丙型肝炎病毒E1E2蛋白原核表达载体的构建及表达产物的鉴定

目的 :构建丙型肝炎病毒 (HCV)包膜糖蛋白 (E1E2 )基因的原核表达载体 ,为研究HCVE1E2蛋白属性及基因免疫奠定基础。方法 :设计HCVE1E2区基因上、下游引物 ,分别引入BglⅡ及EcoRI酶切位点 ,以含有HCVH株基因序列的质粒pBRTM/HCV1- 30 11为模板 ,通过PCR扩增获得HCVE1E2区基因片段 ,将其克隆入原核表达载体pRSETA ,然后通过酶切和序列测定对其进行鉴定 ;将此表达载体转化入表达菌BL2 1(DE3)pLySs诱导表达 ,并采用SDS -PAGE对表达产物进行鉴定。结果 :经酶切及序列测定分析表明 ,成功地构建了重组原核表达载体pRSETA -HCVE1E2 ;SDS -PAGE显示目的蛋白大量表达 ,且呈非溶状态。结论 :HCVE1E2融合蛋白可以在大肠杆菌中大量表达 ,为HCVE1E2蛋白的制备及基因疫苗的研制奠定了基础。     

佐金平木治疗经期病三则

笔者近十余年来，运用佐金平木法治疗由木火刑金所致的经行目赤、经行鼻齿衄、经行便血证，颇获效验。兹报告如下：     

38例非胰岛素依赖型糖尿病浅析

随着人民生活水平的提高，近年来，城市糖尿病的发病率明显增高，且年龄在40～50岁较多见。糖尿病人由于脂质代谢紊乱，常可导致高脂蛋白血症，促进动脉粥样硬化的形成。本文对我院2000年2月至2003年2月经门诊及住院诊疗的40～50岁的非胰岛素依赖型糖尿病38例进行分析，同时与门诊查体中非糖尿病者的血脂进行比较分析。     

927名不同民族儿童智商调查分析

目的：了解新疆农牧区不同民族学龄儿童的智商(IQ)发育情况。方法：用绘人测验法对农牧区的汉、维吾尔、哈萨克、回族等共927名儿童的智商进行了筛查，并对结果进行统计学分析。结果：各民族儿童之间的智商有性别差异和族别差异。各民族儿童的智商与学习成绩有关。结论：新疆农牧区儿童智商偏底，需要加强教育，尤其是学前教育．     

胎盘生长因子在冠状动脉血运重建中的意义

目的 探讨胎盘生长因子(placental growth factor, PlGF)在冠状动脉血运重建中的意义.方法 2006年5月-2007年3月,对61例以胸痛为主要表现的患者行冠状动脉造影检查,记录Gensini冠脉病变积分.其中男53例,女8例;平均年龄61岁.对冠脉病变严重的26例患者行经皮经腔冠状动脉成型术(percutaneous transluminal coronary angioplasty, PTCA)及支架置入术,术后观察不良心血管事件发生情况.另取28例健康志愿者作为对照组,所有观察对象均抽静脉血测定血浆PlGF水平.结果 根据冠状动脉造影结果,胸痛患者可分为冠心病组(n=45)与非冠心病组(n=16).冠心病组血浆PlGF水平为(10.70±0.49)ng/L,明显高于非冠心病组(4.53±0.64)ng/L和对照组(3.64±0.36)ng/L,且差异均有统计学意义(P<0.001),非冠心病组与对照组间差异无统计学意义(P>0.05).相关分析显示,血浆PlGF水平与Gensini冠状动脉病变积分成强正相关(r=0.918,P<0.01).PTCA及支架置入患者术后30d随访,4例发生不良心血管事件,其PlGF水平为(13.98±3.39)ng/L,明显高于未发生心血管事件的患者(7.25±2.96)ng/L,且差异有统计学意义(P<0.01).结论 检测血浆PlGF水平在不明原因胸痛的鉴别诊断中具有一定意义,有助于冠心病的早期诊断;血浆PlGF水平越高,提示冠状动脉病变程度越严重;血浆PlGF水平对冠状动脉血运重建术后不良心血管事件的发生有潜在预测价值.     

听神经病的发病机制和临床电生理学特征

听神经病(auditory neuropathy,AN)首先由Starr在1996年报道并命名,是近年来逐渐为人们所认识的一种有特殊临床表现的听力损伤。其临床表现、诊断和处理皆有别于一般的感音神经性聋。而目前听神经病的病因、病变部位和发病机制等方面的认识还不十分明确,其临床表现及临床听力学     

低分子肝素治疗急性脑梗死的临床观察

目的 观察低分子肝素治疗急性脑梗死的临床疗效及对出凝血时间、凝血酶原时间、血小板的影响。方法 ６０例急性脑梗死患者,分为治疗组、对照组各３０例。治疗组采用低分子肝素静滴,对照组用低分子右旋糖酐治疗。结果 治疗组总有效率９３．３％,显效率６３．３％,明显优于对照组（７３．３％,４６．６％）。有显著性差异（Ｐ〈０．０１）;对出凝血时间、凝血酶原时间、血小板无显著性差异（Ｐ〉０．０５）,无１例继发出血。结论 低分子肝素治疗急性脑梗死是安全有效的。     

PD-1及其配体与免疫调节

机体在防御微生物感染与维持自身耐受之间保持着完美的平衡,而B7-CD28家族信号通路可以精确调节该平衡所需的刺激和抑制信号[1,2].B7-CD28家族有许多能削弱T细胞应答并促进T细胞耐受的抑制性信号通路,其中近年发现的PD-1-PD-L通路由于独特的抑制功能引人瞩目,被认为是影响自身免疫和感染性疾病慢性化的重要因素,该通路包括PD-1与它的两个配体:PD-L1和PD-L2.     

体外培养的嵌合体丙型肝炎病毒感染Huh7.5细胞的透射电镜观察

目的 通过透射电子显微镜技术观察体外培养的嵌合体丙型肝炎病毒(HCV)感染Huh7.5细胞后胞内病毒颗粒的形态学特征及细胞内部超微结构的变化.方法 将含有全长HCV嵌合基因组的质粒pFL-J6/JFH体外转录为HCV RNA,电穿孔转染至Huh7.5细胞,实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)测定培养上清中病毒数量;间接免疫荧光检测病毒蛋白的表达;收取转染后细胞培养上清感染原始Huh7.5细胞,制作超薄细胞切片,透射电子显微镜技术观察被感染细胞中病毒颗粒的形态学特征及细胞超微结构的变化.结果 qRT-PCR显示不同时间点收取的转染后细胞培养上清中含有高水平的病毒量;间接免疫荧光显示病毒NSSA非结构蛋白高表达;透射电子显微镜观察到被感染的Huh7.5细胞内含有大量有包膜或无包膜的病毒样颗粒,细胞质内部分膜性细胞器增生,出现黄病毒科病毒感染后特征性结构及某种未知结构等.结论 体外培养的嵌合体HCV具有HCV颗粒的形态学特征,并能够有效感染人源性肝细胞Huh7.5.