上海出现PER-1型超广谱β内酰胺酶

目的 分析多重耐药鲍曼不动杆菌148号试验菌株耐β内酰胺抗生素的原因及耐药性的转移能力。方法 用等电聚焦电泳试验和三相水解试验分析148号试验菌株所产β内酰胺酶，并进行初步分类，再用聚合酶链反应(PCR)扩增和PCR产物测序方法确认β内酰胺酶基因。结果 148号试验菌株产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)，经分子生物学方法证实有blaPER—1基因，同时还有aacA4基因。结论 148号试验菌株耐β内酰胺抗生素的原因，可能是产生了可转移的PER—1型ESBLs，blaPER—1基因位于质粒上。     

2005年上海瑞金医院细菌耐药性监测

目的了解2005年我院临床分离菌的分布和耐药特征,指导临床合理使用抗菌药物。方法采用纸片扩散法(K-B法)对我院临床分离的菌株进行药敏试验并对肠杆菌科细菌进行ESBL检测,按CLSI2005年标准判定药敏结果,用WHO-NET5.3软件进行数据分析。结果2005年我院共分离细菌3960株,其中革兰阴性杆菌2448株,占61.8%,革兰阳性球菌1512株,占38.2%。大肠埃希菌和金葡菌分别占革兰阴性杆菌和革兰阳性球菌的首位。大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌中ESBLs的检出率分别为39.5%、35.8%和6.6%。32.2%鲍曼不动杆菌和10.1%铜绿假单胞菌为泛耐药株(只对多黏菌素敏感);葡萄球菌属中MRSA和MRCNS的检出率分别为69.0%和80.4%;从肠球菌属中检出1株耐万古霉素的屎肠球菌。结论从我院住院患者分离的细菌耐药性比较严重,应该加强监测,指导临床合理使用抗菌药物。     

泛耐药鲍曼不动杆菌ICU交叉感染防控策略

目的探索防控泛耐药鲍曼不动杆菌交叉感染的有效方法。方法2005年收集RICU患者分离的泛耐药鲍曼不动杆菌共7株,采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)进行分型,分析相关临床资料,实施"降阶梯防控策略"。结果4例患者检出的5株泛耐药鲍曼不动杆菌药物敏感试验相同,存在交叉感染高危因素,PFGE图形一致,明确存在交叉感染;采取"降阶梯防控策略"后,无其他患者发生交叉感染。结论"降阶梯防控策略"对控制泛耐药菌交叉感染有重要临床意义。     

2019年CHINET三级医院细菌耐药监测

目的监测国内主要地区医疗机构临床分离菌对抗菌药物的敏感性。方法对国内主要地区36所三级医院临床分离菌采用纸片扩散法或自动化仪器法按CHINET统一监测方案进行抗菌药物敏感性试验。按CLSI文件标准判断结果。结果收集2019年1-12月上述医院临床分离菌共249 758株,其中革兰阳性菌占29.0%,革兰阴性菌占71.0%。金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌和其他凝固酶阴性葡萄球菌(除假中间葡萄球菌和施氏葡萄球菌)中甲氧西林耐药株的检出率分别为31.4%、82.4%和78.3%。甲氧西林耐药株(MRSA、MRSE和MRCNS)对绝大多数抗菌药物的耐药率均显著高于甲氧西林敏感株(MSSA、MSSE和MSCNS)。MRSA中有92.6%的菌株对甲氧苄啶-磺胺甲噁唑敏感;MRSE中有89.0%的菌株对利福平敏感;未发现万古霉素耐药株。肠球菌属中粪肠球菌对多数测试抗菌药物的耐药率均显著低于屎肠球菌,两者中均有少数万古霉素耐药株。2019年儿童和成人中分离的肺炎链球菌中PSSP(95.2%和95.3%)所占比例较2018年有所上升,PISP和PRSP的检出率有所下降。除肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类的耐药率为27.6%外,肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗生素仍高度敏感,多数菌属的耐药率低于10%。2005-2019年15年的监测数据显示肺炎克雷伯菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率呈持续上升趋势(3.0%和2.9%对25.3%和26.8%)。此外,不动杆菌属对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为73.6%和75.1%;铜绿假单胞菌对上述两药的耐药率分别为27.5%和23.5%。结论临床分离菌对常用抗菌药物的耐药率仍呈增长趋势,尤其是碳青霉烯类耐药革兰阴性杆菌。为应对严峻的全国细菌耐药形势,需各相关部门协作以遏制细菌耐药。     

泌尿生殖道分离无乳链球菌药物敏感性分析

目的了解泌尿生殖道无乳链球菌感染及耐药状况，为临床用药提供依据。方法对临床送检的泌尿生殖道标本常规培养鉴定，并对分离出的无乳链球菌进行纸片扩散法药敏试验，对红霉素耐药、克林霉素敏感的菌株做D试验检测。结果144株无乳链球菌（尿77株，前列腺液36株，阴道分泌物31株）药敏结果显示，对万古霉素、利奈唑胺、青霉素和头孢曲松的耐药率最低，全部144株无乳链球菌中未发现耐药株；左氧氟沙星的耐药率较低，为16．2％；红霉素和克林霉素耐药率较高，分别为56．2％和53．5％。D试验阳性率为26．7％。结论从泌尿生殖道分离的无乳链球菌对青霉素、氨苄西林和头孢菌素类抗菌药物的敏感性较高，但对大环内酯类和克林霉素已有一定的耐药。     

从肺炎克雷伯菌临床菌株中检出质粒介导的AmpC DHA-1型β-内酰胺酶基因

目的研究肺炎克雷伯菌的耐药机制,检测肺炎克雷伯菌中AmpC酶的基因.方法用纸片扩散法药敏试验和三相水解试验,从23株耐药的肺炎克雷伯菌临床菌株中初筛产AmpC酶的菌株;用PCR扩增耐药基因,将试验产物测序,并在Genbank中进行比对;用转化试验确证耐药基因是否通过质粒传播.结果发现3株肺炎克雷伯菌产诱导型质粒介导的DHA-1型AmpC β-内酰胺酶.结论国内首次发现肺炎克雷伯菌出现质粒介导的DHA-1型AmpC β-内酰胺酶.     

105株志贺菌流行菌株的血清分型及耐药性分析

目的　调查志贺菌在上海地区流行的主要血清型和耐药性。方法　收集临床分离的志贺菌 1 0 5株进行生化鉴定、血清学分型和抗生素敏感性试验。结果　 1 0 5株志贺菌中 5 1株为宋氏志贺菌 ,占 4 8.6 % ;5 4株为福氏志贺菌 ,占 5 1 .4 % (包括 5株福氏变异株 ,占总数的 4 .7% )。宋氏志贺菌对抗菌药物的敏感率依次为氟喹诺酮类 1 0 0 %、头孢噻肟 94 .1 %。而福氏志贺菌对抗菌药物的敏感率依次为头孢噻肟 98.1 %、氟喹诺酮类70 %。结论　上海地区志贺菌感染以福氏志贺菌和宋氏志贺菌为主 ,福氏志贺菌中以福氏 2型为主 ,占 6 6 .7% ,其次为福氏 1型 ,占 2 0 .4 %。福氏志贺菌对各种抗生素耐药性有增高趋势 ,必须引起临床重视     

TEM-1β内酰胺酶介导的大肠埃希菌对哌拉西林-他唑巴坦和头孢哌酮耐药机制的研究

目的探讨临床分离大肠埃希菌RJ904对阿莫西林-克拉维酸、哌拉西林-他唑巴坦等含β内酰胺酶抑制剂抗菌药物和头孢哌酮耐药,而对头孢西丁、头孢噻肟敏感的机制。方法通过三相水解试验了解大肠埃希菌RJ904所产酶的水解特性;以大肠埃希菌J53Azr为受体菌,临床菌株RJ904为供体菌,通过接合试验了解该耐药特性是否由质粒介导;通过"鸟枪法"随机克隆试验将耐药质粒经BamHI和HindⅢ双酶切后的片段插入到克隆载体pACYC184中表达并测序,明确介导该耐药特性的基因;通过重叠延伸法定点突变及亚克隆了解启动子对耐药基因表达的影响。结果菌株RJ904中的酶可水解哌拉西林-他唑巴坦、头孢哌酮,但不水解头孢西丁、头孢噻肟,而且其耐药性可通过质粒接合转移。耐药质粒经BamHI和HindⅢ酶切后重组到载体pACYC184中的3.9 kb双酶切片段,含有大小861 bp的blaTEM-1B基因,其上游的启动子为Pa/Pb。该重组载体表达后对头孢哌酮、哌拉西林-他唑巴坦等含酶抑制剂抗菌药物耐药,而对头孢西丁、头孢噻肟敏感,重组载体中blaTEM-1B基因启动子经32位的T→C定点突变后,由强启动子Pa/Pb变为弱启动子P3,突变后的重组质粒转化入大肠埃希菌DH5α后所表达的耐药性与突变前相比MIC值均有较大下降。结论本试验首次证实在大肠埃希菌中Pa/Pb启动子调控TEM-1β内酰胺酶的高表达可使细菌对阿莫西林-克拉维酸、哌拉西林-他唑巴坦等含酶抑制剂抗菌药物和头孢哌酮耐药,而且这种耐药基因位于转座子和质粒上,可通过接合转移扩散。     

上海地区3所医院MRSA的随机扩增多态DNA分型

目的分析上海3所医院分离的MRSA分布现状,以确定在这些医院内是否存在MRSA流行。方法用苯唑西林纸片扩散法、头孢西丁纸片扩散法、mecA基因扩增等方法检测MRSA,用随机扩增多态DNA(RAPD)法对所分离的112株MRSA进行同源性分析。结果RAPD法将检测菌株分为4个型别(A～D型),其中RAPDC型是上述2所医院的惟一流行菌株,B型和C型存在于另1所医院。结论在上述3所医院内存在相对单一的MRSA流行株。     

D试验和多重PCR检测红霉素耐药葡萄球菌

目的了解红霉素耐药的葡萄球菌对克林霉素的耐药表型和基因型，指导临床合理使用抗生素。方法用NCCLS标准D试验检测红霉素和克林霉素的耐药表型，通过多重PCR检测耐药基因ermA、ermC和msrA。结果所有144株葡萄球菌中，84株（58．3％）对红霉素和克林霉素耐药（cMLS），27株（18．8％）对红霉素耐药对克林霉素敏感但D试验阳性（iMLS），33株（22．9％）对红霉素耐药，对克林霉素敏感但D试验阴性（MS）。在MS型耐药的菌株中均只检测到msrA基因，在cMLS和iMLS型耐药的菌株中，除了1株3种基因均阴性外，其他均检测到ermA或ermC基因。在金葡菌中iMLS型耐药的菌株以ermC基因稍多（3／5），而cMLS型耐药的菌株以ermA基因居多（56／62）；在凝固酶阴性葡萄球菌中iMLS型和cMLS型耐药的菌株均以ermC基因居多（分别为22／22和11／14）结论iMLS型耐药的葡萄球菌在临床比较多见，多重PCR和D试验均可对其鉴别，临床微生物实验室应常规进行D试验。