细胞外基质磷酸化糖蛋白与其多肽链片段的生物学作用

细胞外基质磷酸化糖蛋白(MEPE)是一种细胞外基质的非胶原磷酸化糖蛋白,也是一种调磷因子,对磷酸盐代谢紊乱及各种骨组织疾病的成骨细胞增生及牙周组织生理连接的重建有重要作用.dentonin/AC100作为MEPE的一个基因片段,对骨组织形成的作用已成为研究热点.本文就近年来MEPE与其多肽链片段dentonin/AC100的研究进行一综述.     

黄芩苷对变异链球菌UA159体外的抑制作用

目的探讨黄芩苷对变异链球菌国际标准株UA159的体外抑制作用。方法采用液体倍比稀释法结合酶标仪测OD600值测定黄芩苷对变异链球菌UA159的最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)。利用酶标仪测定不同浓度的黄芩苷药液中变异链球菌UA159的OD600值,绘制生长曲线;计算黏附率及黏附抑制率;用结晶紫定量法测定黄芩苷对变异链球菌UA159生物膜形成的影响;用扫描电镜观察黄芩苷对变异链球菌UA159细菌总量的影响。结果黄芩苷对变异链球菌UA159最低抑菌浓度为12 mg/mL;随着黄芩苷药液浓度的增加,变异链球菌UA159生长速度缓慢,并且其黏附率下降,黏附抑制率增加(P<0.05)。结晶紫定量法结果显示,与菌液组相比,0、6、12 h时加入黄芩苷药液变异链球菌UA159生物膜形成量显著降低(P<0.001)。扫描电子显微镜下,0、6、12 h时加入黄芩苷后细菌总量均明显下降。结论黄芩苷能够抑制体外变异链球菌UA159的生长繁殖;同时其对变异链球菌UA159的黏附、生物膜形成均有抑制作用。     

乳牙高毒力变异链球菌HtrA缺陷株的构建及转化力的研究

目的:构建乳牙高毒力变异链球菌HtrA基因缺陷株(简称HtrA缺陷株),比较HtrA缺陷株和高毒力株的转化力。方法:将乳牙变异链球菌HtrA高毒力菌株复苏,厌氧培养,应用基因同源重组技术进行HtrA基因缺陷株的构建。以含有HtrA基因的变异链球菌标准株DNA作为参照进行PCR鉴定。将乳牙变异链球菌HtrA高毒力株与HtrA缺陷菌株分别在TPY液体培养基中增菌,厌氧培养,以菌落计数来比较二者的转化力。结果:凝胶自动成像分析结果显示,HtrA缺陷株在500 bp未出现HtrA基因片段的特异性电泳条带,而在710、1 200、1 100 bp处分别出现了红霉素抗性基因片段、HtrA基因上游引物序列合并红霉素抗性基因引物HtrAUF/P1以及HtrA基因下游引物序列合并红霉素抗性基因引物HtrAUR/P2的特异性条带。而HtrA高毒力株的表现则相反。转化力检测结果显示:6、9、12、24、48 h,高毒力株的菌落数量均明显多于HtrA基因缺陷株(P<0.05)。结论:通过基因重组等方法可以将变异链球菌高毒力株中的Htr A基因敲除,构建高毒力变异链球菌Htr A基因缺陷株;变异链球菌高毒力株的转化力高于HtrA基因缺陷株,提示HtrA与变异链球菌的致龋性有关。     

一种新型通用型牙本质粘结剂对牙本质粘结强度的体外评价

目的:评价一种新型通用型牙本质粘结剂(All Bond Universal,ABU)对牙本质的粘结强度,为临床选择合适的粘结剂提供参考依据。方法:选取人体12颗无龋坏磨牙,磨除牙釉质暴露牙本质面,分别用酸蚀-冲洗法和一步自酸蚀法使用All Bond Universal粘结剂,在其上堆砌树脂,并与酸蚀-冲洗粘结剂Prime&Bond NT(PBN)和一步法自酸蚀粘结剂G Bond(GB)进行对照。试样于37℃去离子水储存24 h后,每颗牙齿垂直于粘结面制备出0.81 mm2的树脂/牙本质试件,进行牙本质粘结微拉伸强度(μTBS)测试。结果:通用型牙本质粘结剂All Bond Universal在两种粘结方法下,其粘结力均高于对照组;就All Bond Universal本身而言,酸蚀-冲洗技术可以提高其粘结强度。结论:这种新型牙本质粘结剂具有较高的粘结强度,并且酸蚀-冲洗技术能提高其粘结力。     

牙菌斑生物膜的细菌生长抑制因子

牙菌斑生物膜中的细菌是龋病发生的先决条件,而口腔内存在多种细菌生长的抑制因子,它们对细菌的生长或菌斑的形成起一定抑制作用。细菌生长的抑制因子主要来自宿主和细菌本身产生的细菌素以及其他代谢产物,本文就致龋菌生长抑制因子的种类及作用的研究进展作一综述。     

不同龋敏感儿童口腔不同基因型变异链球菌临床分离株在不同pH条件下产生GTF能力的比较研究

目的:探讨不同龋敏感儿童口腔变异链球菌不同基因型菌株在不同pH条件下产生GTF的能力.方法:从不同龋敏感儿童口腔变异链球菌中选取66株临床分离株,常规复苏、增菌并配制相同密度的菌悬液后,接种于不同pH值(以0.5为间隔,pH 5.0～7.0)的含2.5 g/L葡萄糖和0.05％ Tween 80的TYC培养基中厌氧培养18h;采用Somogyi法测定还原糖含量,计算酶活性.结果:在同一pH条件下,不同龋敏感儿童口腔变链菌GTF活性的差异具有统计学意义(P＜0.05),龋敏感性越高,GTF活性越大;同一龋敏感儿童口腔变链菌不同基因型菌株GTF活性的差异也具有统计学意义(P＜0.05),GTF活性随基因型的增加而增加;当pH5.5时,高龋、中龋儿童携带一种基因型菌株GTF活性显著下降(P＜0.05).结论:不同龋敏感儿童口腔变异链球菌不同基因型菌株在不同pH条件下GTF活性不同,携带基因型越多的菌株GTF活性越高.     

HtrA 对乳牙高致龋性变异链球菌 GTFs 表达及活性的影响

目的：研究乳牙高致龋性变异链球菌（S．mutans）高温需要 A 蛋白（HtrA）基因缺陷株和 HtrA 高毒力株在体外非应激环境中的葡萄糖基转移酶（GTFs）表达能力及其生物学活性的差异。方法：选用前期已获得的乳牙高致龋性 S．mutans HtrA 基因缺陷株和高毒力株（HtrA 高毒力株和 HtrA 基因缺陷株）,在 BHI 培养基培养至指数期第10 h 后。以实时逆转录聚合酶链反应（real-time RT-PCR）方法检测2菌株 gtfB,gtfC,gtfD 的表达情况。提取蛋白,以蒽酮硫酸法检测其生物学活性,以蛋白免疫印迹（Western Blot）检测其表达量。结果：GTFs 蛋白和基因在乳牙 S．mutans HtrA 基因缺陷株中的表达高于 HtrA 高毒力株,但其生物学活性低于高毒力株。结论：HtrA 基因在乳牙 S．mutans GTFs 的分泌过程中起重要的调控作用。     

酪蛋白磷酸肽钙磷复合体对粘性放线菌产酸影响的实验研究

[目的]研究酪蛋白磷酸肽钙磷复合体(Casein phosphopeptide- Amorphic Calcium Phosphate,CPP-ACP)对粘性放线菌产酸的影响,探讨CPP-ACP作为一种生物防龋制剂的可行性. [方法]将粘性放线菌加入含不同浓度CPP-ACP的蔗糖培养基中,厌氧培养48 h,用精密pH计检测培养基上清液的pH值,计算pH的变化值△pH(初始pH值-终末pH值). [结果]随CPP-ACP浓度的升高,培养基上清液的pH值升高,△pH降低,即粘性放线菌的产酸量降低(P＜0.01). [结论] CPP-ACP对粘性放线菌产酸具有抑制作用,且随CPP-ACP浓度的升高抑制作用增强.     

饮料导致牙釉质脱矿作用的实验研究

目的:比较不同种类饮料对牙釉质的脱矿作用。方法:采用微量化学分析法测定饮料在处理牙釉质后1~7d 饮料中钙和磷浓度的变化。结果:实验饮料除矿泉水外对牙釉质都具有脱矿作用,导致牙釉质钙和磷的溶出。钙和磷的溶出因饮料的种类而异,差异具有显著性,P<01001。随时间的延长,钙和磷的溶出也具有显著性差异,P< 01001。钙和磷在7d内的总溶出量也因饮料的种类而异,差异具有显著性,P<01001。果汁类的钙和磷总溶出量最高,分别为11355Lmol/L?01250Lmol/L和11780Lmol/L?01270Lmol/L;钙奶最低,分别为01290Lmol/L?01092Lmol/L 和01239Lmol/L?01050Lmol/L。结论:饮料对牙釉质具有脱矿作用,脱矿作用的强弱与饮料的种类有关,果汁类最强,钙奶最弱。     

饮料对牙釉质表面显微硬度影响的研究

目的：研究不同饮料对牙釉质表面显微硬度的影响。方法：用不同种类饮料处理牙釉质后,采用维氏显微硬度仪测定牙釉质的处理前和处理后的1－7d表面显微硬度的改变。结果：饮料能引起牙釉质表面显微硬度的降低,降低的程度与饮料的种类有关,不同种类饮料导致牙釉质表面显微硬度降低的强度不同,差异有统计学意义（P＜0.001）。随时间的延长,表面显微硬度也随之降低（P＜0.001）。结论：饮料对牙釉质都具有脱矿作用,脱矿随饮料接触牙齿时间的延长而增加。