瘦素在皮肤和黏膜创伤修复中的作用

皮肤和黏膜损伤是日常生活和修复外科常常要面对的问题,越来越多的学者把目光集中在研发价廉物美的促进创伤修复的新药物上。瘦素(Leptin),亦称消脂素,是一种由ob基因表达的活性蛋白,主要参与机体摄食、能量代谢、体重平衡的调节,发挥抑制摄食和促进能量消耗的作用。此     

高灵敏orexin A放免法的建立及其对大鼠缺血再灌注的应用

建立高灵敏orexinA放射免疫分析方法 (RIA) ,探讨肠缺血再灌注损伤对血浆及下丘脑orexinA水平的影响。采用氯胺T法制备碘标记orexinA ,抗原抗体反应采用平衡一步法 ,4℃温育 2 4h后 ,经PR试剂分离结合和游离的标记抗原 ,并用该方法测量正常人、高血脂患者血浆orexinA水平及大鼠肠缺血再灌注损伤后血浆及下丘脑组织中orexinA浓度的变化。结果表明 ,本方法测定orexinA标准曲线范围为 2 1 - 2 0 0 0 pg/mL ,最低检出量为 2 1 pg/mL ,批内和批间变异系数均小于 1 0 %。 30名正常人血浆orexinA水平为 338.4 8± 2 0 .2 4 pg/mL ,30例高血脂患者为 343.5 1± 1 5 .4 9pg/mL ;大鼠肠缺血再灌注损伤前后及不同损伤时间点orexinA的变化差异亦无显著性。本文提示orexinARIA方法灵敏度和特异性较高 ,可用于人血浆、大鼠血浆和下丘脑组织orexinA的检测     

IGF-Ⅰ RIA的建立及初步应用

目的:建立胰岛素样生长因子Ⅰ(insulin-like growth factor-Ⅰ,IGF-Ⅰ)放射免疫分析并初步应用.方法:用氯胺-T法制备高比活度125I-IGF-Ⅰ,建成IGF-Ⅰ放射免疫分析.结果:本法测定范围为(20～2400)ng/ml.正常对照组血清IGF-Ⅰ含量为(173.2±46.1)ng/ml,而心力衰竭组含量为(124.5±28.9)ng/ml,显著低于正常对照组(P＜0.01).结论:该IGF-Ⅰ放免法准确,结果可靠,可应用于临床及实验研究.     

Leptin RIA在大鼠脓毒败血症模型中的应用

目的:研究脓毒败血症对外周血瘦素(Leptin)表达水平的影响,探讨Leptin在急性创伤炎症反应中的作用.方法:建立大鼠盲肠结扎穿孔模型,设立假手术组、单纯损伤组和脂肪乳、雌二醇、胰岛素组等干预能量代谢和神经-内分泌功能的实验组,每组10只,并采用自建的高灵敏大鼠Leptin RIA测量损伤后12h血清Leptin浓度的变化.结果:所用Leptin RIA标准曲线形态良好,可获得各实验组血清Leptin浓度.与伤后假手术组血清Leptin水平相比,其他四组与之无显著差异,脂肪乳组有升高的趋势,而其他三组均为降低的趋势.另外,脂肪乳组显著高于单纯损伤组和雌二醇组.结论:脓毒败血症引起内源性Leptin表达不足,早期给予能量补充有望升高Leptin表达水平,而干扰下丘脑-垂体轴功能或降低能量储备则会抑制Leptin所发挥的保护效应.     

传染性非典型肺炎患者白细胞介素1β含量变化及意义

目的:观察传染性非典型肺炎患者血清白介素 1β(IL 1β)含量变化。方法:用放射免疫法检测了6 6例SARS患者血清IL 1β含量,与正常对照组作比较。结果:进展期SARS患者血清IL 1β含量为0 2 9±0 2 0ng/ml,明显高于对照组;重型SARS患者血清IL 1β含量为0 76±0 37ng/ml,显著高于普通型SARS患者;重型SARS患者恢复期血清IL 1β含量变化多样。结论:SARS患者存在免疫反应异常,血清IL 1β含量变化可能是SARS发病机制中的一个重要环节     

正常血钾型周期性麻痹SCN4A基因R675Q新突变细胞模型的建立及初步研究

目的 建立一个正常血钾型周期性麻痹(normokalemic periodic paralysis,normoKPP)R675Q新突变的细胞模型并对其通道电流进行初步研究.方法 用编码野生型人骨骼肌钠离子通道a亚单位基因(skeletal muscle Na channel type 4 alpha subunit gene,SCN4A)的cDNA为模板,PCR技术定点突变后磷酸钙沉淀法瞬时转染突变质粒至293细胞,逆转录PCR和Western印迹验证目的 基因和蛋白的表达;膜片钳技术全细胞记录野牛和突变型钠通道电流.结果 突变经测序得以证实;转染后24 h和48h,突变通道的基因及蛋白表达量显著增高;相同的测试电压下R675Q钠通道相对电流在到达峰值前小于野生型钠通道,到达峰值后大于野生型钠通道;R675Q和野生型钠通道均在0 mV测试电压刺激下到达峰值.结论 成功建立了正常血钾型周期性麻痹R675Q新突变的细胞模型;R675Q突变同时提高了通道的激活和失活,其所在的S4区域可能和患者发作性力弱的症状密切相关.     

转染反义磷脂酶A2寡核苷酸抑制LPS诱导Hela细胞分泌IL-1β和IL-6

目的：研究脑浆型磷脂酶A2(cytosolic phospholipase A2,cPLA2,85—kD PLA2)在脂多糖诱导Hela细胞释放细胞因子IL-1β、IL-6的信号机制中的作用。方法：①利用脂质体将cPLA2的反义寡核苷酸转染入Hela细胞，通过聚合酶链式反应(RT—PCR)及Western杂交印迹分析检验胞浆中cPLA2人水平的变化；②用放免方法检测不同时间培养上清中的IL-1β、IL-6浓度。结果：①转染后cPLA2的蛋白表达明显减少，但mRNA水平未见显著改变；②Hela细胞释放IL-1β、IL-6随cPLA2人反义寡核苷酸浓度的增加而减少。结论：cPLA2人LPS刺激的Hela细胞释放炎性细胞因子IL-1β、IL-6的过程中可能发挥重要的信号传递作用。     

免疫脂质体与临床

将特异性抗体粘附于脂质体上形成免疫脂质体,它能特异性识别表达具有某种抗原的细胞或组织.由它携带药物具有靶向性强,毒副作用小,半衰期长等优点.针对其特点,临床应用免疫脂质体开展了对多种疾病的治疗.根据免疫脂质体携带药物对疾病治疗的优缺点,本文综述了近几年的临床观察和研究的进展.     

瘦素(leptin)对ECV-304细胞氧化应激的保护作用

目的:研究外源性瘦素(leptin)在细胞氧化应激中对细胞存活率的影响,探讨leptin在抗氧化应激方面的作用.方法:利用H2O2诱导人脐静脉内皮细胞系ECV-304细胞建立细胞氧化应激模型,设立正常对照、单纯损伤和不同浓度leptin干预组,每组7例,采用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞存活率;比色法测定细胞上清液中丙二醛(MDA)和乳酸脱氢酶(LDH)的含量.结果:与正常对照组相比,加入外源性leptin的三组正常ECV-304细胞存活率无显著变化,但25μg/L leptin组有升高的趋势,100μg/L leptin组有降低的趋势.与单纯损伤组相比,加入外源性leptin的三组损伤ECV-304细胞存活率显著升高(P均＜0.05).与单纯损伤组相比,加入外源性leptin的三组ECV-304细胞上清液中MDA生成量和LDH释放量显著下降(P均＜0.05).结论:leptin对ECV-304细胞的氧化应激具有剂量依赖性的保护作用.     

烫伤应激反应后大鼠血浆TNF与脑组织M受体的变化

将Wistar大鼠随机分成对照组、烫伤后24、48、72小时组。为开水烫伤,背部创面控制30%。各组采用双抗体夹心法测血浆中TNF含量,所用标准TNF和抗TNF单抗均由军事医学科学院、基础所、分子免疫室沈倍奋教授馈赠。对照组及烫伤后24、48、72小时血浆TNF分别为5.12±0.23(n=6),38.44±13.81(n=