转染肝细胞生长因子基因对移植颗粒脂肪新生血管形成的影响

脂肪移植要取得进展,就要深入研究移植后的再血管化[1].我们以腺病毒为载体,把肝细胞生长因子(HGF)基因导入大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs),然后与颗粒脂肪混合移植,充分发挥MSCs多项分化潜能和HGF强大的血管效应,旨在为颗粒脂肪移植建立新生血管诱导生物组织工程模式.     

人性化护理在腹腔镜膀胱肿瘤切除回肠代膀胱手术中的应用效果

目的探讨人性化护理在腹腔镜膀胱肿瘤切除回肠代膀胱手术中的应用效果。方法选择2015年8月至2017年9月我院确诊并收治入院的74例膀胱癌行腹腔镜膀胱肿瘤切除回肠代膀胱手术治疗的患者作为研究对象,将其随机等分为试验组和对照组。对照组给予手术室常规护理,试验组在此基础上实施人性化护理。比较两组患者手术时间、术中出血量、住院时间及护理满意度。结果试验组患者术中出血量少于对照组(P0.05),试验组患者手术时间、平均住院时间均短于对照组(P0.05),试验组患者护理满意度高于对照组(P0.05)。结论膀胱癌患者在实施腹腔镜膀胱肿瘤切除回肠代膀胱手术过程中进行人性化护理干预,对患者有积极作用,患者的满意度高,手术的相关情况和术后恢复也明显优于手术室常规护理,值得临床推广。     

肝细胞生长因子基因转染脂肪细胞对移植组织工程脂肪存活的影响**★

背景：在脂肪组织工程的研究中，若将种子细胞与支架材料复合后移植，则此组织工程脂肪将可替代颗粒脂肪。肝细胞生长因子可以促进血管生成、减少纤维组织增生。 目的：观察肝细胞生长因子基因修饰骨髓间充质干细胞来源的脂肪细胞对大鼠组织工程脂肪移植存活的影响。 设计、时间及地点：随机区组设计的动物实验，于2006-08/2007-07在解放军兰州军区兰州总医院医学科学实验中心完成。 材料：纳入Wistar大鼠用于分离、培养骨髓间充质干细胞及植入细胞-支架复合物。 方法：①分离培养雄性大鼠骨髓间充质干细胞，诱导成脂，携带绿色荧光蛋白基因及肝细胞生长因子基因的重组腺病毒毒株分别转染脂肪细胞，流式细胞仪测定转染效率，应用酶联免疫吸附试验法测定培养上清中肝细胞生长因子的表达，将脂肪细胞接种于聚乳酸聚乙醇酸共聚物支架。②将75只Wistar雌性大鼠按随机数字表法分为3组：脂肪细胞组、Ad-肝细胞生长因子转染组及Ad-绿色荧光蛋白转染组分别将脂肪细胞-聚乳酸聚乙醇酸共聚物、转染肝细胞生长因子基因脂肪细胞-聚乳酸聚乙醇酸共聚物、转染绿色荧光蛋白基因脂肪细胞-聚乳酸聚乙醇酸共聚物移植于大鼠腿部肌肉之间。 主要观察指标：移植后3，7，14，28，60 d，每组各取5只大鼠麻醉后处死，取出移植物。电镜观察；并行苏木精-伊红、油红O、Masson’s染色，观察病理改变；同时用免疫组织化学法检测组织中肝细胞生长因子表达，观察并计数血管生成。 结果：①骨髓间充质干细胞来源的脂肪细胞胞浆内富含丰富的脂滴，重组腺病毒感染复数=100时，携带绿色荧光蛋白基因的重组腺病毒株转染脂肪细胞效率可达64.39%。②移植3，7，14 d时，Ad-肝细胞生长因子转染组移植物中肝细胞生长因子的表达高于其他组（P < 0.05），且3 d达到高峰。③移植3，7，14，28，60 d时，Ad-肝细胞生长因子转染组移植物中血管生成高于其他组（P < 0.05），且7 d时血管增加的幅度最大。④移植28，60 d时，Ad-肝细胞生长因子转染组坏死程度均小于其他组，电镜下脂肪细胞也多于其他组。 结论：携带肝细胞生长因子基因的脂肪细胞在移植物中能够表达肝细胞生长因子，促进移植组织工程脂肪血管生成，进而促进移植组织的成活。     

Ad-GFP修饰MSCs静脉移植在严重烫伤延迟复苏大鼠体内的定向迁移

目的:观察携带目的基因的大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells ,MSCs) 静脉移植在严重烫伤延迟复苏损伤体内的分布.方法:分离培养MSCs,用Ad-GFP转染MSCs,25只Wistar大鼠随机分为延迟复苏组(A组,10只)、即时复苏组(B组,10只)、假伤组(C组,5只).A、B两组大鼠背部造成Ⅲ度30%烫伤,制备A组为延迟复苏模型,B组为即时复苏模型,同时制备C组为假伤模型,经股静脉移植转染Ad-GFP 48 h后的MSCs.24 h,7 d后取小肠、肝脏、肾脏、烫伤皮肤创缘等组织,快速冰冻切片,荧光显微镜下观察在体内的分布.结果:MSCs 体外分离培养扩增5代,细胞数可达(1～2)×1011个,具有多态性和贴壁生长特性,MOI=100时,Ad-GFP转染MSCs效率可达86.4%.经股静脉移植24 h,在延迟复苏组烫伤皮肤组织创缘,小肠黏膜广泛可见绿色荧光,而在肝、肺等器官少见,即时复苏组荧光以烫伤皮肤创缘分布为主,小肠黏膜较少,假伤组中绿色荧光分布以肝脏为主.延迟复苏组小肠荧光强度明显强于即时复苏组和假伤组(P《0.05),而延迟和即时复苏组皮肤创缘荧光强度又强于假伤组(P《0.05).结论:导入目的基因可能不会改变MSCs归巢特性,并将为后续启动基因治疗烧伤延迟复苏后的损伤研究提供参考.     

肝细胞生长因子基因转染骨髓间充质干细胞对脂肪颗粒移植存活率的影响

目的研究携带人肝细胞生长因子基因的重组腺病毒（Ad—HGF）修饰骨髓间充质干细胞（MSCs）对大鼠脂肪颗粒移植存活率的影响。方法用携带绿色荧光蛋白的重组腺病毒（Ad-GFP）、Ad—HGF转染雄性Wistar大鼠MSCs,测定转染效率与感染上清中肝细胞生长因子（HGF）的表达。用雌性Wistar大鼠150只,随机分为5组：空白对照组（A组）、Ad—HGF组（B组）、MSCs组（C组）、Ad—GFP感染MSCs组（D组）和Ad—HGF感染MSCs组（E组）,每组30只。各组均匀振动5分钟,将颗粒脂肪移植于自体背部皮下;移植后3、5、7、14、28、60d,每组各取5只大鼠脱颈处死,取出移植物;测体积、HE、Masson染色观察病理改变,免疫组织化学法测定组织中HGF表达和血管生成。结果积分吸光度＝100时,Ad—GFP转染MSCs效率可达89．6％;移植后3、5、7、14d,E组移植物中HGF的表达高于其他各组（P〈0．05）;移植后5、7、14、28、60d,E组血管数量也多于其他各组（P〈0．05）;28d和60d时,E组脂肪颗粒体积保持率明显好于其他4组（P〈0．05）。结论携带HGF基因的MSCs在移植物中能够持续表达HGF,有效地减少脂肪颗粒移植后的吸收,从而提高移植颗粒脂肪的存活率。     

无痛内镜下尼龙绳套扎联合高频电切治疗消化道大息肉的围术期护理

目的探讨无痛内镜下尼龙绳套扎联合高频电切治疗消化道大息肉的围术期护理。方法应用无痛内镜下尼龙绳套扎联合高频电切术对10例10枚消化道大息肉患者术前进行针对性心理护理,讲解术中操作过程,加强术中、术后护理及并发症观察。结果无痛内镜下尼龙绳套扎联合高频电切术治疗消化道大息肉成功率为100%,无1例出血、穿孔。结论合理有效的围术期护理是无痛内镜下尼龙绳套扎联合高频电切治疗消化道大息肉成功的保障。     

罗哌卡因联合地佐辛多模式镇痛在小儿唇裂修复术中的应用及其术后镇痛效果评价

目的：探讨罗哌卡因联合地佐辛多模式镇痛的术后镇痛效果,阐明其用于唇裂修复术患儿术后镇痛的可行性。方法：采用随机、对照、双盲的试验方法,选取60例行唇裂修复术患儿,随机分为罗哌卡因组、地佐辛组和多模式镇痛组,每组20例。罗哌卡因组和多模式镇痛组患儿于手术切皮前给予0.25%罗哌卡因1.5mL行眶下神经阻滞,地佐辛组患儿给予等体积生理盐水;地佐辛组和多模式镇痛组患儿于术毕前20min静脉注射地佐辛0.15mg·kg^-1,罗哌卡因组患儿注射等体积生理盐水。记录各组患儿年龄、体质量、麻醉和手术时间;记录苏醒、拔管时间、苏醒期躁动评分及发生率、有无喉和支气管痉挛;记录术后2、4、6、8、12和24h CRIES 评分;记录术后不良反应发生情况。结果：3组患儿年龄、体质量、麻醉和手术时间比较差异无统计学意义（P > 0.05）。多模式镇痛组和地佐辛组患儿苏醒、拔管时间长于罗哌卡因组（P < 0.05）,苏醒期躁动评分、躁动发生率3组间比较差异无统计学意义（P > 0.05）,均未发生喉及支气管痉挛。多模式镇痛组患儿术后2h CRIES评分最低,与其他2组比较差异有统计学意义（P < 0.05）;地佐辛组患儿术后4h CRIES评分较术后2h有所升高,罗哌卡因组和多模式镇痛组患儿术后4h CRIES评分低于地佐辛组（P < 0.05）;多模式镇痛组患儿术后6h CRIES评分仍最低,与其他2组比较差异有统计学意义（P < 0.05）,罗哌卡因组患儿术后6h CRIES评分较术后4h时有所升高,但与地佐辛组比较差异无统计学意义（P > 0.05）;术后8、12和24h CRIES评分3组间比较差异无统计学意义（P > 0.05）。多模式镇痛组患儿心动过速发生率最低,使用镇痛药例数最少,与其他2组比较差异有统计学意义（P < 0.05）,3组患儿均未发生呼吸抑制。结论：罗哌卡因联合地佐辛多模式镇痛可有效延长患儿术后镇痛持续时间,减少术后不良反应,可安全用于唇裂修复术患儿的术后镇痛。     

多媒体技术在护士腹腔镜培训中的应用

目的探讨多媒体技术在护士腹腔镜培训中的应用效果。方法将80名参加腹腔镜培训学习的护士,随机分为对照组和观察组,每组40名,分别应用传统的培训模式与多媒体技术进行培训。结果多媒体技术应用于腹腔镜培训的效果与传统培训模式比较,经统计学分析,均P<0.05,差异有统计学意义。结论多媒体技术应用于护士腹腔镜培训,有利于护士在短时间内掌握腹腔镜手术的配合技术。     

无痛胃镜下锐利异物取出术26例围术期护理

目的:探讨无痛胃镜下锐利异物取出术的围术期护理方法及效果。方法:对26例吞入锐利异物的患者在丙泊酚静脉麻醉的配合下行异物取出术,术中注意观察黏膜损伤情况及患者病情变化,术后加强观察。结果:本组26例患者均在无痛状态下顺利取出锐利异物,术中未出现黏膜严重刮伤、大出血及穿孔等并发症。结论:在无痛胃镜下锐利异物取出术中医护精湛的技术、密切的配合和积极的护理是手术成功的关键。     

针刺配合中药治疗脑外伤后顽固性呃逆的临床观察

目的：观察针刺配合中药治疗脑外伤后顽固性呃逆的临床疗效。方法将52例病例随机分为治疗组26例，对照组26例，治疗组采取针刺配合中药治疗呃逆，对照组仅采取针刺的方法。对2组临床疗效进行比较。结果治疗组治愈20例，显效2例，有效3例，无效1例，总有效率96.15%；对照组治愈7例，显效3例，有效8例，无效8例，总有效率69.23%。针刺组临床总疗效率治疗组优于对照组（P＆lt;0.01）。结论针刺配合中药治疗治疗脑外伤后顽固性呃逆是一种有效的治疗方法，值得推广应用。