力等方面有不可替代的作用。分子诊断学基本理论的建立依赖于实验观察,它是一门以实验为主的学科。实验教学在检验专业分子诊断学课程的教学中占有重要地位。高水平的实验教学要把培养学生的创新能力放在首位,给学生尽可能大的实验自由度,使其领会实验设计的思想,分析思考实验条件的改变对结果的影响,使学生的实验综合能力达到新的台阶。     

荧光定量RT-PCR在检测流感病毒中的应用

流感病毒(influenza virus)是一类具有高度传染性的呼吸道病毒,是线状单股负链RNA病毒,根据核蛋白和基质蛋白的抗原性,流感病毒可以分为甲(A)、乙(B)、丙(C)3种类型.甲型流感病毒基因经常发生突变,造成不同程度的季节性流感流行和流感大流行[1].