生活方式及心理因素对体外受精-胚胎移植的影响

越来越多的证据表明相同治疗条件下,不孕夫妇的生活方式对体外受精-胚胎移植的成功有重要影响,但其具体作用机制有待进一步研究.体外受精-胚胎移植治疗过程中,不孕夫妇的负性心理影响治疗的成功率,心理干预可有效地提高妊娠率.目前,有关心理因素影响体外受精-胚胎移植成功率的作用机制及更为有效的心理干预措施仍在研究中.     

胰岛素和睾酮对Ishikawa细胞葡萄糖转运蛋白4表达的影响

目的探讨胰岛素(INS)和睾酮(T)对多囊卵巢综合征(PCOS)子宫内膜腺上皮细胞生长的影响和葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)表达的调节机制。方法体外培养Ishikawa细胞,予不同浓度INS(90、60、30、3、0.3 U/L)或T(10-3、10-4、10-5、10-6、10-7mmol/ml)刺激Ishikawa细胞48 h,MTT法检测INS、T对Ishikawa细胞生长的作用;免疫细胞化学检测GLUT4蛋白在Ishikawa细胞定位表达;分别以30 U/L INS和10-5mmol/ml T刺激Ishikawa细胞24和48 h,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法测定INS和T对Ishikawa细胞GLUT4 mRNA表达的影响。结果(1)不同浓度的INS均可促进Ishikawa细胞的生长,随着INS浓度的增加,INS促进Ishikawa细胞生长作用越强,INS浓度自0.3~30 U/L时,Ishikawa细胞生长依次加强,与对照组相比均有显著性差异(P<0.01)。INS浓度达60、90 U/L时,细胞生长状况与INS浓度为30 U/L相似。不同浓度的T均可抑制Ishikawa细胞的生长,随着T浓度的增加,T抑制Ishikawa细胞生长作用越明显。T浓度自10-7、10-6、10-5mmol/ml,Ishikawa细胞生长依次减弱,与对照组相比均有显著性差异(P<0.01,P<0.05),T浓度达10-4、10-3mmol/ml时,细胞生长抑制状况与T浓度10-5mg/ml相似。(2)GLUT4蛋白,定位表达于Ishikawa细胞的细胞浆内。(3)Ishikawa细胞中GLUT4 mRNA表达,在INS组和T组均较对照组减弱(P<0.01,P<0.05),INS组比T组减弱更明显(P<0.05),且INS和T作用24和48 h GLUT4 mRNA表达无显著性差异(P>0.05)。结论不同浓度INS和T均可影响Ishikawa细胞生长,并降低GLUT4 mRNA的表达,推测PCOS高胰岛素、高雄激素血症的病理生理特性有可能影响子宫内膜的代谢过程,与子宫内膜的病变相关。     

GLUT4在多囊卵巢综合征大鼠子宫内膜中的表达及意义

目的： 探讨葡萄糖转移因子4（GLUT4）在多囊卵巢综合征（PCOS）大鼠子宫内膜中的表达，评价其与子宫内膜胰岛素抵抗(IR)的关系。方法: 54只85日龄SD雌性大鼠，随机分为：① 对照组（20只）；② PCOS组（17只）；③ 二甲双胍治疗组（17只）。其中后两组先参照Poretsky等的方法复制PCOS大鼠模型，造模成功后，再分别喂服安慰剂或二甲双胍， 14 d后断头处死各组大鼠并取材。采用免疫组织化学染色Elivision^TM Plus两步法检测对照组、PCOS组及治疗组大鼠子宫内膜GLUT4蛋白的表达。结果: PCOS组大鼠子宫内膜腺上皮中GLUT4和INS-R蛋白表达明显低于对照组（P＜0.01，P＜0.05），INS蛋白表达水平明显高于对照组水平（P＜0.01）；治疗组GLUT4表达显著高于PCOS组（P＜0.01），但仍低于对照组（P＜0.01），INS表达较PCOS组显著降低（P＜0.05），但仍高于对照组（P＜0.05）；子宫内膜间质中无GLUT4的表达，INS和INS-R表达情况与腺上皮相似。结论: PCOS大鼠子宫内膜GLUT4表达减少和子宫内膜的IR有关。     

两种药物促排卵过程中PCOS患者AMH变化

目的：探讨来曲唑（LE）和尿促性腺激素（HMG）治疗多囊卵巢综合征（PCOS）患者在促排卵过程中抗苗勒氏管激素（AMH）的变化。方法：选择PCOS患者50例，随机分为2组，分别给予来曲唑2．5mg／d口服，共5d；或低剂量递增法肌注hMG；对照组50例；阴道超声计数小卵泡数和优势卵泡数，测定月经第3天、第8天以及hCG日（对照组LH峰日）血AMH、E2。结果：在促排卵过程中，hMG组AMH水平逐渐降低，与E2升高间成负相关（r＝0．65）；LE组AMH水平略有下降但无显著性；对照组AMH值无明显变化。结论：LE治疗过程中PCOS患者AMH变化及卵泡生长更接近自然月经周期。     

前列腺素E2对未破裂卵泡黄素化综合征体外受精-胚胎移植结局的影响

目的 探讨前列腺素E2(PGE2)对未破裂卵泡黄素化综合征(LUFS)患者接受体外受精-胚胎移植(IVF-ET)助孕过程中卵母细胞、胚胎质量、受精率、卵裂率、妊娠率等结局的影响.方法 随机选择首次接受IVF-ET治疗的LUFS患者20例为LUFS组;同期就诊因男方或输卵管因素接受IVF-ET治疗的患者20例为对照组.2组均于HCG日留取血清测定雌二醇(E2)水平,并于取获卵日留取无血卵泡液测PGE2水平.结果 与对照组比较,LUFS患者卵泡液中PCE2水平明显降低(P<0.01),HCG日血清E2水平及获卵数、受精率、卵裂率、优质胚胎率及妊娠率均降低(P均<0.05).结论 PGE2可能影响LUFS患者卵子的发育、卵母细胞的质量,进而影响胚胎的质量,降低妊娠率.     

血管内皮生长因子在自发流产领域的研究进展

血管内皮生长因子(VEGF)是一种重要的血管生成因子,主要由血管内皮细胞产生,是由两个相同亚基以二硫键交联结合而成的一种具有高度保守性的糖蛋白。VEGF有4种不同变异体,3个家族成员,其表达受缺氧、转化生长因子、血小板源性生长因子、一氧化氮、一些重要的金属离子及原癌基因、抗癌基因等调节。VEGF具有强大的促血管生成作用,在人体代谢旺盛的组织如胚胎组织、胎盘、增生期子宫内膜、黄体等高水平表达;VEGF可促进胎盘血管的生成,增加血管通透性。近年来研究表明VEGF功能异常、表达缺乏可引起胚胎种植、胎盘形成等障碍,是造成自发流产的重要原因。     

提高胚胎移植技巧的方法

在体外受精-胚胎移植过程中胚胎移植技巧相当重要,备受关注.为提高此项技巧需避免胚胎移植过程对胚胎着床的不利因素,其方法有:试验性胚胎移植、超声测定正确估计子宫腔,使用柔软移植管、轻柔操作、尽量避免使用宫颈钳减少对子宫刺激引起收缩,去除宫颈黏液,在尽量减少对子宫内膜损伤的情况下保证移植管通过宫颈内口,将胚胎轻柔地送入子宫腔内,从而最终提高临床妊娠率.     

电压门控钾离子通道对卵巢黄素化颗粒细胞增殖、分泌及凋亡的影响

目的 探讨电压门控钾离子通道(Kv)对人绒毛膜促件腺激素(hCG)诱导的卵巢黄素化颗粒细胞增殖、分泌及凋亡的影响.方法 收集2007年11月至2008年2月行体外受精-胚胎移植患者的卵泡液共25份,密度梯度法获得卵巢黄素化颗粒细胞,采用RT-PCR技术检测颗粒细胞中KvmRNA的表达.将培养贴壁后的颗粒细胞按干预方式分为空白组、4氨基吡啶(4-AP)组、hCG组和hCG+4-AP组共4组,hCG和4-AP的终浓度分别为1250 U/L、5 nmol/L.培养24 h后,采用化学发光法测定各组孕酮水平;采用流式细胞仪和分光光度法检测各组颗粒细胞的凋亡情况;采用四甲基偶氮唑监(MTT)比色法检测各组颗粒细胞的增殖、抑制情况.结果 (1)培养24 h后,空白组、4-AP组、hCG组和hCG+4.AP组颗粒细胞中的孕酮水平分别为(547 ±64)、(206 ±32)、(1991±172)和(763 ±79)nmol/L.4-AP组、hCG组分别与空白组比较,差异均有统计学意义(P<0.01);hCG+4-AP组与hCG组比较,差异也有统计学意义(P<0.01).(2)培养24 h后,4-AP组颗粒细胞抑制率为19.7%,与空白组(0)比较,差异有统计学意义(P<0.05);hCG+-AP组为34.6%,与hCG组(0)比较,差异也有统计学意义(P<0.01).4-AP组、hCG+4-AP组的颗粒细胞增殖率分别为80.3%、68.2%,分别与空白组(100%)比较,差异均有统计学意义(P<0.05、P<0.01);hCG组(100.4%)高于空白组,但差异无统计学意义(P>0.05).(3)培养24 h后颗粒细胞的凋亡率及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase-3)活性,4-AP组分别为(40±5)%和0.049 ±0.009,均高于空白组[(17±4)%和0.029±0.008],hCG+4-AP组[(25±4)%和0.039±0.008]也均高于hCG组[(15 ±3)%和0.022 ±0.007],差异均有统计学意义(P<0.01).结论 4-AP能够抑制卵巢黄素化颗粒细胞和经hCG诱导的颗粒细胞的孕酮分泌,町能与其抑制增殖、促进凋亡有关.Kv在卵巢黄素化颗粒细胞分泌、增殖及凋亡过程中起重要的作用.