耳蜗外毛细胞两种胞内钙库的初步探讨

为探讨毛细胞胞内钙库的种类 ,本文观察了在无钠、无钙和含镧液体中 ,在不受胞外 Ca2 +内流和质膜上 Ca2 +转运机制影响的条件下 ,和在三磷酸肌醇敏感钙库的工具药 thapsigargin和 ryanodine敏感钙库的工具药 caffeine作用下 ,毛细胞胞内游离钙([Ca2 + ] i)的变化过程。分离的豚鼠耳蜗外毛细胞经钙敏荧光染料 5μmol/L fluo-3染色后 ,用激光扫描共聚焦显微镜监测 ,以 fluo-3荧光相对值指示毛细胞 [Ca2 + ] i的高低。 3 0 nmol/L thapsigargin使外毛细胞 [Ca2 + ] i由静态值 1.0增至 1.64± 0 .76,再加入 10mmol/L caffeine后更增至 2 .45± 1.5 9(x± s,n=11,F=7.90 ,P<0 .0 1)。Q值检验示两种试剂引起外毛细胞 [Ca2 + ] i增高程度的差别有极显著意义 (P<0 .0 1) ,表明毛细胞内有对三磷酸肌醇敏感和对 ryanodine敏感的两种钙库参与了胞内 Ca2 + 释放机制     

新生小鼠耳蜗体外培养的扫描电镜观察

目的：了解新生小鼠耳蜗在体外条件下存活状况，为体外急性实验提供组织模型。方法：对出生１～３ｄ小鼠耳蜗以体外悬浮培养方法，并用扫描电镜对其外毛细胞的结构和形态进行观察。结果：采用这种方法培养的外毛细胞，在存活的２０ｈ内，其细胞形态和结构无明显改变。结论：耳蜗悬浮培养对短期离体外毛细胞的研究不失为稳定可靠的方法，而扫描电镜也补充证实为一种有效、简便的观察手段     

二咖啡酰奎宁酸对大鼠肝原代细胞保护作用的研究

目的　采用肝原代细胞培养及四氯化碳损伤法 ,观察 1 ,5 二 O 二咖啡酰奎宁酸对肝细胞的保护作用 ,并通过体外实验初步探讨二咖啡酰奎宁酸保护肝细胞的作用机制。方法　采用肝细胞消化酶两步灌注法 ,肝细胞消化液消化肝细胞 ,梯度离心分离肝细胞 ,细胞获得量为 (1 - 1 0 )× 1 0 7·ml-1 ,肝细胞活力在 90 %以上 ,以此为靶细胞。并利用四氯化碳损伤方法制造肝细胞损伤模型。分别采用3 H -胸腺嘧啶 (3 H -TdR) ,3 H -脯氨酸 (3 H -Pro)掺入 ,流式细胞术等方法 ,观察二咖啡酰奎宁酸对肝细胞的增殖、活力、凋亡及细胞周期等的影响 ,并测定天门冬氨酸转移酶活性。结果　二咖啡酰奎宁酸在 7.8～ 2 5 0mg·L-1浓度对肝细胞无明显毒性作用 ,能促进正常及四氯化碳损伤的肝细胞增殖及增强细胞活力 ,降低细胞上清的天门冬氨酸转移酶 (AST)活性 ,抑制四氯化碳引起的肝细胞凋亡以及改变受损细胞周期。结论　二咖啡酰奎宁酸具有显著的肝细胞保护作用 ,其作用机制为促进肝细胞的增殖及活力 ,抑制受损肝细胞的凋亡 ,并可明显降低天门冬氨酸转移酶水平     

溴氰菊酯对白纹伊蚊C6／36细胞株的杀伤作用及对其形态影响的研究

本文采用ＭＴＴ微量酶反应比色法，研究了溴氰菊酯对白纹伊蚊Ｃ６／３６细胞的杀伤作用、形态影响以及受损细胞的恢复。结果发现用溴氰菊酯处理２４ｈ后，对Ｃ６／３６细胞的半数毒性浓度（ＩＣ５０）为７４８８μｇ／ｍｌ，且毒性作用强度随着药物浓度增加而增强。溴氰菊酯浓度在２０μｇ／ｍｌ以上时可以诱发Ｃ６／３６细胞形态学改变，表现为细胞呈多形性、细胞间有间隙、胞质内充满颗粒，以后随药物浓度的升高，胞质出现空泡、染色质凝成粗大颗粒或无结构大块、大片细胞脱落、崩解、死亡。高浓度溴氰菊酯（１６０μｇ／ｍｌ）作用于Ｃ６／３６细胞，其受损细胞的恢复与作用时间有关，作用２４ｈ的细胞，在经历一段生长停滞后，可缓慢恢复，而作用４８ｈ的细胞，则不可逆转的死亡     

中药模拟月经周期治疗不孕症80例

不孕症为妇科常见病,约占育龄夫妇的8～17%,病因复杂,其中排卵功能障碍是重要原因,约占25～30%。我院应用中药人工周期治疗排卵障碍性不孕的疗效满意,现报告如下：     

中药杜仲抗HIV作用的实验研究

目的 观察中药杜仲及其单体化合物抗HIV作用，为寻找新的有效治疗艾滋病药物提供实验依据。方法 用植物化学的方法从中药杜仲中提取单体化合物；以HIV病毒感染的MT4细胞为实验模型，以病毒引起合胞体的产生为评价指标，观察药物的作用。结果 从中药杜仲中获得6个单体化合物，其中氯原酸、咖啡酸、表儿茶素、儿茶素等4个单体化合物可有效保护病毒感染的细胞，使其不产生病变。咖啡酸和儿茶素的效果尤为显著，IC50值均为50μg.mL^-1。结论 杜仲提取物及其单体化合物具有抗HIV作用，儿茶素作用为新的发现。     

水蛭水煎液抗栓作用机制的体外实验研究

目的研究水蛭提取液的抗凝和纤溶作用。方法观察水蛭水煎液及其醇溶和非醇溶部分抑制凝血酶引起纤维蛋白 (Fb)凝块形成的活性 ,纤维蛋白平板和SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳分析各提取液水解Fb和纤维蛋白原 (Fbg)的作用。结果水煎液及其醇溶部分可抑制Fb凝块形成 ,非醇溶部分无此作用。水煎液及其非醇溶部分可水解Fbg和Fb ,且以α链为主 ,对β和 链及牛血清白蛋白的水解作用弱 ;醇溶部分对这些蛋白的水解作用不明显。结论水蛭水煎液的醇溶和非醇溶部分分别含抗凝和纤溶物质 ,其纤溶作用具有相对的特异性     

钙离子载体ionomycin引起内耳毛细胞胞内游离钙变化的研究

为研究听毛细胞的钙信号转导 ,观察了钙离子载体 ionomycin引起毛细胞胞内游离钙变化的过程。分离的豚鼠耳蜗外毛细胞经钙敏荧光染料 fluo-3和 fura-red染色后 ,用激光扫描共聚焦显微镜进行检测 ,以 fluo-3 /fura-red荧光比值指示胞内游离钙浓度高低。 5～ 10μmol/L ionomycin作用后 ,外毛细胞胞内游离钙由静态比值 1.69± 0 .5 9增至峰值时的 2 .78± 1.43 (x± s,n=10 ,P<0 .0 5 )。外毛细胞胞内游离钙增高的时程有两种模式 ,一种为胞内游离钙在药物作用后 10～ 3 5 s即有明显增加 (n=6) ,部分呈双相升高 ;另一种在药物作用后经过约 2 0 0～ 3 0 0 s的潜伏期 ,胞内游离钙方出现明显增加 (n=4)。一个外毛细胞在ionomycin作用后有钙波形成。ionomycin作用后外毛细胞胞内游离钙动态变化的多种模式显示了其作用机制和内耳毛细胞钙调控过程的复杂性 ,保证了钙在复杂的听觉外周过程中起重要的调节作用