食源性金黄色葡萄球菌杀白细胞毒素和葡萄球菌A蛋白的多重PCR检测法

目的建立食源性金黄色葡萄球菌杀白细胞毒素luk-F、luk-S和葡萄球菌A蛋白SPA基因的多重PCR检测方法。方法设计luk-F、luk-S和SPA基因的引物,利用单重PCR方法和测序验证引物的特异性;建立多重PCR快速检测方法,并对方法的特异性进行评价。结果利用单对引物对实验室的多个菌株进行盲筛,出现的条带均为单一条带,且与目的片段长度一致。多重PCR反应体系:25μl套装反应液2,上、下游引物(20μmol/L)各0.4μl,0.25μl套装反应液1,基因组模板6μl,加超纯水至50μl。扩增条件:94℃预热2 min;94℃保持30 s,54℃保持60 s,72℃保持60 s,34个循环;72℃延伸5 min。结论该方法对金黄色葡萄球菌有很好的特异性,快速简便,可以同时对大量菌株进行筛选。     

天津市武清区健康人群EV71和Cox A16中和抗体阳性状况及影响因素分析

目的 调查天津市武清区健康人群肠道病毒71型（EV71）和柯萨奇病毒A组16 型（Cox A16）中和抗体阳性状况及其影响因素,为手足口病的预防与控制提供依据。方法 采集230名天津市武清区健康人群静脉血标本进行 EV71 和 Cox A16 中和抗体测定,用问卷进行影响因素调查,采用2检验对两种中和抗体阳性影响因素进行分析。结果 以抗体滴度1∶8作为临界值,调查对象EV71中和抗体阳性率为73.91%（170/230）,Cox A16中和抗体阳性率为76.52%（176/230）,差异无统计学意义（2=0.420,P=0.517）。EV71 与Cox A16中和抗体阳性率最高的年龄组分别为0~岁组、15~岁组（均为76.09%）与0～岁组（84.78%）,较低年龄组为5~岁组（71.74%）与15～岁组（69.57%）。不同年份间的EV71中和抗体阳性率差异有统计学意义（2=29.971,P=0.001）。EV71与 Cox A16 中和抗体滴度均以1∶4~ 1∶256居多,分别占82.61%（190/230）和 88.26%（203/230）。经分析发现,EV71 与Cox A16中和抗体阳性的重要影响因素分别为年份、是否外出后洗手与是否为学龄前儿童。结论 人群对EV71和 Cox A16普遍易感,70.00%以上的健康人群感染后均可产生EV71 或 Cox A16的特异性中和抗体,隐匿感染者作为手足口病传染源的意义可能较大。     

一起校园传染性红斑聚集性疫情流行病学调查

目的调查一起学校不明原因皮疹聚集性疫情的规模、病原和疾病传播的危险因素,提出针对性的预防控制措施建议。方法2018年4月4日,在广东省深圳市宝安区某学校开展不明原因皮疹聚集性疫情的调查处置工作。 制定病例定义,搜索病例,采用统一的流行病学个案调查表进行现场调查,描述病例的分布特征,采用回顾性队列研究方法调查发病的危险因素,采集病例血液标本进行病原抗体检测。结果共搜索到病例12例,罹患率为11.9%（12/101）。 采集病例血液标本4份,检测均为人类细小病毒B19型IgM和IgG抗体阳性。 回顾性队列研究显示与病例邻桌［RR＝4.3（1.2 ~ 14.9）］、曾与病例下棋［RR＝5.7（1.3 ~ 24.7）］是导致本次疫情的危险因素。结论本次事件为一起由人类细小病毒B19型感染导致的传染性红斑聚集性疫情,疾病传播的危险因素为密切接触。     

食源性金黄色葡萄球菌9种肠毒素基因的多重PCR检测

目的 建立多重PCR方法检测食源性金黄色葡萄球菌9种肠毒素基因,了解其在食源性金黄色葡萄球菌中的分布状况.方法 建立多重PCR方法检测144株食源性金黄色葡萄球菌的9种肠毒素基因,对其分布状况进行研究.结果 建立的多重PCR方法特异、高效,9种肠毒素基因在144株食源性金黄色葡萄球菌中的检出率由高到低依次为SEU (25.69％)、SEG (22.22％)、SEM (20.83％)、SEK (20.14％)、SEQ (18.06％)、SEH (15.97％)、SEN (10.42％)、SEJ (8.33％)、SEL(5.56％);52.78％的菌株含有该9种肠毒素基因中的至少1种,34.03％的菌株含有9种肠毒素基因中的两种或两种以上.结论 该多重PCR方法特异性高,快速简便,可用于金黄色葡萄球菌肠毒素基因的分布研究;144株食源性金黄色葡萄球菌中9种肠毒素基因均有检出,其中以SEU、SEG、SEM、SEK检出率较高.     

天津市武清区环境空气PM2.5与急性呼吸道感染性疾病的关联研究

目的 探讨PM_2.5浓度与急性呼吸道感染性疾病的关联。方法 收集2015－2017年环境空气主要污染物浓度指标、气象指标、11种急性呼吸道感染性疾病的发病或就诊资料,应用Spearman相关分析和因子分析等统计学方法分析每种疾病发病情况与PM_2.5浓度的关联。结果 2015－2017年武清区月均PM_2.5浓度范围为41.00~137.00 μg/m³,中位数为62.00 μg/m³,每年4-9月份53.00(46.50,63.00)μg/m³较低,10月-翌年3月份74.50(61.00,94.25)μg/m³较高,差异有统计学意义(U=43.000,P<0.001)。三年间的月均PM_2.5浓度差异无统计学意义(H=1.435,P=0.488)。研究病种每年4-9月份和10月-翌年3月份两时间段发病数据差异有统计学意义的是肺炎(t=2.850,P=0.007)、上感(U=30.000,P<0.001)和急性咽部炎症(U=79.000,P=0.009)和急性气管炎(t=3.529,P=0.001),三年间百日咳(H=6.751,P=0.034)、肺炎(F=16.671,P<0.001)和急性下呼吸道感染(H=16.727,P<0.001)的发病数据差异有统计学意义。研究病种中与PM_2.5浓度单因素分析相关系数具有统计学意义(P<0.05)的病种是水痘(r=0.375,P=0.024)、上感(r=0.503,P=0.002)、急性咽部炎症(r=0.385,P=0.020)和急性气管炎(r=0.575,P<0.001)。多因素因子分析中月均PM_2.5浓度在各自因子上的载荷系数分别为0.865、0.841、0.807和0.841,四个病种与含月均PM_2.5浓度的各因子得分相关系数也均有统计学意义(P<0.05)。急性气管炎与前一月的月均PM_2.5浓度单因素分析有关联(r=0.591,P<0.001),多因素分析与含月均PM_2.5浓度的因子得分也有关联(r=0.360,P=0.031),存在明显的滞后效应。结论 环境空气PM_2.5浓度的增加可使水痘、上感、急性咽部炎症和急性气管炎这些急性呼吸道感染性疾病发病升高。政府部门应采取措施减少环境空气污染,做好大众预防急性呼吸道感染性疾病的健康教育。     

食源性金黄色葡萄球菌溶血素基因的多重PCR检测和聚类分析

目的建立多重PCR方法检测金黄色葡萄球菌α-溶血素、β-溶血素、h-溶血素基因以及16S rDNA,了解食源性金黄色葡萄球菌中3种溶血素基因的分布情况和溶血表型,并对菌株进行聚类分析。方法建立多重PCR方法检测148株食源性金黄色葡萄球菌的hla、hlb和hemolysin基因,并研究其分布情况,同时用血平板法检验其溶血表型,对数据进行汇总分析。结果148株菌中131株检出hla基因(88.51%),90株菌检出hlb基因(60.81%),28株菌检出hemolysin基因(18.92%);表型溶血的有131株(88.51%),不溶血的有17株(11.49%);以溶血素基因型和溶血表型为聚类因素,将148株菌以100%相似度为界分为A～L共12个型,其中以A型为主,有58株(39.19%),B型37株(25.00%),C型18株(12.16%)。结论该四重PCR方法特异性高,快速简便,能满足高通量菌株筛选的要求;食源性金黄色葡萄球菌普遍携带hla基因,聚类分析以A型和B型为主。